API Campy,API法国梅里埃试剂代理

产品说明:

弯曲杆菌鉴定系统
产品编号:20 800   每包装:12人份
*  24小时弯曲杆菌属的鉴定系统
API CAMPY 数据库:
  弯曲杆菌属:
Campylobacter coli 大肠弯曲杆菌
Arcobacter cryaerohoilus (= Campylobacter ryaerophilus) 嗜低温弓形杆菌(=嗜低温弯曲杆菌)
Campylobacter fetus fetus 胚胎胚胎弯曲杆菌
Campylobacter fetus venerealis 性病胚胎弯曲杆菌
Campylobacter hyointestinalis 豚肠弯曲杆菌
Campylobacter jejuni doylei 德莱空肠弯曲杆菌
Campylobacter jejuni jejuni 空肠空肠弯曲杆菌
Campylobacter lari 红嘴鸥弯曲杆菌
Campylobacter lari UPTC 红嘴鸥弯曲杆菌UPTC变种
Campylobacter mucosalis 粘膜弯曲杆菌
Campylobacter sputorrum bubulus 牛唾液弯曲杆菌
Campylobacter sputorrum     fecalis 粪唾液弯曲杆菌
Campylobacter upsaliensis 乌普萨拉弯曲杆菌
Helicobacter cinaedi (=Campylobacter cinaedi) 同性恋螺杆菌(=同性恋弯曲杆菌)
Helicobacter fennelliae  (=Campylobacter fennelliae) 芬纳尔螺杆菌(=芬纳尔弯曲杆菌)
Helicobacter pylori 幽门螺杆菌

API 10S,API法国梅里埃试剂代理

产品说明:

24小时内鉴定革兰氏阴性杆菌
产品编号:10 100   每包装:50人份
简化的API 20E,试剂条仅有10个生化反应,数据库覆盖其中最常见细菌。
API 10S 数据库:
拉丁文 中文名:
Acinetobacter baumannii 鲍曼不动杆菌
Aeromonas hydrophilia 嗜水气单胞菌
Chryseobacterium indologenes   (=Flavobacterium indologenes) 产吲哚金黄杆菌(=产吲哚黄杆菌)
Chryseobacterium meningosepticum (=Flvobacterium meningosepticum) 脑膜脓毒性金黄杆菌(=脑膜脓毒性黄杆菌)
Citrobacter braakii(+/- Citrobacter freundii) 布氏柠檬酸杆菌(+/-弗氏柠檬酸杆菌)
Citrobacter farmeri (+/-Citrobacter amalonaticus) 法氏柠檬酸杆菌(+/-无丙二酸柠檬酸杆菌)
Citrobacter freundii(+/-Citrobacter freundii) 弗氏柠檬酸杆菌(+/-弗氏柠檬酸杆菌)
Citrobacter koseri/amanlonaticus 克氏/无丙二酸柠檬酸杆菌
Edwardsiella tarda 迟钝爱德华菌
Enterobacter spp 肠杆菌属某些种
Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌
Enterobacter amnigenus 河生肠杆菌
Enterobacter cloacae 阴沟肠杆菌
Escherichia coli 大肠埃希菌
Escherichia vulneris 伤口埃菌
Hafnia alvei 蜂房哈夫尼亚菌
Klebsiella oxytoca 产酸克雷伯菌
Klebsiella pneumoniae pneumoniae 肺炎肺炎克雷伯菌
Morganella morganii 摩根摩根菌
Pantoea spp (+/- Enterobacter agglomerans) 泛菌属某些种(+/-成团肠杆菌)
Plesiomonas shigelloides 类志贺邻单胞菌
Proteus mirabilis 奇异变形杆菌
Proteus penneri 彭氏变形杆菌
Proteus vulgaris 普通变形杆菌
Providencia rettgeri 雷氏普罗威登斯菌
Providencia stuartii/ alcalifaciens 斯氏/产碱普罗威登斯菌
Pseudomonas aeruginosa 铜绿假单胞菌
Pseudomonas fluorescens 荧光假单胞菌
Pseudomonas putida 恶臭假单胞菌
Pseudomonas spp 假单胞菌属某些种
Salmonella arizonae 亚利桑那沙门菌
Salmonella choleraesuis 猪霍乱沙门菌
Salmonella gallinarum 鸡沙门菌
Salmonella paratyphi A 甲型副伤寒沙门菌
Salmonella pullorum 鸡白痢沙门菌
Salmonella spp 沙门菌属某些种
Salmonella typhi 伤寒沙门菌
Serratia liquefaciens 液化沙雷菌
Serratia marcescens 粘质沙雷菌
Serratia odorifera 气味沙雷菌
Shewanella putrefaciens 腐败希瓦菌
Shigella spp 志贺菌属某些种
Sphingobacterium multivorum 多食鞘氨醇杆菌
Stenotrophomonus maltophilia (=Xanthomonas maltophilia) 嗜麦芽寡养单胞菌(=嗜麦芽黄单胞菌)
Vibrio alginolyticus 解藻朊酸弧菌
Vibrio parahaemolyticus 副溶血弧菌
Vibrio vulnificus 创伤弧菌
Vibrio cholerae 霍乱弧菌
Versinia enterocolitica 小肠结肠类耶尔森菌
Versinia pseudotuberculosis 假结核耶尔森菌

