NEB酶-血源扩增 Hemo KlenTaq

NEB酶-血源扩增 Hemo KlenTaq
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 特殊PCR

血源扩增 Hemo KlenTaq

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#M0332L
1,000 次反应
4,879.00元
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Hemo KlenTaq 信息

血源扩增 Hemo KlenTaq®                             

概述

Hemo KlenTaq 是截短后的 Taq DNA 聚合酶,它缺失了 N 端的 280 个氨基酸。Hemo KlenTaq 还有其它突变,这些突变使它能够耐受全血中存在的抑制剂。此酶能够扩增人和小鼠全血样品中的 DNA 而无需事先提纯。Hemo KlenTaq 在 25 μl 的反应体系中能够耐受高达 20% 的全血(50 μl 反应体系中耐受 30%)。在大多数抗凝剂存在下 Hemo KlenTaq 依然表现良好,包括肝素、柠檬酸和 EDTA。

来源

携带有突变的 Taq DNA 聚合酶基因的 E. coli 菌株,此蛋白缺失了 N 端的 5´ 结构特异性核酸内切酶结构域,其基因内部发生了三个点突变。

反应缓冲液

1X Hemo KlenTaq 反应缓冲液 [60 mM Tricine,5 mM (NH4)2SO4,3.5 mM MgCl2,6%甘油,pH 8.7 @ 25℃]。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。
KLENTaq® is a registered trademark of Wayne M.Barnes.
血源扩增 Hemo KlenTaq®                             

NEB酶-EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶

NEB酶-EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 特殊PCR

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶

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#M0490L
500 次反应(50 μl 反应体系)
2,909.00元
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100 次反应(50 μl 反应体系)
749.00元

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相关产品
EpiMark 重亚硫酸盐转化试剂盒

EpiMark 聚合酶信息

EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                             

概述

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶是重亚硫酸盐处理的 DNA 扩增操作的绝佳选择。该酶是 Taq DNA 聚合酶和一种对温度敏感的适配体抑制剂的混合物。该抑制剂能够与聚合酶可逆结合,在 45℃ 以下抑制聚合酶活性,而在 PCR 热循环条件下又可以释放聚合酶,所以该酶可以在室温下操作却不需要额外高温步骤来激活聚合酶。

来源

来源于 E. coli 菌株,该菌株携带有来自 Thermus aquaticus YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因。

浓度

5,000 units/ml。

NEB酶-LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液

NEB酶-LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 特殊PCR

LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液

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#M0533L
500次反应 (50 μl 反应体系)
7,369.00元
#M0533S
100 次反应 (50 μl 反应体系)
1,829.00元

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相关产品

LongAmp® Taq DNA 聚合酶

LongAmp® 热启动 Taq DNA 聚合酶

LongAmp® Taq 2X 预混液

LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液

LongAmp® Taq PCR 试剂盒

LongAmp Taq 聚合酶信息

LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液                             

概述

LongAmp Taq DNA 聚合酶是 Taq 和 Deep Vent DNA 聚合酶的优化混合,相比单用 Taq DNA 聚合酶,它能以更高的保真度扩增出更长的 PCR 产物。

LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶

LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶利用了一种特定合成的核酸适配体,它能够与酶可逆结合,当温度低于 45℃时抑制聚合酶活性,正常的热循环条件下释放聚合酶。

其它剂型

为了加样方便,LongAmp Taq 与 Long Amp 热启动 Taq DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。LongAmp Taq PCR 试剂盒包含 LongAmp Taq DNA 聚合酶(2,500 units/ml)、dNTP 混合液(10 mM)、LongAmp Taq 反应缓冲液套装(5X)、MgSO4(100 mM)和无核酸酶污染的水。

浓度

2,500 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。

LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液                             

NEB酶-Vent DNA 聚合酶

NEB酶-Vent DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 其它 PCR 聚合酶

Vent DNA 聚合酶

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#M0254L
1,000 units
3,129.00元
#M0254S
200 units
779.00元
#M0254V
100 units
419.00元

