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323192-14-9 Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）

发表于由

Cell-Tracker Green CMFDA；CellTracker™ Orange CMTMR；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针；CAS NO：323192-14-9；

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Orange CMTMR，英文全名：5-(and-6)-(((4-chloromethyl)benzoyl)amino)tetramethylrhodamine) (mixed isomers)，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Orange CMTMR特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（541/565nm）与绿色荧光蛋白GFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1）  CAS NO.：323192-14-9

2）  同义名：CellTracker™ Orange CMTMR;Xanthylium, 9-[2-carboxy-4(or 5)-[[4-(chloromethyl) benzoyl]amino]phenyl]-3,6-bis(dimethylamino)-, inner salt

3）  分子式：C32H28ClN3O4

4）  分子量：554.04 g/mol

5）  外观：紫色固体

6）  溶解性：溶于DMSO

7）  化学结构式： 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）McKee AS et al.Host DNA released in response to aluminum adjuvant enhances MHC class II-mediated antigen presentation and prolongs CD4 T-cell interactions with dendritic cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Mar 19;110(12): E1122-31. PMID: 23447566

操作方法（多光子显微镜）：CD4 T cellswere isolated from OTII or B6 mice using the CD4 T-cell negative isolation kit andwere labeled with 20 μM CMTMR or 2 μM CFSE, washed three times, and injected i.v. into B6 or CD11c-YFP recipients. Twenty-four hours later, these recipient mice were immunized with 20 μg of AF647-labeled ova + 200 μg of Alhydrogel and 5 mg of either BSA or DNase. From 20–24 h following immunization, mice were killed and their draining popliteal LNs were surgically removed for imaging. 

文献2）Nikitina EY et al.Combination ofγ‐irradiation and dendritic cell administration induces a potent antitumor response in tumor‐bearing mice: Approach to treatment of advanced stage cancer. Int J Cancer. 2001 Dec 15;94(6):825-33. PMID: 11745485

操作方法（组织内细胞分布评估）：DCs were labeled with 20 μM cell tracker orange (CMTMR) by incubation in RPMI 1640 at 37℃ for 30 min. Cells were then washed in PBS once, incubated for 30 min more and injected (107/mouse) intravenously (i.v.) or subcutaneously (s.c.) near the tumor site. Eighteen hours later lung, spleen, liver, superficial inguinal and popliteal LN as well as tumor tissue were taken out and snap‐frozen in tissue freezing media at−80°C. Frozen tissue sections were examined by fluorescence microscopy using a 540 nm filter. Labeled cells were counted in 10 fields at the total magnification ×200.

Fig. DC labeled with cell tracker CMTMR inside MethA sarcoma. Unlabeled (I) or CMTMR‐labeled (II, III) DCs (107) were injected i.v. (II) or s.c. (III) into MethA sarcoma‐bearing mice 3 hr after irradiation of the tumor with 10 Gy. Tumors were excised 18 hr later and cryostat sections were performed. Slides were analyzed by fluorescence microscopy using a 540‐nm filter. One of the representative fields with a total magnification of 200× is shown. 

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对1mgCell-Tracker Green CMFDA（Mw:464.86 g/mol）冻干粉，加入215µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

相关产品

 名称 规格                  

           

 Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）        

2×50μg
Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

2×50μg
Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素

1g
Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末）

10mg

Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色）

 

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）

Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色）

 MX4112-5MG 5mg

1598
Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色） MX4112-25MG 25mg

4698

 

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Blue CMAC，英文全名：7-amino-4-chloromethylcoumarin（7-氨基-4-氯甲基香豆素），是氨基香豆素的氯甲基衍生物，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Blue CMAC特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Blue CMAC的激发和发射光谱（353/466nm）与绿色荧光蛋白GFP或红色荧光蛋白RFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特征

1） CAS NO.：147963-22-2

2） 同义名：CellTracker Blue CMAC; 7-amino-4-chloromethylcoumarin; 7-氨基-4-氯甲基香豆素;

3） 分子式：C10H8ClNO2

4） 分子量：209.6 g/mol

5） 外观：白色至类白色固体

6） 溶解性：溶于DMSO

1） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1 制备Cell-Tracker染色工作液

① 开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

② 用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为25mM。例如，对5mgCell-Tracker Blue CMAC（Mw: 209.63 g/mol）冻干粉，加入954µl DMSO充分溶解，即得到25mM母液。储存液根据单次用量分装避光冻存，减少反复冻融次数。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2 悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤ 根据附表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3 贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格
MX4107-100UG Cell-Tracker Green CMFDA活细胞示踪探针（绿色） 2×50μg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR活细胞示踪探针（橙色） 2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4110-30UG Cell-Tracker Deep Red活细胞示踪探针（深红色） 2×15µg
MX4111-1Kit Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red)活细胞示踪三色组合试剂盒（绿色/红色/深红色） 1kit
MX4112-5MG Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色） 5mg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA)二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide碘化丙啶（粉末） 10mg

 

 

Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色）监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具

发表于由

产品名称

 产品编号 规格

Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色）

 MX4112-5MG 5mg

Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色） MX4112-25MG 25mg

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Blue CMAC，英文全名：7-amino-4-chloromethylcoumarin（7-氨基-4-氯甲基香豆素），是氨基香豆素的氯甲基衍生物，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Blue CMAC特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Blue CMAC的激发和发射光谱（353/466nm）与绿色荧光蛋白GFP或红色荧光蛋白RFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特征

1） CAS NO.：147963-22-2

2） 同义名：CellTracker Blue CMAC; 7-amino-4-chloromethylcoumarin; 7-氨基-4-氯甲基香豆素;

3） 分子式：C10H8ClNO2

4） 分子量：209.6 g/mol

5） 外观：白色至类白色固体

6） 溶解性：溶于DMSO

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1 制备Cell-Tracker染色工作液

① 开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

② 用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为25mM。例如，对5mgCell-Tracker Blue CMAC（Mw: 209.63 g/mol）冻干粉，加入954µl DMSO充分溶解，即得到25mM母液。储存液根据单次用量分装避光冻存，减少反复冻融次数。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2 悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤ 根据附表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3 贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格
MX4107-100UG Cell-Tracker Green CMFDA活细胞示踪探针（绿色） 2×50μg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR活细胞示踪探针（橙色） 2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
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MX4112-5MG Cell-Tracker Blue CMAC活细胞示踪探针（蓝色） 5mg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA)二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide碘化丙啶（粉末） 10mg

 

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色）Cell location 细胞定位 Cell Tracker dye 细胞示踪探针

发表于由

Cell-Tracker Deep Red；Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针； 

订购信息：

产品名称

 产品编号 规格

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色）

 MX4110-30UG 2×15µg
Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） MX4110-75UG 5×15µg

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） MX4110-150UG 10×15µg

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Deep Red，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Deep Red特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Deep Red的激发和发射光谱（630/650nm）与绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白RFP都能很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1） 同义名：CellTracker™ Deep Red Dye; CellTracker™ 深红色染料；