 

API RapiD 20E,API法国梅里埃试剂代理

产品说明:

4小时鉴定革兰氏阴性杆菌
产品编号:20 701   每包装:25人份
*  快速鉴定肠杆菌科细菌
API Rapid 20E 数据库:
拉丁文 柠檬酸杆菌属:
Citrobacter amalonaticua(+/-Citrobacter amalonaticus) 无丙二酸柠檬酸杆菌(+/-无丙二酸柠檬酸杆菌)
Citrobacter farmeri(+/- C. Amalonaticus) 法氏柠檬酸杆菌 (+/-无丙二酸柠檬酸杆菌)
Citrobacter freundii group (=C. Freunclii) 弗氏柠檬酸杆菌群(=弗氏柠檬酸杆菌)
Citrobacter Koseri    (= C.diversus) 克氏柠檬酸杆菌 (=差异柠檬酸杆菌)
  爱德华菌属:
Edwardsiella hoshinae 保科爱德华菌
Edwardsiella tarda 迟钝爱德华菌
  肠杆菌属:
Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌
Enterobacter asburiae 阿氏肠杆菌
Enterobacter cancerogenus (=Enterobacter taylorae) 生癌肠杆菌 (=泰勒肠杆菌)
Enterobacter cloacae 阴沟肠杆菌
Enterobacter gergoviae 日沟维肠杆菌
Enterobacter sakazakii 阪崎肠杆菌
  埃希菌属:
Escherichia coli 大肠埃希菌
Escherichia fergusonii 费格森埃希菌
Escherichia hermannii 赫氏埃希菌
Escherichia vulneris 伤口埃希菌
  爱文菌属:
Ewingella americana 美洲爱文菌
  哈夫尼亚菌属:
Hafnia alvei 蜂房哈夫尼菌
  克雷伯菌属:
Klebsiella ornithinolytica 解鸟氨酸克雷伯菌
Klebsiella oxytoca 产酸克雷伯菌
Klebsiella planticola 植生克雷伯菌
Klebsiella pneumoniae  ozaenae 臭鼻肺炎克雷伯菌
Klebsiella pneumoniae pneumoniae 肺炎肺炎克雷伯菌
Klebsiella pneumoniae  rhinoscieromatis 鼻硬结肺炎克雷伯菌
Klebsiella terrigena 土生克雷伯菌
  克吕沃尔菌属:
Kluyvera ascorbata 抗坏血酸克吕沃尔菌
Kluyvera cryocrescens 栖冷克吕沃尔菌
Kluyvera spp 克吕沃尔菌属某些种
  米勒菌属:
Moellerella wisconsensis 威斯康星米勒菌
  摩根菌属:
Morganella morganii 摩氏摩根菌
  勒克菌属:
Leclercia adcarboxglata 非脱羧勒克菌
  变形杆菌属:
Proteus mirabilis 奇异变形菌
Proteus penneri 彭氏变形菌