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相关产品
Vent® (exo) DNA 聚合酶。

Vent/Deep Vent 聚合酶信息

Vent® DNA 聚合酶                             

概述

Vent DNA 聚合酶是较早应用于 PCR 的一种高保真耐热 DNA 聚合酶,其保真度比 Taq DNA 聚合酶高 5 倍。该酶具有高保真性的原因,部分是由于其自身具有 3´ →5´ 核酸外切酶校读活性。在 95℃ 温育 1 小时后,仍具有 90% 以上的聚合酶活性。
Vent (exo-) DNA 聚合酶是 Vent DNA 聚合酶经基因工程改造而得,去除了 3´ →5´ 核酸外切酶校读活性,其保真度有所降低,大约比 Taq DNA 聚合酶高 2 倍。

来源

Vent DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有来自古菌 Thermococcus litoralis 的 Vent DNA 聚合酶基因。Vent (exo-) DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有 Vent (D141A/E143A)DNA 聚合酶基因,此酶为天然酶经过基因工程改造而得。

浓度

2,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。
Vent® DNA 聚合酶                             

NEB酶-Vent (exo–) DNA 聚合酶

NEB酶-Vent (exo–) DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 其它 PCR 聚合酶

Vent (exo) DNA 聚合酶

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#M0257L
1,000 units
3,129.00元
#M0257S
200 units
779.00元
#M0257V
100 units
419.00元

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概述
VentR DNA 聚合酶是较早应用于 PCR 的一种高保真耐热 DNA 聚合酶,其保真度比 Taq DNA 聚合酶高 5 倍。该酶具有高保真性的原因,部分是由于其自身具有 3´→5´ 核酸外切酶校读活性。在 95℃ 温育 1 小时后,仍具有 90% 以上的聚合酶活性。

VentR (exo) DNA 聚合酶是 VentR DNA 聚合酶经基因工程改造而得,去除了 3´→5´ 核酸外切酶校读活性,其保真度有所降低,大约比 Taq DNA 聚合酶高 2 倍。

Vent® (exo–) DNA 聚合酶                             
使用 Vent DNA 聚合酶扩增 Jurkat 细胞的基因组 DNA。扩增片段长度见胶图下方。M 为 1 kb DNA Ladder(NEB #3232)。

来源

VentR DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有来自古菌 Thermococcus litoralis 的 Vent DNA 聚合酶基因。VentR (exo) DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有 Vent (D141A/E143A) DNA 聚合酶基因,此酶为天然酶经过基因工程改造而得。 

浓度

2,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。 

NEB酶-Deep Vent DNA 聚合酶

NEB酶-Deep Vent DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 其它 PCR 聚合酶

Deep Vent® DNA 聚合酶

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#M0258L
1,000 units
4,509.00元
#M0258S
200 units
1,129.00元
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100 units
529.00元

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相关产品
Deep Vent® (exo) DNA 聚合酶

概述

Deep VentR DNA 聚合酶是一种高保真的耐热 DNA 聚合酶,具有高保真性的原因,部分是由于其自身具有 3´→5´ 核酸外切酶校读活性。Deep VentR DNA 聚合酶比 VentR DNA 聚合酶在 95℃ 到 100℃
之间更稳定,其在 100℃ 的半衰期是 8 小时。
Deep VentR (exo) DNA 聚合酶是利用基因工程技术去除了 Deep VentR DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶校读活性而得。

来源

Deep VentR DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有来自 Pyrococcus species GB-D 的Deep VentR DNA 聚合酶基因。Deep Vent (exo) DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有 Deep Vent (D141A/E143A) DNA 聚合酶基因,此酶为天然酶经过基因工程改造而得。

浓度

2,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。

NEB酶-Deep Vent (exo–) DNA 聚合酶

NEB酶-Deep Vent (exo–) DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 其它 PCR 聚合酶

Deep Vent (exo) DNA 聚合酶

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#M0259L
1,000 units
4,509.00元
#M0259S
200 units
1,129.00元
#M0259V
100 units
599.00元

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相关产品
Deep Vent® DNA 聚合酶
 

概述

Deep VentR DNA 聚合酶是一种高保真的耐热 DNA 聚合酶,具有高保真性的原因,部分是由于其自身具有 3´→5´ 核酸外切酶校读活性。Deep VentR DNA 聚合酶比 VentR DNA 聚合酶在 95℃ 到 100℃
之间更稳定,其在 100℃ 的半衰期是 8 小时。
Deep VentR (exo) DNA 聚合酶是利用基因工程技术去除了 Deep VentR DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶校读活性而得。

来源

Deep VentDNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有来自 Pyrococcus species GB-D 的Deep VentRDNA 聚合酶基因。Deep Vent (exo) DNA 聚合酶纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带有 Deep Vent (D141A/E143A) DNA 聚合酶基因,此酶为天然酶经过基因工程改造而得。