2） 分子量：698.3 g/mol

3） 外观：深蓝色固体

4） Ex/Em：630/650nm

5） 溶解性：溶于DMSO（1mM）

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 注意事项

  • 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  • 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  • 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Sarah L. Richardson, Alzbeta Hulikova, Melanie Proven, Ria Hipkiss, Magbor Akanni, Noémi B. A. Roy, Pawel Swietach. Single-cell O2 exchange imaging shows that cytoplasmic diffusion is a dominant barrier to efficient gas transport in red blood cells.Proceedings of the National Academy of Sciences May 2020, 117 (18) 10067-10078; DOI: 10.1073/pnas.1916641117

Method (Single-Cell O2 Saturation Imaging)：Blood was first diluted 200-fold in Ca2+-free Hepes-buffered Tyrode, and cells were loaded with a mixture of CellTracker Deep-Red (5 µM) and CellTracker Green (15 µM) in dimethyl sulfoxide (DMSO). For some experiments, cells were also loaded with SYTO45 (Invitrogen) at 1:1,000 dilution of 5 mM stock. After allowing 10 min for dye loading, cells were spun down, resuspended in Ca2+-containing solution, and plated on a poly-L-lysine pretreated Perspex superfusion chamber that was mounted on a Leica LCS confocal system. Cells were superfused with solutions at 23 °C or 37 °C. CellTracker Deep-Red and Green dyes were excited simultaneously by 488- and 633-nm laser lines, and fluorescence was acquired by two photomultiplier tubes at 500 to 550 and 650 to 700 nm at 7.8 Hz in bidirectional x–y scan mode (128 × 128 pixels) to maximize temporal resolution with pinhole at 4 Airy units to maximize signal to background ratio. Fluorescence was ratioed and normalized to starting ratio.

Fig. Measuring O2 exchange in RBCs using single-cell O2-saturating imaging. (C) Wild-type RBCs loaded with a mixture of Deep-Red and Green, showing fluorescence in oxygenated and deoxygenated microstreams. For these experiments, neither solution was fluorescently labeled. Grayscale ratio maps (Right) were calculated from these fluorescence maps (Left and Center). (D) On deoxygenation, Deep-Red fluorescence is reduced, whereas Green remains constant (wild-type RBCs; n = 356 cells).

文献2）Grote S, Ureña-Bailén G, Chan KC, et al. In Vitro Evaluation of CD276-CAR NK-92 Functionality, Migration and Invasion Potential in the Presence of Immune Inhibitory Factors of the Tumor Microenvironment. Cells. 2021;10(5):1020. Published 2021 Apr 26.

Method (Tracking of NK-92-Mediated Tumor Cell Invasion)：NK-92 as well as CD276-CAR NK-92 cells were assessed for their invasion potential. (CD276-CAR) NK-92 cells were stained using CellTracker™ Deep Red dye according to the staining protocol provided by the manufacturer. Melanoma 3D spheroids were co-incubated with NK-92 cells at an E:T ratio of 5:1 and monitored using the Celigo S imaging cytometer (Nexcelom, Lawrence, MA, USA) at indicated time points over a period of 120 h.

Fig 2. GFP-transduced WM115 melanoma cells were grown as 3D spheroids and co-incubated with CellTracker™ Deep Red-labeled NK-92 or CD276-CAR NK-92 cells for 120 h. Representative fluorescence pictures of spheroids at indicated time points are shown (a).

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。由于Cell-Tracker Deep Red染料的荧光信号高，最佳使用浓度在250nM-1µM。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1 制备Cell-Tracker染色工作液

① 开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

② 用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为1mM。例如，每管15µg Cell-Tracker Deep Red（Mw: 698.3 g/mol）冻干粉，加入20µl DMSO充分溶解，即得到1mM（1000×）母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到250nM-1µM的工作浓度（最佳浓度需优化）。预热染色工作液到37℃。

2.2 悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤ 根据附表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3 贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

④ 吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥ 根据表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 相关产品

货号 名称 规格
MX4107-100UG Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 2×50μg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色） 2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4110-30UG Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） 2×15µg
MX4111-1Kit Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red)

活细胞示踪三色组合试剂盒（绿色/红色/深红色）

 1kit
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

活细胞示踪三色组合试剂盒（绿色/红色/深红色） Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red)

发表于由

Cell-Tracker Deep Red；Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针； 

订购信息：

产品名称

 产品编号 规格

Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red) 活细胞示踪三色组合试剂盒（绿色/红色/深红色） MX4111-1Kit 1kit

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker荧光探针能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。Cell-Tracker荧光探针（除了Cell-Tracker Deep Red）含有一氯甲基或溴甲基基团，与巯基反应，利用谷胱甘肽S转移酶介导的催化作用。大多数细胞中谷胱甘肽含量很高（高达10mM），谷胱甘肽转移酶普遍存在。Cell-Tracker Deep Red含一琥珀酰亚胺酯反应基团，与蛋白上的胺基反应。一旦转化为不可逆产物，这些产物几次传代都能良好的保留在活细胞中。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker探针特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。

该试剂盒提供三种不同激发和发射波长的Cell-Tracker荧光探针，每种探针都以最小规格供货，方便初次进行示踪实验的客户，以最经济的方式优化出所需的最佳探针和实验条件。也特别适合同时做2-3种细胞示踪且用量少的客户。（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

试剂盒成分

组分编号 组分名称 外观 产品规格 储存条件
MX4111-A Cell-Tracker Green CMFDA 固体 50μg -20℃避光干燥保存
MX4111-B Cell-Tracker Red CMTPX 固体 50μg -20℃避光干燥保存
MX4111-C Cell-Tracker Deep Red 固体 15µg -20℃避光干燥保存

 保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

  • 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  • 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  • 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。由于Cell-Tracker Deep Red染料的荧光信号高，最佳使用浓度在250nM-1µM。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1 制备Cell-Tracker染色工作液

① 开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

② 用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为1-10mM。

a）对于Cell-Tracker Green CMFDA（Mw: 464.86 g/mol），每管50µg固体，加入10.7µl DMSO充分溶解，即得到10mM母液。若单次用不完，建议根据单次用量将储存液分装，≤-20℃避光保存。

b）对于Cell-Tracker Red CMTPX（Mw: 686.25 g/mol），每管 50µg固体，加入7.2µl DMSO充分溶解，即得到10mM母液。若单次用不完，建议根据单次用量将储存液分装，≤-20℃避光保存。

c）对于Cell-Tracker Deep Red（Mw: 698.3 g/mol），每管15µg固体，加入20µl DMSO充分溶解，即得到1mM母液。若单次用不完，建议根据单次用量将储存液分装，≤-20℃避光保存。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度（最佳浓度需优化）。预热染色工作液到37℃。

2.2 悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤ 根据附表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3 贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

④ 吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥ 根据表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 相关产品

货号 名称 规格
MX4107-100UG Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 2×50μg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色） 2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4110-30UG Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） 2×15µg
MX4111-1Kit Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red)

活细胞示踪三色组合试剂盒（绿色/红色/深红色）

 1kit
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征

货号 名称 分子量 常用检测通道 Ex/Em（nm）[1]
MX4107-100UG Cell-Tracker Green CMFDA 464.9 FITC 492/517 [2]
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 554.0 TRITC 541/565
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 686.3 Rhodamine 577/602
MX4110-30UG Cell-Tracker Deep Red 698.3 Cy5 630/650
[1] 最大吸收和发射荧光，在水溶性缓冲液或甲醇内确定。在细胞环境内荧光值可能有些许变化。
[2] CMFDA本身无色和无荧光，直至胞内酯酶切割掉酯化基团。酯化基团的水解得到产物的荧光特征如表所述。