Proteus vuigaris 普通变形菌
  泛菌属:
Pantoea spp (+/-Enterobacter agglonerans) 泛菌属某些种 (+/-成团肠杆菌)
  发光杆菌属:
Photobacterium dansela(=Listonella damsela) 美人鱼发光杆菌 (=美人鱼利斯顿菌)
  普罗威登斯菌属:
Providencia alcalifaciens 产碱普罗威登斯菌
Providencia rettgeri 雷氏普罗威登斯菌
Providencia stuartii 斯氏普罗威登斯菌
  沙门菌属:
Salmonella arizonae 亚利桑那沙门菌
Salmonella choleraesuis 猪霍乱沙门菌
Salmonella paratyphi A 甲型副伤寒沙门菌
Salmonella spp 沙门属某些种
Salmonella typhi 伤寒沙门菌
Salmonella gallinarum 鸡沙门菌
  志贺菌属:
Shigella spp 志贺菌属某些捉
Shigella sonnei 索氏志贺菌
  沙雷菌属:
Serratia ficaria 无花果沙雷菌
Serratia fonticola 居泉沙雷菌
Serratia liquefaciens 液化沙雷菌
Serratia marcescens 粘质沙雷菌
Serratia odorifera 气味沙雷菌
Serratia plymuthica 普城沙雷菌
Serratia rubidaea 深红沙雷菌
  寡养单胞菌属:
Stenotrophomonas maltophilia(=Xanthomonas maltophilia) 嗜麦芽寡养单胞菌(=嗜麦芽黄单胞菌)
  耶尔森菌属:
Yersinia enterocolitica 小肠结肠炎耶尔森菌
Yersinia pestis 鼠疫耶尔森菌
Yersinia pseudotuberculosis 假结核耶尔森菌
  不动杆菌属/假单胞菌属:
Acinetobacter spp 不动杆菌属某些种
Acinetobacter spp/Pseudomonas spp 不动杆菌属某些种/假单胞菌属某些种
  气单胞菌属:
Aeromonas hydrophila 嗜水气单胞菌
  邻单抱菌属:
Plesiomonas shigelloides 类志贺邻单胞菌
  弧菌属:
Vibrio alginolyticus 解藻朊酸弧菌
Vibrio cholerae 霍乱弧菌
Vibrio fluvialis 河流孤菌
Vibrio hollisae 霍氏弧菌
Vibrio metschnikovi 梅氏弧菌
Vibrio parahaemolyticus 副溶血弧菌
Vibrio vulnificus 创伤弧菌
Burkholderia cepacia (=Pseudomonas cepacia) 洋葱伯克霍尔德菌(=洋葱假单胞菌)
Buttiauxella agrestis 乡间布丘菌
Cedecea davisae 戴氏西地西菌
Cedecea lapagei 拉氏西地西菌
Cedecea neteri 奈氏西地西菌
Cedecea spp 西地西菌属某些种