浓度

2,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。

NEB酶-LAMP 荧光染料

NEB酶-LAMP 荧光染料
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

LAMP 荧光染料

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#B1700S
500 rxns
629.00元

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特性

 如需设计 LAMP 引物,请点击 NEB LAMP Primer Design Tool

·用于 LAMP 反应的实时荧光检测

·WarmStart® LAMP 试剂盒 (DNA & RNA) (NEB #E1700) 的组分之一。

·该产品足以用于至少 500 次反应

·如需了解 LAMP 及其它等温扩增方法,请点击 Learn more

·如需了解 RT-LAMP COVID-19 快速检测中的应用,请点击 Learn more

  ·如需了解 NEB 对于 COVID-19 研究的支持,请点击 Learn more

产品说明

 LAMP 荧光染料是一种核酸嵌入染料,可通过荧光值的测量实现 LAMP 反应的实时检测。该产品提供 50 X浓度,足以用于至少 500 LAMP 反应(如使用普通 qPCR 仪器检测,建议 25 µl LAMP 反应体系中加入0.5 µl LAMP 荧光染料)。如使用其它检测仪器,可能需要进一步稀释染料(终浓度为 0.1-0.5 X)。
普通荧光定量检测仪器,请选择 SYBR®/FAM 检测通道

NEB酶-WarmStart LAMP 试剂盒 (DNA & RNA)

NEB酶-WarmStart LAMP 试剂盒 (DNA & RNA)
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

WarmStart LAMP 试剂盒 (DNA & RNA)

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#E1700L
500次反应
10,419.00元
#E1700S
100次反应
2,609.00元

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特性
·RNA 和 DNA 模板的 LAMP 扩增反应
·优化预混液,提高了 LAMP 反应的特异性和灵敏性
·独特的双热启动机制支持室温建立反应体系
·适用多种检测方法:荧光检测、浊度分析、变色检测和电泳检测等

概述

(LAMP)环介导等温扩增反应是一种核酸扩增技术,广泛用于目标 DNA 或 RNA 的检测。WarmStart LAMP 试剂盒(DNA & RNA)环介导等温扩增反应提供简单、一步解决方案,适用于检测 DNA 和 RNA 的 LAMP 和 RT-LAMP 实验。LAMP和 RT-LAMP 是常见的等温扩增技术,使用 LAMP 特异性引物(用户自己提供)和链置换聚合酶快速检测目标核酸。该试剂盒是 WarmStart LAMP 2X 预混液,包含 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶、WarmStartRTx 反转录酶和优化的 LAMP 缓冲液。经基因工程改造,显著提高了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和WarmStart RTx 反转录酶在 LAMP 和 RT-LAMP 实验中的扩增能力。同时提供荧光染料,用于实时定量荧光检测。WarmStart LAMP 试剂盒可以兼容多种检测方法,包括浊度检测、实时荧光检测(当使用LAMP 荧光染料时)和反应结束可视法。
WarmStart LAMP 试剂盒组成:
– WarmStart LAMP 2X 预混液
– LAMP 荧光染料(50X)

NEB酶-WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒(含 UDG)

NEB酶-WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒(含 UDG)
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒(含 UDG)

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#E1708L
500 rxns
13,099.00元
#E1708S
100 rxns
3,279.00元

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产品特点

 设计 LAMP 引物,请使用 NEB LAMP Primer Design Tool

·为环介导等温扩增(LAMP)提供便捷的一步法解决方案,可用于 DNA 或 RNA(RT-LAMP)样品
·预混液含热敏 UDG 和 dUTP,降低残留污染风险
·包含荧光染料,可对 LAMP/RT-LAMP 反应进行实时荧光测量
·温启动技术可在室温下抑制酶活性
·如需了解使用 RT-LAMP 进行 COVID-19 快速筛查,请点击 Learn more
·试剂盒中的预混液(NEB #M1708)和 LAMP 荧光染料(NEB #B1700)可单独提供

产品描述

 WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒(含 UDG)为 LAMP/RT-LAMP 的实时荧光检测提供了便捷的一步法解决方案。LAMP 和 RT-LAMP 是一种常用等温扩增技术,通过使用 LAMP 特异性引物(用户自备)和链置换 DNA 聚合酶进行靶标核酸的快速检测。该试剂盒包含的 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)(NEB #M1708),是在优化后 LAMP 缓冲液中混入了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶均经过基因工程改造,提高了在 LAMP 和 RT-LAMP 反应中的性能。试剂盒还提供 50X LAMP 荧光染料,用于实时荧光检测。