 

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Green CMFDA；CellTracker™ Orange CMTMR；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针；CAS NO：323192-14-9；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号               规格                价格（元）     

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）   

 MX4108-100UG 2×50μg

1100

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）

 MX4108-250UG 5×50μg

2400
Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色） MX4108-500UG 10×50μg

3900

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Orange CMTMR，英文全名：5-(and-6)-(((4-chloromethyl)benzoyl)amino)tetramethylrhodamine) (mixed isomers)，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Orange CMTMR特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（541/565nm）与绿色荧光蛋白GFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1）  CAS NO.：323192-14-9

2）  同义名：CellTracker™ Orange CMTMR;Xanthylium, 9-[2-carboxy-4(or 5)-[[4-(chloromethyl) benzoyl]amino]phenyl]-3,6-bis(dimethylamino)-, inner salt

3）  分子式：C32H28ClN3O4

4）  分子量：554.04 g/mol

5）  外观：紫色固体

6）  溶解性：溶于DMSO

7）  化学结构式： 

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

应用示例

文献1）McKee AS et al.Host DNA released in response to aluminum adjuvant enhances MHC class II-mediated antigen presentation and prolongs CD4 T-cell interactions with dendritic cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Mar 19;110(12): E1122-31. PMID: 23447566

 

操作方法（多光子显微镜）：CD4 T cellswere isolated from OTII or B6 mice using the CD4 T-cell negative isolation kit andwere labeled with 20 μM CMTMR or 2 μM CFSE, washed three times, and injected i.v. into B6 or CD11c-YFP recipients. Twenty-four hours later, these recipient mice were immunized with 20 μg of AF647-labeled ova + 200 μg of Alhydrogel and 5 mg of either BSA or DNase. From 20–24 h following immunization, mice were killed and their draining popliteal LNs were surgically removed for imaging. 

 

文献2）Nikitina EY et al.Combination ofγ‐irradiation and dendritic cell administration induces a potent antitumor response in tumor‐bearing mice: Approach to treatment of advanced stage cancer. Int J Cancer. 2001 Dec 15;94(6):825-33. PMID: 11745485

操作方法（组织内细胞分布评估）：DCs were labeled with 20 μM cell tracker orange (CMTMR) by incubation in RPMI 1640 at 37℃ for 30 min. Cells were then washed in PBS once, incubated for 30 min more and injected (107/mouse) intravenously (i.v.) or subcutaneously (s.c.) near the tumor site. Eighteen hours later lung, spleen, liver, superficial inguinal and popliteal LN as well as tumor tissue were taken out and snap‐frozen in tissue freezing media at−80°C. Frozen tissue sections were examined by fluorescence microscopy using a 540 nm filter. Labeled cells were counted in 10 fields at the total magnification ×200.

Fig. DC labeled with cell tracker CMTMR inside MethA sarcoma. Unlabeled (I) or CMTMR‐labeled (II, III) DCs (107) were injected i.v. (II) or s.c. (III) into MethA sarcoma‐bearing mice 3 hr after irradiation of the tumor with 10 Gy. Tumors were excised 18 hr later and cryostat sections were performed. Slides were analyzed by fluorescence microscopy using a 540‐nm filter. One of the representative fields with a total magnification of 200× is shown. 

 

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对1mgCell-Tracker Green CMFDA（Mw:464.86 g/mol）冻干粉，加入215µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 

3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号

 名称 规格                  

MX4107-1MG            

 Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg

MX4108-100UG

 Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）        

2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素

1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末）

10mg

 

 

 

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Green CMFDA；CellTracker™ Orange CMTMR；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针；CAS NO：323192-14-9；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号               规格                价格（元）     

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）   

 MX4108-100UG 2×50μg

1100

Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）

 MX4108-250UG 5×50μg

2400
Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色） MX4108-500UG 10×50μg

3900

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Orange CMTMR，英文全名：5-(and-6)-(((4-chloromethyl)benzoyl)amino)tetramethylrhodamine) (mixed isomers)，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Orange CMTMR特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（541/565nm）与绿色荧光蛋白GFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1）  CAS NO.：323192-14-9

2）  同义名：CellTracker™ Orange CMTMR;Xanthylium, 9-[2-carboxy-4(or 5)-[[4-(chloromethyl) benzoyl]amino]phenyl]-3,6-bis(dimethylamino)-, inner salt

3）  分子式：C32H28ClN3O4

4）  分子量：554.04 g/mol

5）  外观：紫色固体

6）  溶解性：溶于DMSO

7）  化学结构式： 

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

应用示例

文献1）McKee AS et al.Host DNA released in response to aluminum adjuvant enhances MHC class II-mediated antigen presentation and prolongs CD4 T-cell interactions with dendritic cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Mar 19;110(12): E1122-31. PMID: 23447566

 

操作方法（多光子显微镜）：CD4 T cellswere isolated from OTII or B6 mice using the CD4 T-cell negative isolation kit andwere labeled with 20 μM CMTMR or 2 μM CFSE, washed three times, and injected i.v. into B6 or CD11c-YFP recipients. Twenty-four hours later, these recipient mice were immunized with 20 μg of AF647-labeled ova + 200 μg of Alhydrogel and 5 mg of either BSA or DNase. From 20–24 h following immunization, mice were killed and their draining popliteal LNs were surgically removed for imaging. 

 

文献2）Nikitina EY et al.Combination ofγ‐irradiation and dendritic cell administration induces a potent antitumor response in tumor‐bearing mice: Approach to treatment of advanced stage cancer. Int J Cancer. 2001 Dec 15;94(6):825-33. PMID: 11745485

操作方法（组织内细胞分布评估）：DCs were labeled with 20 μM cell tracker orange (CMTMR) by incubation in RPMI 1640 at 37℃ for 30 min. Cells were then washed in PBS once, incubated for 30 min more and injected (107/mouse) intravenously (i.v.) or subcutaneously (s.c.) near the tumor site. Eighteen hours later lung, spleen, liver, superficial inguinal and popliteal LN as well as tumor tissue were taken out and snap‐frozen in tissue freezing media at−80°C. Frozen tissue sections were examined by fluorescence microscopy using a 540 nm filter. Labeled cells were counted in 10 fields at the total magnification ×200.

Fig. DC labeled with cell tracker CMTMR inside MethA sarcoma. Unlabeled (I) or CMTMR‐labeled (II, III) DCs (107) were injected i.v. (II) or s.c. (III) into MethA sarcoma‐bearing mice 3 hr after irradiation of the tumor with 10 Gy. Tumors were excised 18 hr later and cryostat sections were performed. Slides were analyzed by fluorescence microscopy using a 540‐nm filter. One of the representative fields with a total magnification of 200× is shown. 