API Coryne,API法国梅里埃试剂代理

产品说明:

棒状杆菌及有关种类的鉴定系统
产品编号:20 900   每包装:12人份
  * 24小时棒状杆菌及有关种类的鉴定系统
API Coryne  数据库:
  棒杆菌属:
Corynebacterium aquaticum 水生棒杆菌
Corynebacterium accolens  (=Corynebacterium group G1) 拥挤棒杆菌(=G1群棒杆菌)
Corynebacterium afermentans  (+/-Corynebacterium group ANF-1) 非发酵棒杆菌(+/-ANF-1群棒杆菌)
Corynebacterium amycolatum 无枝菌酸棒杆菌
Corynebacterium argentoratense 银色棒杆菌
Corynebacterium auris 耳棒杆菌
Corynebacterium coyleae 科伊尔棒杆菌
Corynebacterium cystitidis 膀胱炎棒杆菌
Corynebacterium diphtheriae belfanti belfanti白喉棒杆菌
C. diphtheriae intermedius 中间白喉棒杆菌
C. glucuronolyticum /seminale 解谷氨酸棒杆菌/精子棒杆菌
Corynebacterium macginleyi(= Corynebacterium group G1/G2) 麦氏棒杆菌(=G1/G2群棒杆菌)
Corynebacterium renale group 兔肾棒杆菌群
Corynebacterium propinquum   (= Corynebacterium ANF-3) 丙酸棒杆菌(=ANF-3群棒杆菌)
Corynebacterium seminale 生殖棒杆菌
Corynebacterium urealyticum(= Corynebacterium Group D2) 解脲棒杆菌(=D2群棒杆菌)
Corynebacterium bovis 牛棒杆菌
Corynebacterium diphtheriae mitis 缓和白喉棒杆菌
Corynebacterium diphtheriae gravis 重白喉棒杆菌
Corynebacterium jeikeium 杰氏棒杆菌
Corynebacterium kutscher (= Corynebacterium gr.JK) 库氏棒杆菌(=JK群棒杆菌)
Corynebacterium minutissimum 极小棒杆菌
Corynebacterium pilosum 多毛棒杆菌
Corynebacterium pseudotuberculosis 假结核棒杆菌
Corynebacterium pseudodiphtheriticum 假白喉棒杆菌
Corynebacterium renale 兔肾炎棒杆菌
Corynebacterium striatum 纹带棒杆菌 
Corynebacterium ulcerans 溃疡棒杆菌
Corynebacterium group F- 1(= Corynebacterium group F) F-1群棒杆菌(=F群棒杆菌)
Corynebacterium group G(= Corynebacterium group G1/G2) G群棒杆菌(=G1/G2群棒杆菌)
  红球菌属:
Rhodococcus equi 马红球菌
Rhodococcus spp 红球菌属某些种
  利斯特菌属:
Listeria monocytogenes 单核细胞增生利斯特菌
Listeria innocua 无害利斯特菌
Listeria grayi 格氏利斯特菌
Listeria seeligeri 斯氏利斯特菌
Listeria welshimeri 魏氏利斯特菌
Listeria spp 利斯特菌属某些种
  厄菌属:
Oerskovia spp 厄菌属某些种
  放线菌属:
Actinomyces neuii anitratus 无硝纽氏放线菌
Actinomyces neuii neuii 纽氏纽氏放线菌
Actinomyces neuii radingae  
Actinomyces neuii turicensis 图列茨放线菌
  丹毒丝菌属:
Erysipelothrix rhusiopathiae 猪红斑丹毒丝菌
  隐秘杆菌属:
Arcanobacterium haemolyticum 溶血隐秘杆菌
Arcanobacterium bernardiae 伯纳德隐秘杆菌
Arcanobacterium pyogenes  (= Actinomyces pyogenes) 化脓隐秘杆菌(=化脓放线菌)
  短杆菌属:
Brevibacterium spp 短杆菌属某些种
Brevibacterium casei (= Corynebacterium gr B1 and B3) 乳酪短杆菌(=B1和B3群棒杆菌)
Brevibacterium epidermidis (= corynebacterium gr B) 表皮短杆菌(=B群棒杆菌)
  加德纳菌属:
Gardnerella vaginalis 阴道加德纳菌
  戈登菌属:
Gordona spp 戈登菌属某些种
  罗菌属:
Rothia dentocariosa 龋齿罗菌
  节杆菌属:
Arthrobacter spp(= Corynebacterium gr.A) 节杆菌属某些种(=A群棒杆菌)
  纤维单胞菌属:
Cellulomonas spp(= Corynebacterium gr A3/A4) 纤维单胞菌属某些种(=A3/A4群棒杆菌)
Cellulomonas turbata  (=Oerskovia turbata) 特氏纤维单胞菌(=特氏厄菌)
  皮肤杆菌属:
Dermabacter hominis 人皮肤杆菌
  迪茨菌属:
Dietzia spp 迪茨菌属某些种
  微小杆菌属:
Microbacterium spp (+/- Corynebacterium gr.A4/A5) 微小杆菌属某些种(+/-A4/A5群棒杆菌)
  奴卡菌属:
Nocardia spp 奴卡菌属某些种
  厄菌属:
Oerskovia xanthineolytica 溶黄嘌呤厄菌
  丙酸杆菌属:
Propionibacterium acnes 痤疮丙酸杆菌
Propionibacterium avidum 贪婪丙酸杆菌

Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞,常见农杆菌抗生素配制方法

Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin链霉素;Rifampicin利福平;

