ER-Tracker Red (BODIPY? TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)


描述

ER-Tracker Red, for live-cell imaging

内质网红色荧光探针

产品标签

ER-Tracker Red; ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX;BODIPY™ TR Glibenclamide;格列本脲;DiOC6(3);CAS: 53213-82-4;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

MX4353-20UL 20µl 1648
MX4353-100UL 5×20µl 7188

【温馨提示1】:见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针(Lysotracker and Lysosensor)产品专题。

【温馨提示2】:见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针(Mitotracker)产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料,高度选择性结合内质网(ER)。不同于传统的内质网染料DiOC6(3),该系列染料极少染色线粒体,且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后,可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Red是一种药物的荧光偶联物,即BODIPY™ TR标记的格列苯脲(BODIPY™ TR Glibenclamide)。格列本脲,又名优降糖(Glyburide),是一种磺酰脲类口服降糖药,用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌,以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道(KATP)的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ TR是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一,最大激发/发射波长~587/615nm,光谱特性类似于传统的Texas Red,与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DMSO储存液,浓度为1mM。用于活细胞内质网染色,建议工作浓度约为1µM,需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作,活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1) 分子式:C44H42BClF2N6O7S2

2) 分子量:915.2316

3) 外观:液体

4) Ex/Em:587/615nm (in methanol)

5) 检测滤片:TRITC

6) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少6个月有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) ER-Tracker Red(1mM)在4℃,冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内,可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体,每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底,再开盖使用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞(BPAE)优化所得,且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考,请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Red以1mM的DMSO储存液形式提供,使用前请将ER-Tracker Red 从冰箱内取出,确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解,经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装,≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液:将1mM ER-Tracker Red稀释至工作浓度,建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象,建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】:在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML)内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色:对于贴壁细胞,吸除培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液,37℃孵育15-30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养基,并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定,请跳转到步骤3。

3. 细胞固定

3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞:固定后,用合适缓冲液清洗2次,每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理,因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

Fig 1.Tubulin in a live bovine pulmonary artery endothelial cell labeled with TubulinTracker Green reagent.

Endoplasmic reticulum was visualized with red-fluorescent ER-Tracker Red reagent, and the nucleus was stained with blue-fluorescent Hoechst 33342.

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