 

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对1mgCell-Tracker Green CMFDA（Mw:464.86 g/mol）冻干粉，加入215µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 

3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

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货号

 名称 规格                  

MX4107-1MG            

 Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg

MX4108-100UG

 Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）        

2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素

1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末）

10mg

 

 

 

Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Red CMTPX；Cell-Tracker Green CMFDA；Cell movement细胞运动；Cell location细胞定位；Cell Tracker dye细胞示踪探针；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号     规格    价格（元）   
                          Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）             MX4109-100UG 2×50μg        980
                      Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）       MX4109-250UG 5×50μg         1890
Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） MX4109-500UG 10×50μg

3580

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Red CMTPX能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（577/602nm）与绿色荧光蛋白GFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1）  同义名：CellTracker™ Red CMTPX Dye;

2）  分子式：C42H40ClN3O4

3）  分子量：686.25 g/mol

4）  外观：紫色固体

5）  溶解性：溶于DMSO

6）  化学结构式：

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Yang X et al. Nanofiber membrane supported lung-on-a-chip microdevice for anti-cancer drug testing.Lab Chip. 2018 Jan 30;18(3):486-495.

Method (Live cell staining by cell tracker)：Cell Tracker Green CMFDA was used to mark A549 cells, and Cell Tracker Red CMTPX was used to mark HFL1 and HUVEC cells. Cells were marked using the following method. Before cell seeding, the cell suspension was placed into a serum-free medium containing 1 μg mL−1 Cell Tracker dye, and incubated for 30 min at a temperature of 37 °C. After centrifugation, the dye solution was replaced by fresh medium and the cells resuspended and counted.

 

Fig.Schematic diagram of the co-culture of A549 cells and HFL1 cells on the microchip. B: Three-dimensional fluorescence image of the co-culture of A549 cells and HFL1 cells on PLFB-10S. C: Fluorescence image of A549 cells and HFL1 cells in the direction of the Z axis layer by layer. Green: A549 cells marked by Cell Tracker Green CMFDA. Red: HFL1 cells marked by Cell Tracker Red CMTPX (bar = 100 μm).

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对50µgCell-Tracker Red CMTPX（Mw:686.25 g/mol）冻干粉，加入7.2µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

 

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                
MX4107-1MG          Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）      2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

 

 

Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Red CMTPX；Cell-Tracker Green CMFDA；Cell movement细胞运动；Cell location细胞定位；Cell Tracker dye细胞示踪探针；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号     规格    价格（元）   
                          Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）             MX4109-100UG 2×50μg        980
                      Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）       MX4109-250UG 5×50μg        2280
Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） MX4109-500UG 10×50μg

3580

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Red CMTPX能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（577/602nm）与绿色荧光蛋白GFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1）  同义名：CellTracker™ Red CMTPX Dye;

2）  分子式：C42H40ClN3O4

3）  分子量：686.25 g/mol

4）  外观：紫色固体

5）  溶解性：溶于DMSO

6）  化学结构式：

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Yang X et al. Nanofiber membrane supported lung-on-a-chip microdevice for anti-cancer drug testing.Lab Chip. 2018 Jan 30;18(3):486-495.

Method (Live cell staining by cell tracker)：Cell Tracker Green CMFDA was used to mark A549 cells, and Cell Tracker Red CMTPX was used to mark HFL1 and HUVEC cells. Cells were marked using the following method. Before cell seeding, the cell suspension was placed into a serum-free medium containing 1 μg mL−1 Cell Tracker dye, and incubated for 30 min at a temperature of 37 °C. After centrifugation, the dye solution was replaced by fresh medium and the cells resuspended and counted.

 

Fig.Schematic diagram of the co-culture of A549 cells and HFL1 cells on the microchip. B: Three-dimensional fluorescence image of the co-culture of A549 cells and HFL1 cells on PLFB-10S. C: Fluorescence image of A549 cells and HFL1 cells in the direction of the Z axis layer by layer. Green: A549 cells marked by Cell Tracker Green CMFDA. Red: HFL1 cells marked by Cell Tracker Red CMTPX (bar = 100 μm).

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对50µgCell-Tracker Red CMTPX（Mw:686.25 g/mol）冻干粉，加入7.2µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

 

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                
MX4107-1MG          Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）      2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

 

 

Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Red CMTPX；Cell-Tracker Green CMFDA；Cell movement细胞运动；Cell location细胞定位；Cell Tracker dye细胞示踪探针；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号     规格    价格（元）   
   Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）             MX4109-100UG 2×50μg        980
Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色）       MX4109-250UG 5×50μg       2280
Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） MX4109-500UG 10×50μg

3580

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Red CMTPX能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（577/602nm）与绿色荧光蛋白GFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1）  同义名：CellTracker™ Red CMTPX Dye;

2）  分子式：C42H40ClN3O4

3）  分子量：686.25 g/mol

4）  外观：紫色固体

5）  溶解性：溶于DMSO

6）  化学结构式：

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Yang X et al. Nanofiber membrane supported lung-on-a-chip microdevice for anti-cancer drug testing.Lab Chip. 2018 Jan 30;18(3):486-495.

Method (Live cell staining by cell tracker)：Cell Tracker Green CMFDA was used to mark A549 cells, and Cell Tracker Red CMTPX was used to mark HFL1 and HUVEC cells. Cells were marked using the following method. Before cell seeding, the cell suspension was placed into a serum-free medium containing 1 μg mL−1 Cell Tracker dye, and incubated for 30 min at a temperature of 37 °C. After centrifugation, the dye solution was replaced by fresh medium and the cells resuspended and counted.

 

Fig.Schematic diagram of the co-culture of A549 cells and HFL1 cells on the microchip. B: Three-dimensional fluorescence image of the co-culture of A549 cells and HFL1 cells on PLFB-10S. C: Fluorescence image of A549 cells and HFL1 cells in the direction of the Z axis layer by layer. Green: A549 cells marked by Cell Tracker Green CMFDA. Red: HFL1 cells marked by Cell Tracker Red CMTPX (bar = 100 μm).

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对50µgCell-Tracker Red CMTPX（Mw:686.25 g/mol）冻干粉，加入7.2µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

 

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                
MX4107-1MG          Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）      2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

 

 

ER-Tracker Red (BODIPY? TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针（活细胞成像用）

发表于由

描述

ER-Tracker Red, for live-cell imaging

内质网红色荧光探针

产品标签

ER-Tracker Red; ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX；BODIPY™ TR Glibenclamide；格列本脲；DiOC6(3)；CAS: 53213-82-4；

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针（活细胞成像用）

 MX4353-20UL 20µl 1648
MX4353-100UL 5×20µl 7188

【温馨提示1】：见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针（Lysotracker and Lysosensor）产品专题。

【温馨提示2】：见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针（Mitotracker）产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Red是一种药物的荧光偶联物，即BODIPY™ TR标记的格列苯脲（BODIPY™ TR Glibenclamide）。格列本脲，又名优降糖（Glyburide），是一种磺酰脲类口服降糖药，用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌，以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道（KATP）的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ TR是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一，最大激发/发射波长~587/615nm，光谱特性类似于传统的Texas Red，与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度约为1µM，需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作，活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1） 分子式：C44H42BClF2N6O7S2

2） 分子量：915.2316

3） 外观：液体

4） Ex/Em：587/615nm (in methanol)

5） 检测滤片：TRITC

6） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光干燥保存，至少6个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） ER-Tracker Red（1mM）在4℃，冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内，可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体，每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底，再开盖使用。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Red以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Red 从冰箱内取出，确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解，经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装，≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液：将1mM ER-Tracker Red稀释至工作浓度，建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色：对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤3。

3. 细胞固定

3.1 固定细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞：固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理，因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

Fig 1.Tubulin in a live bovine pulmonary artery endothelial cell labeled with TubulinTracker Green reagent.