产品名称 规格
 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 50×50μl

菌株描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上于Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株K599(NCPPB2659)含有pRi2659农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。

产品包装

组分名称 货号(规格)
K599 Electrocompetent Cell 10×50μl 50×50μl
pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl) 10μl 10μl

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,1年有效。 

运输:干冰运输。

注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3) 加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5) 电转感受态细胞中不可混入气泡,转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6) 平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7) K599具链霉素抗性,不可用于具链霉素抗性质粒的转化。

8) 为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1) 将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2) 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞插入冰中5min,待其完全融化。

3) 往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:质粒DNA最好用试剂盒抽提,且用双蒸水溶解。由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

4) 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。

5) 加入1ml无抗生素的TY并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

6) 6,000rpm离心1min,留取100ul左右上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

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产品名称 规格
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AGL1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
GV3101 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
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C58C1 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
K599 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
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Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
Ar 1193 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl

附表1固体和液体TY培养基配方

组分Component TY(液体)/升 TY(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 3g 3g
琼脂Agar / 15g
补水到1L,121℃,20min高压灭菌 补水到1L,121℃,20min高压灭菌
氯化钙CaCl2 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。

附表2常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株 羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液 工作液
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 34mg/ml 34μg/ml

 

GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞


描述

GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell

农杆菌化学感受态细胞

 

产品标签:

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif) 利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

产品名称

产品编号 规格 价格(元)

GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell

农杆菌化学感受态细胞

MF2467-1000UL

10×100μl

280

MF2467-5000UL 50×100μl

1220

 

产品描述:

GV3101菌株的背景为C58型,核基因含利福平抗性基因rif。为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pMP90(pTiC58DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pMP90(pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pMP90(pTiC58DT-DNA)型Ti质粒携带筛选标签Gent,赋予GV3101菌株庆大霉素抗性。在GV3101菌株中转入help质粒:pSoup,即得到GV3101(pSoup)菌株,可协助pGreen,62SK,pGs2系列质粒在农杆菌内复制,同时赋予该菌株四环素(Tet)抗性。本菌株适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。

我司(金畔生物)提供的GV3101(pSoup)化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (gentR) Nopaline (pSoup-tetR),经pGs2质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>103 cfu/μg DNA。

 

产品组分:

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2467-1000UL MF2467-5000UL
MF2467-A GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2467-B pGs2 Control Vector (10ng/μl) 10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。  

运输:干冰运输。

 

注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3) 加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5) 转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6) 平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7) 利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。

8) 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9) GV3101(pSoup)感受态细胞虽具有四环素抗性,但在转入目标质粒涂板筛选阳性克隆时,只需加入目标质粒抗性的抗生素,不用加四环素。

10) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1) 取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2) 往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于10μl)目的DNA(注意:转化效率较高,第一次使用前建议做预实验确定适宜的质粒量),用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3) 加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3h。

4) 6,000rpm离心1min,留取100μl左右上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

【注意】:当平板只含50μg/ml卡那霉素时,28℃培养48h即可;当平板中同时加入50μg/ml卡那霉素和20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

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产品编号 产品名称 规格
MF2301-1000UL EHA101 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2303-1000UL LBA4404 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2304-1000UL GV3101 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2305-1000UL AGL1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2467-1000UL GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2469-1000UL GV3101(pSoup-p19) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2471-1000UL GV3101(pJIC SA-rep) Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
MF2473-1000UL EHA105(pSoup) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2475-1000UL AGL1(pSoup) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF3732-2UG pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector植物表达载体 2μg
MF3733-2UG pGreenII 62-SK Plant Expression Vector植物表达载体 2μg
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0020-25G Tetracycline Hydrochloride, USP Grade盐酸四环素 25g
MS0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade硫酸链霉素 25g
MX7401-500G Agar, Gel Strength>1200 g/cm2琼脂粉(植物组培级) 500g
MS0006-30ML Plant Preservative Mixture (PPM)植物组培抗菌剂 30ml

 

附表1固体和液体LB培养基配方

组分Component LB(液体)/升 LB(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2固体和液体YEB培养基配方

组分Component YEB(液体)/升 YEB(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株 羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

 

 

GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞


描述

GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell

农杆菌化学感受态细胞

 