由于先前扩增的产物会无意中成为后续反应的底物造成污染,因此预混液中的 dUTP 和热敏 UDG 可有效降低残留污染风险。热敏 UDG 在温度>50℃时可完全失活,因此对反应没有影响。
图 1:LAMP/RT-LAMP 预混液和适用样品类型
NEB 基于 pH 变化的 WarmStart 变色LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含/不含 UDG)(NEB #M1804)(NEB# M1800)缓冲力低,因此可使用 pH 敏感染料进行可视化扩增检测。基于 pH 值改变而产生的颜色变化(如粉红变黄色)所需缓冲力要低,高缓冲力样品或酸性样品可能会影响颜色变化,因此,这种方法限制了检测样品的种类。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含/不含 UDG)(NEB #M1708,NEB #E1708)(NEB #E1700)是完全缓冲的,可检测所有样品类型,适用于多种检测方法,包括荧光或其它变色染料(例如:羟基萘酚蓝)
图 2:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测
 使用 WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(不含 dUTP/UDG)(NEB #M1700 试剂盒中的组分)和 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)(NEB #M1708)进行 RT-LAMP(RNA 靶标)或 LAMP(DNA 靶标)实验。反应加入 1X LAMP 引物和 1X LAMP 荧光染料后,分别加入三个数量级的 Jurkat RNA 或 Jurkat DNA (10 ng-0.1 ng)和无模板对照(NTC),每个样品做 4 个重复,形成 25 µl 反应体系,置于 96 孔板中 65℃孵育 40 分钟。使用实时热循环仪(Bio-Rad® CFX96)中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外,每个样品都检测到所有 4 个重复(注:如果各重复的检测时间相似,则检测点重叠)。总体而言,各样品检测结果显示:NEB #M1700 和 NEB #M1708 性能一致。无模板对照均无扩增。
图 3:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)与自动化反应装置兼容
通过手动或 TEMPEST® 自动化液体处理工作站(96 孔,25 µl 反应)建立针对于合成 SARS-CoV-2 RNA 样品的 LAMP 检测体系。检测样品为:阳性样品(人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA)或无模板对照(NTCs)。经 65℃ 孵育 40 分钟,使用 1X LAMP 荧光染料在实时荧光仪器(Bio-Rad CFX96)中的 SYBR/FAM 通道检测。结果显示:两种体系的检测时间和最低检出限(LOD)结果一致。

NEB酶-IsoAmp® II 通用 tHDA 试剂盒

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

IsoAmp® II 通用 tHDA 试剂盒

IsoAmp® II 通用 tHDA 试剂盒                             
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#H0110S
50 次反应
4,889.00元

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特性
 操作简单
 采用解旋酶将 DNA 双链分开,无需热循环
 反应可在恒温下进行
 可用于扩增和检测 DNA 短序列(70-120 bp)
 可用于各种模板,包括微生物基因组 DNA、病毒 DNA、质粒 DNA 与 cDNA
 采用优化的引物和缓冲液后,单拷贝的靶 DNA 可通过 tHDA 扩增,凝胶电泳检测 

概述

热解旋酶扩增法(tHDA)是一种在恒温条件下扩增核酸的新方法。和 PCR 一样,tHDA 反应选择性地扩增由两个引物所确定的靶序列。然而,与 PCR 不同的是,tHDA 使用的是解旋酶将 DNA 双链分开,而不是高温变性。因此,可以在恒温条件下扩增 DNA 而不需要热循环。tHDA 反应还能与反转录联用而进行 RNA 分析。

IsoAmp II 通用 tHDA 试剂盒基于第二代的热解旋酶扩增平台。此试剂盒提供 tHDA,反转录 HAD(RTHAD),实时定量 HAD(qHDA)和实时定量 RTHAD(qRT-HAD),所有反应都采用同一种反应缓冲液。 