Endoplasmic reticulum was visualized with red-fluorescent ER-Tracker Red reagent, and the nucleus was stained with blue-fluorescent Hoechst 33342.

相关产品

货号 名称 规格 价格（元）
MX4351-50UL ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging

内质网蓝色荧光探针（活细胞成像用）

 50µl 648
MX4352-20UL ER-Tracker Green (BODIPY™ FL Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网绿色荧光探针（活细胞成像用）

 20µl 1168
MX4353-20UL ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针（活细胞成像用）

 20µl 1648

ER-Tracker Red (BODIPY? TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针（活细胞成像用）

发表于由

描述

ER-Tracker Red, for live-cell imaging

内质网红色荧光探针

产品标签

ER-Tracker Red; ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX；BODIPY™ TR Glibenclamide；格列本脲；DiOC6(3)；CAS: 53213-82-4；

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针（活细胞成像用）

 MX4353-20UL 20µl 1648
MX4353-100UL 5×20µl 7188

【温馨提示1】：见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针（Lysotracker and Lysosensor）产品专题。

【温馨提示2】：见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针（Mitotracker）产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Red是一种药物的荧光偶联物，即BODIPY™ TR标记的格列苯脲（BODIPY™ TR Glibenclamide）。格列本脲，又名优降糖（Glyburide），是一种磺酰脲类口服降糖药，用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌，以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道（KATP）的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ TR是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一，最大激发/发射波长~587/615nm，光谱特性类似于传统的Texas Red，与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度约为1µM，需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作，活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1） 分子式：C44H42BClF2N6O7S2

2） 分子量：915.2316

3） 外观：液体

4） Ex/Em：587/615nm (in methanol)

5） 检测滤片：TRITC

6） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光干燥保存，至少6个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） ER-Tracker Red（1mM）在4℃，冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内，可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体，每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底，再开盖使用。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Red以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Red 从冰箱内取出，确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解，经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装，≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液：将1mM ER-Tracker Red稀释至工作浓度，建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色：对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤3。

3. 细胞固定

3.1 固定细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞：固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理，因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

Fig 1.Tubulin in a live bovine pulmonary artery endothelial cell labeled with TubulinTracker Green reagent.

Endoplasmic reticulum was visualized with red-fluorescent ER-Tracker Red reagent, and the nucleus was stained with blue-fluorescent Hoechst 33342.

相关产品

货号 名称 规格 价格（元）
MX4351-50UL ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging

内质网蓝色荧光探针（活细胞成像用）

 50µl 648
MX4352-20UL ER-Tracker Green (BODIPY™ FL Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网绿色荧光探针（活细胞成像用）

 20µl 1168
MX4353-20UL ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针（活细胞成像用）

 20µl 1648

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色）

发表于由

Cell-Tracker Deep Red；Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针； 

订购信息：

产品名称

 产品编号 规格

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色）

 MX4110-30UG 2×15µg
Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） MX4110-75UG 5×15µg

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） MX4110-150UG 10×15µg

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Deep Red，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Deep Red特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Deep Red的激发和发射光谱（630/650nm）与绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白RFP都能很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1） 同义名：CellTracker™ Deep Red Dye; CellTracker™ 深红色染料；

2） 分子量：698.3 g/mol

3） 外观：深蓝色固体

4） Ex/Em：630/650nm

5） 溶解性：溶于DMSO（1mM）

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 注意事项

  • 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  • 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  • 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Sarah L. Richardson, Alzbeta Hulikova, Melanie Proven, Ria Hipkiss, Magbor Akanni, Noémi B. A. Roy, Pawel Swietach. Single-cell O2 exchange imaging shows that cytoplasmic diffusion is a dominant barrier to efficient gas transport in red blood cells.Proceedings of the National Academy of Sciences May 2020, 117 (18) 10067-10078; DOI: 10.1073/pnas.1916641117

Method (Single-Cell O2 Saturation Imaging)：Blood was first diluted 200-fold in Ca2+-free Hepes-buffered Tyrode, and cells were loaded with a mixture of CellTracker Deep-Red (5 µM) and CellTracker Green (15 µM) in dimethyl sulfoxide (DMSO). For some experiments, cells were also loaded with SYTO45 (Invitrogen) at 1:1,000 dilution of 5 mM stock. After allowing 10 min for dye loading, cells were spun down, resuspended in Ca2+-containing solution, and plated on a poly-L-lysine pretreated Perspex superfusion chamber that was mounted on a Leica LCS confocal system. Cells were superfused with solutions at 23 °C or 37 °C. CellTracker Deep-Red and Green dyes were excited simultaneously by 488- and 633-nm laser lines, and fluorescence was acquired by two photomultiplier tubes at 500 to 550 and 650 to 700 nm at 7.8 Hz in bidirectional x–y scan mode (128 × 128 pixels) to maximize temporal resolution with pinhole at 4 Airy units to maximize signal to background ratio. Fluorescence was ratioed and normalized to starting ratio.

 

Fig. Measuring O2 exchange in RBCs using single-cell O2-saturating imaging. (C) Wild-type RBCs loaded with a mixture of Deep-Red and Green, showing fluorescence in oxygenated and deoxygenated microstreams. For these experiments, neither solution was fluorescently labeled. Grayscale ratio maps (Right) were calculated from these fluorescence maps (Left and Center). (D) On deoxygenation, Deep-Red fluorescence is reduced, whereas Green remains constant (wild-type RBCs; n = 356 cells).

文献2）Grote S, Ureña-Bailén G, Chan KC, et al. In Vitro Evaluation of CD276-CAR NK-92 Functionality, Migration and Invasion Potential in the Presence of Immune Inhibitory Factors of the Tumor Microenvironment. Cells. 2021;10(5):1020. Published 2021 Apr 26.

Method (Tracking of NK-92-Mediated Tumor Cell Invasion)：NK-92 as well as CD276-CAR NK-92 cells were assessed for their invasion potential. (CD276-CAR) NK-92 cells were stained using CellTracker™ Deep Red dye according to the staining protocol provided by the manufacturer. Melanoma 3D spheroids were co-incubated with NK-92 cells at an E:T ratio of 5:1 and monitored using the Celigo S imaging cytometer (Nexcelom, Lawrence, MA, USA) at indicated time points over a period of 120 h.

Fig 2. GFP-transduced WM115 melanoma cells were grown as 3D spheroids and co-incubated with CellTracker™ Deep Red-labeled NK-92 or CD276-CAR NK-92 cells for 120 h. Representative fluorescence pictures of spheroids at indicated time points are shown (a).