产品标签:

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif) 利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

产品名称

产品编号 规格 价格(元)

GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell

农杆菌化学感受态细胞

MF2467-1000UL

10×100μl

280

MF2467-5000UL 50×100μl

1220

 

产品描述:

GV3101菌株的背景为C58型,核基因含利福平抗性基因rif。为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pMP90(pTiC58DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pMP90(pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pMP90(pTiC58DT-DNA)型Ti质粒携带筛选标签Gent,赋予GV3101菌株庆大霉素抗性。在GV3101菌株中转入help质粒:pSoup,即得到GV3101(pSoup)菌株,可协助pGreen,62SK,pGs2系列质粒在农杆菌内复制,同时赋予该菌株四环素(Tet)抗性。本菌株适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。

我司(金畔生物)提供的GV3101(pSoup)化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (gentR) Nopaline (pSoup-tetR),经pGs2质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>103 cfu/μg DNA。

 

产品组分:

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2467-1000UL MF2467-5000UL
MF2467-A GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2467-B pGs2 Control Vector (10ng/μl) 10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。  

运输:干冰运输。

 

注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3) 加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5) 转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6) 平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7) 利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。

8) 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9) GV3101(pSoup)感受态细胞虽具有四环素抗性,但在转入目标质粒涂板筛选阳性克隆时,只需加入目标质粒抗性的抗生素,不用加四环素。

10) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1) 取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2) 往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于10μl)目的DNA(注意:转化效率较高,第一次使用前建议做预实验确定适宜的质粒量),用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3) 加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3h。

4) 6,000rpm离心1min,留取100μl左右上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

【注意】:当平板只含50μg/ml卡那霉素时,28℃培养48h即可;当平板中同时加入50μg/ml卡那霉素和20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

相关产品

产品编号 产品名称 规格
MF2301-1000UL EHA101 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2303-1000UL LBA4404 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2304-1000UL GV3101 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2305-1000UL AGL1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2467-1000UL GV3101(pSoup) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2469-1000UL GV3101(pSoup-p19) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2471-1000UL GV3101(pJIC SA-rep) Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
MF2473-1000UL EHA105(pSoup) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2475-1000UL AGL1(pSoup) Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF3732-2UG pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector植物表达载体 2μg
MF3733-2UG pGreenII 62-SK Plant Expression Vector植物表达载体 2μg
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0020-25G Tetracycline Hydrochloride, USP Grade盐酸四环素 25g
MS0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade硫酸链霉素 25g
MX7401-500G Agar, Gel Strength>1200 g/cm2琼脂粉(植物组培级) 500g
MS0006-30ML Plant Preservative Mixture (PPM)植物组培抗菌剂 30ml

 

附表1固体和液体LB培养基配方

组分Component LB(液体)/升 LB(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2固体和液体YEB培养基配方

组分Component YEB(液体)/升 YEB(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株 羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

 

 

ATCC15834 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞


描述

ATCC15834 Electrocompetent Cell

农杆菌电转感受态细胞

 

产品标签:

ATCC15834;MSU440;Ar 1193;Ar A4;K599;C58C1;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin链霉素;Rifampicin利福平;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格 价格(元)
MF2466-0500UL ATCC15834 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl 720
MF2466-2500UL ATCC15834 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 50×50μl 3000

【好消息】:见我司金畔生物整理的根癌(发根)农杆菌感受态细胞技术专题。

 

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

 

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株ATCC15834来源于American type culture collection (ATCC),为发根农杆菌原始菌株。ATCC15834含pRi15834农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(禾本科,豆科,烟草等),特别适合对紫杉醇,青蒿等药用植物毛状根的诱导。

 

我司金畔生物提供的ATCC15834电转感受态细胞经特殊工艺制作,特别适合大质粒的转化。基因型为Agrobacterium rhizogenes pRi15834 (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>105 cfu/μg DNA。

 

产品包装

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2466-0500UL MF2466-2500UL
MF2466-A ATCC15834 Electrocompetent Cell 10×50μl 50×50μl
MF2466-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl) 10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,1年有效。 

运输:干冰运输。

 