IsoAmp II 通用 tHDA 试剂盒组成

– IsoAmp dNTP 溶液与 IsoAmp 酶混合液
– 10X 退火缓冲液 II、100 mM MgSO4、500 mM NaCl

– 对照模板和扩增引物 

IsoAmp® II 通用 tHDA 试剂盒                             

HDA 技术,依赖解旋酶扩增:步骤 1:解旋酶解旋以及引物结合。步骤 2:DNA 聚合。步骤 3:DNA扩增。

NEB酶-phi29 DNA 聚合酶

NEB酶-phi29 DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

phi29 DNA 聚合酶

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#M0269L
1,250 units
2,989.00元
#M0269S
250 units
749.00元

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特性
 极高的掺入率
 超强的链置换能力
 应用于需要强链置换和/或连续合成的复制反应
 中温条件下高保真复制

概述

phi29 DNA 聚合酶是从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的噬菌体 phi29 中克隆出的 DNA聚合酶。此酶具有卓越的链置换和连续合成特性,并具有 3´→5´ 核酸外切酶校读活性。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有噬菌体 phi29 DNA 聚合酶基因。

浓度

10,000 units/ml。 

热失活

65℃ 10 分钟。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。 

NEB酶-Bst DNA 聚合酶,大片段

NEB酶-Bst DNA 聚合酶,大片段
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst DNA 聚合酶,大片段

货 号
规 格
价 格
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广州库存
成都库存
苏州库存
#M0275L
8,000 units
3,049.00元
#M0275M
(高浓度15X)8,000 units
3,049.00元
#M0275S
1,600 units
759.00元
#M0275V
800 units
409.00元

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特性
 DNA 等温扩增
 富含 GC 区域的 DNA 测序
 纳克级含量 DNA 模板的快速测序

 可用于要求嗜温链置换的实验 

Bst DNA 聚合酶,大片段                             

概述

Bst DNA 聚合酶,大片段是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的一部分,具有 5´→3´ DNA 聚合酶活性,但
缺失 5´→3´ 核酸外切酶活性。

来源

来源于 E.coli 菌株,此菌株含有来自 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的基因,该基因缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域。应用基因重组技术,将麦芽糖结合蛋白(MBP)基因与该基因融合表达,融合蛋白经纯化后再在体外切除掉 MBP,纯化后的聚合酶不含 MBP。

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。

热失活

80℃ 20 分钟。 

使用注意

建议反应温度不要超过 70℃。Bst DNA 聚合酶,大片段不能用于热循环测序或 PCR。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。 

NEB酶-Bst DNA 聚合酶,全长

NEB酶-Bst DNA 聚合酶,全长
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst DNA 聚合酶,全长

货 号
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北京库存
上海库存
广州库存
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苏州库存
#M0328S
500 units
759.00元

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特性
 DNA 等温扩增
 引物延伸
Bst DNA 聚合酶,全长                             

概述

全长的 Bst DNA 聚合酶来源于 Bacillus stearothermophilus,它具有 5´→3´ 聚合酶活性和双链特异的 5´→3´ 核酸外切酶活性,但缺失 3´→5´ 核酸外切酶活性。 

来源

携带有 Bacillus stearothermophilus 基因的 E. coli 菌株。 

浓度

5,000 units/ml。

热失活

80℃ 20 分钟。

使用注意

 

建议反应温度不要超过 70℃。Bst DNA 聚合酶,全长不能用于热循环测序或 PCR。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请咨询上海金畔生物科技有限公司 18301939375。

NEB酶-Bst 3.0 DNA 聚合酶

NEB酶-Bst 3.0 DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst 3.0 DNA 聚合酶

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特性

Bst 3.0 DNA 聚合酶                             

Bst 3.0 DNA 聚合酶                             

概述

 Bst 3.0 DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I,改进了等温扩增性能及反转录活性的大片段同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 3.0 DNA 聚合酶具有对 DNA 或 RNA 模板的 5´ →3´ 聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 和 3´ →5´ 核酸外切酶活性。与 Bst DNA 聚合酶相比,Bst 3.0 DNA 聚合酶不仅具有在高浓度  DNA  扩增抑制剂中扩增的强大性能,而且反转录酶的活性也显著增强。

来源

 来源于携带重组 Bst 3.0 基因的 E. coli 菌株。

反应缓冲液

 1X 等温扩增缓冲液 II [20 mM Tris-HCl(pH 8.8 @ 25℃),150 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,2 mM MgS04,0.1% Tween-20]。65℃ 条件下反应。

热失活:80℃ 5 分钟。

单位定义:

 1 单位指 65℃ 条件下反应 30 分钟,能使 25 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶物所需的酶量。

浓度:

 8,000 和 120,000 units/ml。

使用注意:

 建议反应温度不超过 72℃。Bst DNA 聚合酶不能用于 PCR 或需热变性的反应。Bst 3.0 DNA聚合酶不具有 3´ →5´ 核酸外切酶活性。

NEB酶-Bst 2.0 DNA 聚合酶

NEB酶-Bst 2.0 DNA 聚合酶
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst 2.0 DNA 聚合酶

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相关产品

WarmStart® RTx 反转录酶

特性

 最佳 DNA 等温扩增(LAMP)性能
 快速聚合
 反应条件灵活,比 Bst DNA 聚合酶具有更高的盐耐受力
 6 0 – 7 2℃ 之间具有最佳反应性能(WarmStart)
 用 dUTP 替换 dTTP 对其几乎无影响
 WarmStart DNA 聚合酶可以在室温下建立反应,防止非特异性扩增,提高反应效率 
Bst 2.0 DNA 聚合酶                             

概述

Bst 2.0 DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I,大片段(Bst DNA 聚合酶,大片段)的同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 2.0 DNA 聚合酶具有 5´→3´ 的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。和野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段相比,该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶在等温聚合酶中是独有的。像“热启动”PCR 聚合酶一样,这种特性在低于最适反应温度下可以抑制酶活性。因此,实验操作可以在室温下进行,并可以消除非特异性反应产物,提高反应效率。

NEB 的 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶利用了核酸适配体技术。适配体是一种经过广泛修饰的特定核苷酸,通过非共价键作用结合到聚合酶上,从而在非许可温度下抑制酶活性(<50℃)。另外,Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶不需要单独的激活步骤。


Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶可以消除在室温条件下建立反应时,产生的非特异性的扩增,而传统的 Bst DNA 聚合酶或同源物可以掺入非模板序列核苷酸。

Bst 2.0 DNA 聚合酶                             

Bst 2.0 WarmStart 的优势:无论刚建立反应(实线)或 25℃ 温育 2 小时后,都能使 LAMP 实验在相同的时间点迅速启动反应。没有 Bst 2.0 WarmStart 的保护,在室温条件下温育的 LAMP 实验结果不一致。Bst 2.0 WarmStart 让扩增结果更均一,可以室温和高通量建立反应。

 

来源

来源于 E. coli 菌株,该菌株携带有诱导启动子,可表达 Bst 2.0 DNA 聚合酶蛋白。 

反应缓冲液

1X 等温扩增缓冲液[20 mM Tris-HCl
(pH 8.8 @ 25℃),50 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,2 mM
MgS04,0.1% Tween-20]。65℃ 条件下反应。
热失活:80℃ 20 分钟。

单位定义

1 单位指 65℃ 条件下反应 30 分钟,能使 25 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。

 

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。 

热失活

80℃ 20 分钟。 

使用注意

Bst 2.0 DNA 聚合酶不具有 3´→5´ 核酸外切酶活性。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶的反应温度可以为 60-72℃。Bst 2.0 DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR。 

NEB酶-Bst2.0 WarmStart DNA 聚合酶

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Bst2.0 WarmStart DNA 聚合酶

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WarmStart® RTx 反转录酶

特性

 最佳 DNA 等温扩增(LAMP)性能
 快速聚合
 反应条件灵活,比 Bst DNA 聚合酶具有更高的盐耐受力
 6 0 – 7 2℃ 之间具有最佳反应性能(WarmStart)
 用 dUTP 替换 dTTP 对其几乎无影响

 WarmStart DNA 聚合酶可以在室温下建立反应,防止非特异性扩增,提高反应效率 

Bst2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                             

概述

Bst 2.0 DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I,大片段(Bst DNA 聚合酶,大片段)的同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 2.0 DNA 聚合酶具有 5´→3´ 的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。和野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段相比,该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶在等温聚合酶中是独有的。像“热启动”PCR 聚合酶一样,这种特性在低于最适反应温度下可以抑制酶活性。因此,实验操作可以在室温下进行,并可以消除非特异性反应产物,提高反应效率。

NEB 的 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶利用了核酸适配体技术。适配体是一种经过广泛修饰的特定核苷酸,通过非共价键作用结合到聚合酶上,从而在非许可温度下抑制酶活性(<50℃)。另外,Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶不需要单独的激活步骤。
 

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶可以消除在室温条件下建立反应时,产生的非特异性的扩增,而传统的 Bst DNA 聚合酶或同源物可以掺入非模板序列核苷酸。