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。由于Cell-Tracker Deep Red染料的荧光信号高，最佳使用浓度在250nM-1µM。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1 制备Cell-Tracker染色工作液

① 开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

② 用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为1mM。例如，每管15µg Cell-Tracker Deep Red（Mw: 698.3 g/mol）冻干粉，加入20µl DMSO充分溶解，即得到1mM（1000×）母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到250nM-1µM的工作浓度（最佳浓度需优化）。预热染色工作液到37℃。

2.2 悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤ 根据附表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3 贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

④ 吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥ 根据表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 相关产品

货号 名称 规格
MX4107-100UG Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 2×50μg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色） 2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4110-30UG Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） 2×15µg
MX4111-1Kit Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red)

活细胞示踪三色组合试剂盒（绿色/红色/深红色）

 1kit
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色）

发表于由

Cell-Tracker Deep Red；Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针； 

产品名称

 产品编号 规格

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色）

 MX4110-30UG 2×15µg
Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） MX4110-75UG 5×15µg

Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） MX4110-150UG 10×15µg

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Deep Red，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Deep Red特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Deep Red的激发和发射光谱（630/650nm）与绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白RFP都能很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

产品特性

1） 同义名：CellTracker™ Deep Red Dye; CellTracker™ 深红色染料；

2） 分子量：698.3 g/mol

3） 外观：深蓝色固体

4） Ex/Em：630/650nm

5） 溶解性：溶于DMSO（1mM）

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 注意事项

  • 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  • 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  • 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Sarah L. Richardson, Alzbeta Hulikova, Melanie Proven, Ria Hipkiss, Magbor Akanni, Noémi B. A. Roy, Pawel Swietach. Single-cell O2 exchange imaging shows that cytoplasmic diffusion is a dominant barrier to efficient gas transport in red blood cells.Proceedings of the National Academy of Sciences May 2020, 117 (18) 10067-10078; DOI: 10.1073/pnas.1916641117

Method (Single-Cell O2 Saturation Imaging)：Blood was first diluted 200-fold in Ca2+-free Hepes-buffered Tyrode, and cells were loaded with a mixture of CellTracker Deep-Red (5 µM) and CellTracker Green (15 µM) in dimethyl sulfoxide (DMSO). For some experiments, cells were also loaded with SYTO45 (Invitrogen) at 1:1,000 dilution of 5 mM stock. After allowing 10 min for dye loading, cells were spun down, resuspended in Ca2+-containing solution, and plated on a poly-L-lysine pretreated Perspex superfusion chamber that was mounted on a Leica LCS confocal system. Cells were superfused with solutions at 23 °C or 37 °C. CellTracker Deep-Red and Green dyes were excited simultaneously by 488- and 633-nm laser lines, and fluorescence was acquired by two photomultiplier tubes at 500 to 550 and 650 to 700 nm at 7.8 Hz in bidirectional x–y scan mode (128 × 128 pixels) to maximize temporal resolution with pinhole at 4 Airy units to maximize signal to background ratio. Fluorescence was ratioed and normalized to starting ratio.

Fig. Measuring O2 exchange in RBCs using single-cell O2-saturating imaging. (C) Wild-type RBCs loaded with a mixture of Deep-Red and Green, showing fluorescence in oxygenated and deoxygenated microstreams. For these experiments, neither solution was fluorescently labeled. Grayscale ratio maps (Right) were calculated from these fluorescence maps (Left and Center). (D) On deoxygenation, Deep-Red fluorescence is reduced, whereas Green remains constant (wild-type RBCs; n = 356 cells).

文献2）Grote S, Ureña-Bailén G, Chan KC, et al. In Vitro Evaluation of CD276-CAR NK-92 Functionality, Migration and Invasion Potential in the Presence of Immune Inhibitory Factors of the Tumor Microenvironment. Cells. 2021;10(5):1020. Published 2021 Apr 26.

Method (Tracking of NK-92-Mediated Tumor Cell Invasion)：NK-92 as well as CD276-CAR NK-92 cells were assessed for their invasion potential. (CD276-CAR) NK-92 cells were stained using CellTracker™ Deep Red dye according to the staining protocol provided by the manufacturer. Melanoma 3D spheroids were co-incubated with NK-92 cells at an E:T ratio of 5:1 and monitored using the Celigo S imaging cytometer (Nexcelom, Lawrence, MA, USA) at indicated time points over a period of 120 h.

Fig 2. GFP-transduced WM115 melanoma cells were grown as 3D spheroids and co-incubated with CellTracker™ Deep Red-labeled NK-92 or CD276-CAR NK-92 cells for 120 h. Representative fluorescence pictures of spheroids at indicated time points are shown (a).

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。由于Cell-Tracker Deep Red染料的荧光信号高，最佳使用浓度在250nM-1µM。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1 制备Cell-Tracker染色工作液

① 开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

② 用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为1mM。例如，每管15µg Cell-Tracker Deep Red（Mw: 698.3 g/mol）冻干粉，加入20µl DMSO充分溶解，即得到1mM（1000×）母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到250nM-1µM的工作浓度（最佳浓度需优化）。预热染色工作液到37℃。

2.2 悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤ 根据附表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3 贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下避光孵育15-45min。

④ 吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥ 根据表1 选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

相关产品

货号 名称 规格
MX4107-100UG Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 2×50μg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色） 2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4110-30UG Cell-Tracker Deep Red 活细胞示踪探针（深红色） 2×15µg
MX4111-1Kit Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red)

活细胞示踪三色组合试剂盒（绿色/红色/深红色）

 1kit
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针；CAS NO：136832-63-8；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号 规格  

价格（元）

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）   

MX4107-100UG 2×50μg

995
Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） MX4107-250UG 5×50μg

2455
Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） MX4107-1000UG 1mg

3380

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Green CMFDA，英文全名：5-chloromethylfluorescein diacetate，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（492/517nm）与红色荧光蛋白RFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

 

产品特性

1）  CAS NO.：136832-63-8

2）  同义名：CellTracker™ Green CMFDA; Spiro(isobenzofuran-1(3H),9′-(9H)xanthen)-3-one, 3′,6′-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-;

3）  分子式：C25H17ClO7

4）  分子量：464.86 g/mol

5）  外观：无色固体

6）  溶解性：溶于DMSO

7）  化学结构式：

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Nasir NAM et al.Fluorescent cell tracer dye permits real‐time assessment of re‐epithelialization in a serum‐free ex vivo human skin wound assay. Wound Repair Regen. 2019 Jan;27(1):126-133.

Method (Cell tracker dye uptake within human ex vivo wounds in situ)：Four microliters of 25 μM CMFDA (or CMTPX) was added to the wound surface for 30 minutes, then washed dropwise with phosphate buffered saline.For cell viability studies, 1 μg/mL of propidium iodide (PI) was cotreated alongside CMFDA. Planimetric imaging was conducted using a Leica M205 FA upright Stereomicroscope using a 5x/0.50 pLANapo LWD objective at the equivalent of 64x magnification and captured using a DFC 565FX camera through LAS AF v3.1.0.8587 software. Specific band‐pass filter set for green fluorescent protein was used.

Fig. Epithelial repair of human ex vivo wounds progresses via an extending shield mechanism. Human ex vivo wounds were cultured in the presence of the fluorescent dyes. CMFDA and PI cotreatment at time of injury (D0) identifies live (CMFDA; green) and dead (PI; red) cells around the injury site (A), and these wounds traced to day 1 indicate PI‐labeled cells are no longer present (B).

文献2）Frazer J. Bye et al. Development of bilayer and trilayer nanofibrous/microfibrous scaffolds for regenerative medicine.Biomater. Sci., 2013, 1, 942-951.

Method (Cell migration into scaffolds at 7 days)：CellTracker red (CMTPX) or green (CMFDA) were applied to the hESMPs and fibroblasts respectively, prior to seeding. Cells were washed 3 times with 5 ml PBS then 10 ml of serum free cell-appropriate medium containing CellTracker (10 mM) was added and the cells incubated for 45 minutes at 37 °C. After incubation, the cells were washed 3 times with 5 ml PBS following which they were seeded onto scaffolds.Scaffolds could then be imaged in an Axon ImageExpress microscope (Molecular Devices, Sunnyvale, USA) at 570 nm λex–620 nm λem (CellTracker red) and 480 nm λex–533 nm λem (CellTracker green).

Fig. Co-culture of CellTracker™ labelled fibroblasts (green) and hESMPs (red) on bilayer membranes of either PHBV–PLA or PHBV–PCL. hESMPs were seeded on day 1 (red) onto the PHBV face of each bilayer. Fibroblasts were seeded on either the PLA or PCL face of the bilayer on day 2 (green) and then cultured for a further 7 days. In A fibroblasts (green) are confined to the PLA face after 7 days with no sign of hESMPs (red). On the opposite face (B, PHBV), hESMPs (red) are also present once again with no fibroblasts.

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对1mgCell-Tracker Green CMFDA（Mw:464.86g/mol）冻干粉，加入215µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                    
MX4107-1MG               Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）        2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

 

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针；CAS NO：136832-63-8；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号 规格  

价格（元）

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）   

MX4107-100UG 2×50μg

995
Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） MX4107-250UG 5×50μg

2455
Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） MX4107-100UG 1mg

3380

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Green CMFDA，英文全名：5-chloromethylfluorescein diacetate，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（492/517nm）与红色荧光蛋白RFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

 

产品特性

1）  CAS NO.：136832-63-8

2）  同义名：CellTracker™ Green CMFDA; Spiro(isobenzofuran-1(3H),9′-(9H)xanthen)-3-one, 3′,6′-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-;

3）  分子式：C25H17ClO7

4）  分子量：464.86 g/mol

5）  外观：无色固体

6）  溶解性：溶于DMSO

7）  化学结构式：

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Nasir NAM et al.Fluorescent cell tracer dye permits real‐time assessment of re‐epithelialization in a serum‐free ex vivo human skin wound assay. Wound Repair Regen. 2019 Jan;27(1):126-133.

Method (Cell tracker dye uptake within human ex vivo wounds in situ)：Four microliters of 25 μM CMFDA (or CMTPX) was added to the wound surface for 30 minutes, then washed dropwise with phosphate buffered saline.For cell viability studies, 1 μg/mL of propidium iodide (PI) was cotreated alongside CMFDA. Planimetric imaging was conducted using a Leica M205 FA upright Stereomicroscope using a 5x/0.50 pLANapo LWD objective at the equivalent of 64x magnification and captured using a DFC 565FX camera through LAS AF v3.1.0.8587 software. Specific band‐pass filter set for green fluorescent protein was used.

Fig. Epithelial repair of human ex vivo wounds progresses via an extending shield mechanism. Human ex vivo wounds were cultured in the presence of the fluorescent dyes. CMFDA and PI cotreatment at time of injury (D0) identifies live (CMFDA; green) and dead (PI; red) cells around the injury site (A), and these wounds traced to day 1 indicate PI‐labeled cells are no longer present (B).

文献2）Frazer J. Bye et al. Development of bilayer and trilayer nanofibrous/microfibrous scaffolds for regenerative medicine.Biomater. Sci., 2013, 1, 942-951.

Method (Cell migration into scaffolds at 7 days)：CellTracker red (CMTPX) or green (CMFDA) were applied to the hESMPs and fibroblasts respectively, prior to seeding. Cells were washed 3 times with 5 ml PBS then 10 ml of serum free cell-appropriate medium containing CellTracker (10 mM) was added and the cells incubated for 45 minutes at 37 °C. After incubation, the cells were washed 3 times with 5 ml PBS following which they were seeded onto scaffolds.Scaffolds could then be imaged in an Axon ImageExpress microscope (Molecular Devices, Sunnyvale, USA) at 570 nm λex–620 nm λem (CellTracker red) and 480 nm λex–533 nm λem (CellTracker green).

Fig. Co-culture of CellTracker™ labelled fibroblasts (green) and hESMPs (red) on bilayer membranes of either PHBV–PLA or PHBV–PCL. hESMPs were seeded on day 1 (red) onto the PHBV face of each bilayer. Fibroblasts were seeded on either the PLA or PCL face of the bilayer on day 2 (green) and then cultured for a further 7 days. In A fibroblasts (green) are confined to the PLA face after 7 days with no sign of hESMPs (red). On the opposite face (B, PHBV), hESMPs (red) are also present once again with no fibroblasts.

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对1mgCell-Tracker Green CMFDA（Mw:464.86g/mol）冻干粉，加入215µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                    
MX4107-1MG               Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针（橙色）        2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针（红色） 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） 10mg

 

 

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）

发表于由

描述

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）

 

产品关键词：

Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 细胞运动；Cell location 细胞定位；Cell Tracker dye 细胞示踪探针；CAS NO：136832-63-8；

 

订购信息：

产品名称

 产品编号 规格  

价格（元）

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色）   

MX4107-100UG 2×50μg

995
Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） MX4107-250UG 5×50μg

2455
Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针（绿色） MX4107-100UG 1mg

3380

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Green CMFDA，英文全名：5-chloromethylfluorescein diacetate，能自由穿透细胞膜进入细胞，在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内，染料只会转移到子代细胞，不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h（典型有3~6代）能展示荧光，此染料表现出理想的示踪特征：稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞，且在生理pH下呈明亮荧光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱（492/517nm）与红色荧光蛋白RFP很好的分开，适用于多重标记（见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征）。

 

产品特性

1）  CAS NO.：136832-63-8

2）  同义名：CellTracker™ Green CMFDA; Spiro(isobenzofuran-1(3H),9′-(9H)xanthen)-3-one, 3′,6′-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-;

3）  分子式：C25H17ClO7

4）  分子量：464.86 g/mol

5）  外观：无色固体

6）  溶解性：溶于DMSO

7）  化学结构式：

 

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1）Nasir NAM et al.Fluorescent cell tracer dye permits real‐time assessment of re‐epithelialization in a serum‐free ex vivo human skin wound assay. Wound Repair Regen. 2019 Jan;27(1):126-133.

Method (Cell tracker dye uptake within human ex vivo wounds in situ)：Four microliters of 25 μM CMFDA (or CMTPX) was added to the wound surface for 30 minutes, then washed dropwise with phosphate buffered saline.For cell viability studies, 1 μg/mL of propidium iodide (PI) was cotreated alongside CMFDA. Planimetric imaging was conducted using a Leica M205 FA upright Stereomicroscope using a 5x/0.50 pLANapo LWD objective at the equivalent of 64x magnification and captured using a DFC 565FX camera through LAS AF v3.1.0.8587 software. Specific band‐pass filter set for green fluorescent protein was used.

Fig. Epithelial repair of human ex vivo wounds progresses via an extending shield mechanism. Human ex vivo wounds were cultured in the presence of the fluorescent dyes. CMFDA and PI cotreatment at time of injury (D0) identifies live (CMFDA; green) and dead (PI; red) cells around the injury site (A), and these wounds traced to day 1 indicate PI‐labeled cells are no longer present (B).