Bst2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                             
Bst 2.0 WarmStart 的优势:无论刚建立反应(实线)或 25℃ 温育 2 小时后,都能使 LAMP 实验在相同的时间点迅速启动反应。没有 Bst 2.0 WarmStart 的保护,在室温条件下温育的 LAMP 实验结果不一致。Bst 2.0 WarmStart 让扩增结果更均一,可以室温和高通量建立反应。

来源

来源于 E. coli 菌株,该菌株携带有诱导启动子,可表达 Bst 2.0 DNA 聚合酶蛋白。 

反应缓冲液

1X 等温扩增缓冲液

[20 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25℃),50 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,2 mM MgS04,0.1% Tween-20]。 

单位定义

1 单位指 65℃ 条件下反应 30 分钟,能使 25 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。 

热失活

80℃ 20 分钟。 

使用注意

Bst 2.0 DNA 聚合酶不具有 3´→5´ 核酸外切酶活性。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶的反应温度可以为 60-72℃。Bst 2.0 DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR。 

NEB酶-Tte UvrD 解旋酶

NEB酶-Tte UvrD 解旋酶
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Tte UvrD 解旋酶

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#M1202S
50 reactions
899.00元

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产品描述

 该酶是创新酶(Enzyme for Innovation,EFI)。创新酶工程由 NEB 发起,旨在为科研界提供独一无二的酶,从而为新的创新应用的发现创造条件。完整创新酶列表请登陆 www.neb.com/EnzymesforInnovation。

特性

使双链 DNA 解旋

耐受 65℃ 高温
减少等温扩增(例如:LAMP)中非特异性产物的产生

概述

 Tte UvrD 解旋酶是修复解旋酶,来源于腾冲嗜热厌氧菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)。该酶能使双链 DNA 解开而无需特殊的 flap 或突出结构。Tte UvrD 解旋酶适用于广泛的 DNA 底物且耐受高温(70℃)。因此,该酶可做为添加剂,提高等温扩增反应的特异性。

反应条件

 1X 等温扩增反应缓冲液,加入 1 mM ATP。

热失活:80℃ 加热 20 分钟。

浓度

 20μg/ml

NEB酶-WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)

NEB酶-WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)

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500 rxns
12,679.00元
#M1708S
100 rxns
3,169.00元

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产品特点

 设计 LAMP 引物,请使用 NEB LAMP Primer Design Tool

·为环介导等温扩增(LAMP)提供便捷的一步法解决方案,可用于 DNA 或 RNA(RT-LAMP)样品
·预混液含热敏 UDG 和 dUTP,降低残留污染风险
·预混液具备完全缓冲力,可兼容不同样品类型,适用于多种检测方法
·温启动技术可在室温下抑制酶活性
·如需了解使用 RT-LAMP 进行 COVID-19 快速筛查,请点击 Learn more

产品描述

 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)为 LAMP/RT-LAMP 提供了便捷的一步法解决方案,适用于 DNA 或 RNA 样品。LAMP 和 RT-LAMP 是一种常用等温扩增技术,通过使用 LAMP 特异性引物(用户自备)和链置换 DNA 聚合酶进行靶标核酸的快速检测。该预混液是在优化后 LAMP 缓冲液中混入了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶均经过基因工程改造,提高了在 LAMP 和 RT-LAMP 反应中的性能。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)具备完全缓冲力,可兼容不同样品类型,适用于多种检测方法,包括:浊度检测、实时荧光检测(使用 LAMP 荧光染料时)和终点可视化检测,例如:基于金属离子指示剂的变色检测(羟基萘酚蓝)