文献2）Frazer J. Bye et al. Development of bilayer and trilayer nanofibrous/microfibrous scaffolds for regenerative medicine.Biomater. Sci., 2013, 1, 942-951.

Method (Cell migration into scaffolds at 7 days)：CellTracker red (CMTPX) or green (CMFDA) were applied to the hESMPs and fibroblasts respectively, prior to seeding. Cells were washed 3 times with 5 ml PBS then 10 ml of serum free cell-appropriate medium containing CellTracker (10 mM) was added and the cells incubated for 45 minutes at 37 °C. After incubation, the cells were washed 3 times with 5 ml PBS following which they were seeded onto scaffolds.Scaffolds could then be imaged in an Axon ImageExpress microscope (Molecular Devices, Sunnyvale, USA) at 570 nm λex–620 nm λem (CellTracker red) and 480 nm λex–533 nm λem (CellTracker green).

Fig. Co-culture of CellTracker™ labelled fibroblasts (green) and hESMPs (red) on bilayer membranes of either PHBV–PLA or PHBV–PCL. hESMPs were seeded on day 1 (red) onto the PHBV face of each bilayer. Fibroblasts were seeded on either the PLA or PCL face of the bilayer on day 2 (green) and then cultured for a further 7 days. In A fibroblasts (green) are confined to the PLA face after 7 days with no sign of hESMPs (red). On the opposite face (B, PHBV), hESMPs (red) are also present once again with no fibroblasts.

使用方法

1．细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长，装入足量的生长培养基。

2．操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素，比如将染料加载到细胞或组织，可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说，长期染色（≥3天）或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验（比如活力测定），使用低浓度染料（0.5-5µM）。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影，尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出，放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如，对1mgCell-Tracker Green CMFDA（Mw:464.86g/mol）冻干粉，加入215µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞，吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基，将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3．荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

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ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针（活细胞成像用）

发表于由

描述

ER-Tracker Green, for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针

产品标签

ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX；BODIPY™ FL Glibenclamide；格列本脲；DiOC6(3)；CAS: 53213-82-4；

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）

ER-Tracker Green (BODIPY™ FL Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网绿色荧光探针（活细胞成像用）

 MX4352-20UL 20µl 1388
MX4352-100UL 5×20µl 6888

【温馨提示1】：见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针（Lysotracker and Lysosensor）产品专题。

【温馨提示2】：见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针（Mitotracker）产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Green是一种药物荧光偶联物，即BODIPY™ FL标记的格列苯脲（BODIPY™ FL Glibenclamide）。格列本脲，又名优降糖（Glyburide），是一种磺酰脲类口服降糖药，用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌，以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道（KATP）的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ FL是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一，最大激发/发射波长~504/511nm，光谱特性类似于传统的FITC，与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度约为1µM，需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作，活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1） 分子式：C37H42BClF2N6O6S

2） 分子量：783.0952

3） 外观：液体

4） Ex/Em：504/511nm (in methanol)

5） 检测滤片：FITC

6） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光干燥保存，至少6个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） ER-Tracker Green（1mM）在4℃，冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内，可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体，每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底，再开盖使用。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Green以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Green 从冰箱内取出，确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解，经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装，≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液：将1mM ER-Tracker Green稀释至工作浓度，建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色：对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤3。

3. 细胞固定【选做，固定只能保留部分荧光信号】

3.1 固定细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞：固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理，因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

Fig 1.Live bovine pulmonary artery endothelial cells labeled with ER-Tracker Green and MitoTracker Red

CMXRos.Organelle staining of live bovine pulmonary artery endothelial cells. Endoplasmic reticulum was labeled with ER-Tracker Green; mitochondria were visualized with MitoTracker Red CMXRos

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ER-Tracker Green, for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针

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ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX；BODIPY™ FL Glibenclamide；格列本脲；DiOC6(3)；CAS: 53213-82-4；

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）

ER-Tracker Green (BODIPY™ FL Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网绿色荧光探针（活细胞成像用）

 MX4352-20UL 20µl 1388
MX4352-100UL 5×20µl 6888

【温馨提示1】：见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针（Lysotracker and Lysosensor）产品专题。

【温馨提示2】：见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针（Mitotracker）产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Green是一种药物荧光偶联物，即BODIPY™ FL标记的格列苯脲（BODIPY™ FL Glibenclamide）。格列本脲，又名优降糖（Glyburide），是一种磺酰脲类口服降糖药，用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌，以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道（KATP）的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ FL是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一，最大激发/发射波长~504/511nm，光谱特性类似于传统的FITC，与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度约为1µM，需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作，活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1） 分子式：C37H42BClF2N6O6S

2） 分子量：783.0952

3） 外观：液体

4） Ex/Em：504/511nm (in methanol)

5） 检测滤片：FITC

6） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光干燥保存，至少6个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） ER-Tracker Green（1mM）在4℃，冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内，可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体，每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底，再开盖使用。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Green以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Green 从冰箱内取出，确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解，经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装，≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液：将1mM ER-Tracker Green稀释至工作浓度，建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色：对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤3。

3. 细胞固定【选做，固定只能保留部分荧光信号】

3.1 固定细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞：固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理，因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

Fig 1.Live bovine pulmonary artery endothelial cells labeled with ER-Tracker Green and MitoTracker Red

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【温馨提示2】：见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针（Mitotracker）产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Blue-White DPX是Dapoxyl (DPX)染料家族的成员之一，这类染料具有长发射波长，高吸光系数，高量子产量和宽广的斯托克频移特征。这类染料属于环境敏感型的探针，随着溶剂极性的增加，最大荧光迁移到更长的波长，伴随着光量子产量降低。

本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度为100nM-1µM，需根据实际情况做优化调整。

产品特性

1） 分子式：C26H21F5N4O4S

2） 分子量：580.5283

3） 外观：黄色液体

4） Ex/Em：374/430-640nm (in methanol)

5） 检测滤片：DAPI or UV longpass

6） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光干燥保存，收到货至少6个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个染色过程中需注意避光。

2） 由于ER-Tracker Blue-White DPX是环境敏感型探针，会产生波动较大的发射吸收峰，在430-640nm之间出现。长通DAPI滤光片观察效果最理想。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Blue-White DPX以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Blue-White DPX 从冰箱内取出，确保回温至室温后，经短暂离心将所有溶液沉到管底。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液：将1mM ER-Tracker Blue-White DPX稀释至工作浓度，建议工作浓度100nM-1µM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色：对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤3。

3. 细胞固定及透化

3.1 固定和透化细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞10-20min。ER-Tracker Blue-White DPX染色信号在甲醛固定后仅能部分保留下来。如果还需要做其他染色，细胞需用0.2% TritonX-100 透化处理10min。

3.2 清洗和观察细胞：细胞固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后荧光显微镜下观察。

染色示例

Fig 1. Live bovine pulmonary artery endothelial cells stained with ER-Tracker Blue-White DPX and MitoTracker Red CM-H2XRos. Live bovine pulmonary artery endothelial cells stained with ER-Tracker™ Blue-White DPX and MitoTracker® Red CM-H2XRos. The endoplasmic reticulum appears green and the mitochondria appear orange. The image was acquired using a fluorescence microscope equipped with a triple-bandpass filter set appropriate for DAPI, fluorescein and Texas Red®dyes.

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