由于先前扩增的产物会无意中成为后续反应的底物造成污染,因此预混液中的 dUTP 和热敏 UDG 可有效降低残留污染风险。热敏 UDG 在温度>50℃时可完全失活,因此对反应没有影响。
图 1:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)适用于多种检测方法
 WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)                             
使用 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)(NEB #M1708)对 RNA 或 DNA 样品扩增,可通过多种实时(A)和终点(B)检测方法进行结果判定。这些检测方式包括荧光法、不基于 pH 的变色法(例如:羟基萘酚蓝)、浊度法或琼脂糖凝胶电泳。对于实时荧光检测,可使用包含 50X LAMP 荧光染料的试剂盒(NEB #E1708),在常规实时 PCR 仪器的 SYBR®/FAM 通道中进行监测。
图 2:LAMP/RT-LAMP 预混液和适用样品类型
 WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)                             
NEB 基于 pH 变化的 WarmStart 变色LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含/不含 UDG)(NEB #M1804)(NEB# M1800)缓冲力低,因此可使用 pH 敏感染料进行可视化扩增检测。基于 pH 值改变而产生的颜色变化(如粉红变黄色)所需缓冲力要低,高缓冲力样品或酸性样品可能会影响颜色变化,因此,这种方法限制了检测样品的种类。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含/不含 UDG)(NEB #M1708,NEB #E1708)(NEB #E1700)是完全缓冲的,可检测所有样品类型,适用于多种检测方法,包括荧光或其它变色染料(例如:羟基萘酚蓝)
图 3:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测
 WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)                             
 使用 WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(不含 dUTP/UDG)(NEB #M1700 试剂盒中的组分)和 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)(NEB #M1708)进行 RT-LAMP(RNA 靶标)或 LAMP(DNA 靶标)实验。反应加入 1X LAMP 引物和 1X LAMP 荧光染料后,分别加入三个数量级的 Jurkat RNA 或 Jurkat DNA (10 ng-0.1 ng)和无模板对照(NTC),每个样品做 4 个重复,形成 25 µl 反应体系,置于 96 孔板中 65℃孵育 40 分钟。使用实时热循环仪(Bio-Rad® CFX96)中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外,每个样品都检测到所有 4 个重复(注:如果各重复的检测时间相似,则检测点重叠)。总体而言,各样品检测结果显示:NEB #M1700 和 NEB #M1708 性能一致。无模板对照均无扩增。
图 4:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测
WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)                             
通过手动或 TEMPEST® 自动化液体处理工作站(96 孔,25 µl 反应)建立针对于合成 SARS-CoV-2 RNA 样品的 LAMP 检测体系。检测样品为:阳性样品(人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA)或无模板对照(NTCs)。经 65℃ 孵育 40 分钟,使用 1X LAMP 荧光染料在实时荧光仪器(Bio-Rad CFX96)中的 SYBR/FAM 通道检测。结果显示:两种体系的检测时间和最低检出限(LOD)结果一致。
图 5:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)兼容不基于 pH 的变色法(例如:羟基萘酚蓝)
WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)                             
使用 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)和针对 N 和 E 基因的混合引物对合成 SARS-CoV-2 RNA 进行扩增,使用 0.12 mM 羟基萘酚蓝作为变色金属指示剂。检测样品为:阳性样品(人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA)、阴性样本(人总 RNA)或无模板对照(NTCs),如图所示。反应体系(25 µl)经 65℃孵育 45 分钟后,进行肉眼检测。
 
A.所有阳性样品均显示阳性结果,包括在所有仅含 50 拷贝的低起始量样品(n = 20),颜色明显从紫色变为蓝色。
 
B.所有阴性样品均未出现颜色变化(n = 32)。

NEB酶-WarmStart LAMP 变色预混液

NEB酶-WarmStart LAMP 变色预混液
产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

WarmStart LAMP 变色预混液

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#M1800L
500次反应
10,269.00元
#M1800S
100次反应
2,569.00元

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优势及特点
·RNA 和 DNA 模板的 LAMP 扩增反应
·一步完成,随时随地进行 LAMP 反应
·独特的双热启动机制支持室温建立反应体系
·肉眼可见扩增结果,方便检测分析

概述

WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix 是可视化的 LAMP RT-LAMP 反应混合液(LAMP:环介导等温扩增反应)。预混液经过优化,在特殊 Low-buffer 中含有可视化的 PH 值指示剂及 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶 和WarmStart RTx 反转录酶。在 LAMP 的反应过程中,DNA 聚合酶发挥聚合作用,改变质子数量进而改变 PH 值,使粉色反应液变成黄色,整个反应过程快速,颜色改变清晰,肉眼可见(可以在视频库中找到关于 LAMP 实验以及引物设计概述https://www.neb.com/tools-and-resources/video-library)。该产品可以用于任何 LAMP 或者 RT-LAMP 反应,只需要提供样品和加热装置,在1540分钟内就可以用肉眼读取阳性扩增的结果。

              简单可视化的扩增结果

     WarmStart® LAMP 变色预混液                             

      阴性的反应结果显示为粉色,阳性的反应结果会变为黄色