注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3) 加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5) 电转感受态细胞中不可混入气泡,转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6) 平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7) ATCC15834生长缓慢,转化质粒后的ATCC15834涂布在含抗生素的平板上应生长72h。

8) 为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养建议使用TY培养基(配方见附表1)。

9) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

1) 将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2) 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞插入冰中5min,待其完全融化。

 

3) 往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:质粒DNA最好用试剂盒抽提,且用双蒸水溶解。由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

 

4) 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯从冰中取出,吸水纸吸干外表面水分,快速放入电转槽中,启动电击,电击完成快速插入冰中。

5) 加入1ml无抗生素的TY并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

 

6) 6,000rpm离心1min,留取100ul左右上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养72h。

 

相关产品

产品编号 产品名称 规格
MF2306-0500UL EHA101 Electrocompetent cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2307-0500UL EHA105 Electrocompetent cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2308-0500UL LBA4404 Electrocompetent cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2309-0500UL GV3101 Electrocompetent cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2310-0500UL AGL1 Electrocompetent cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2301-1000UL EHA101 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2303-1000UL LBA4404 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2305-1000UL AGL1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2304-1000UL GV3101 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2451-1000UL MSU440 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2452-0500UL MSU440 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2453-1000UL C58C1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2454-0500UL C58C1 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2455-1000UL K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2456-0500UL K599 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2458-0500UL Ar A4  Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2460-0500UL Ar Qual Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2462-0500UL Ar 1193 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2466-0500UL ATCC15834 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl

 

附表1固体和液体TY培养基配方

组分Component TY(液体)/升 TY(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 3g 3g
琼脂Agar / 15g
  补水到1L,121℃,20min高压灭菌 补水到1L,121℃,20min高压灭菌
氯化钙CaCl2 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。

 

附表2固体和液体YMB培养基配方

组分Component YMB(液体)/升 YMB(固体)/升
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
MgSO4·7H2O 0.2g 0.2g
K2HPO4 0.5g 0.5g
NaCl 0.1g 0.1g
甘露醇 10g 10g
琼脂Agar / 15g
  补水到1L,完全溶解后,调pH至7.0,121℃,20min高压灭菌 补水到1L,完全溶解后,调pH至7.0,121℃,20min高压灭菌

 

附表3常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株 羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
ATCC15834 S S S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

附表4 ATCC15834菌株质粒转化筛选抗生素使用浓度

抗生素 配方 筛选培养基 母液 工作液
硫酸卡那霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 YMB或TY 100mg/ml 100μg/ml
壮观霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 TY 50mg/ml 70μg/ml

 

Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞


描述

Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

产品标签:

C58C1;MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格            价格(元)  
MF2461-1000UL    Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞     10×100μl 430
MF2461-5000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1830

【好消息】:见我司金畔生物整理的根癌(发根)农杆菌感受态细胞技术专题。

 

产品组分:

组分编号     

组分名称

货号(规格)

MF2461-1000UL   

MF2461-5000UL   

MF2461-A Ar 1193Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2461-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

 

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株Ar 1193含pRi1193农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(豆科,茄科等),同时具有羧苄青霉素、链霉素、利福平抗性。

我司(金畔生物)提供的Ar 1193化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (carbR,strR,rifR) pRi1193 (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   Ar 1193具有羧苄青霉素、链霉素、利福平抗性,不可用于具羧苄青霉素、链霉素或者利福平抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

相关产品

货号 名称 规格             
MF2451-1000UL     MSU440 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞     10×100μl
MF2453-1000UL C58C1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2455-1000UL K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞


描述

MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

产品标签:

MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格 价格(元)     
MF2451-1000UL    MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞     10×100μl      430
MF2451-5000UL MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1830

【好消息】:见我司金畔生物整理的根癌(发根)农杆菌感受态细胞技术专题

 

产品组分:

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2451-1000UL     MF2451-5000UL    
MF2451-A      MSU440Chemically Competent Cell 10×100μl MF2451-A
MF2451-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl MF2451-B

 

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

 

发根农杆菌菌株MSU440含天然农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,茶树、青蒿、烟草等),同时具有链霉素抗性。 

我司(金畔生物)提供的MSU440化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR) MSU440 Ri (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   MSU440具有链霉素抗性,不可用于具链霉素抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞


描述

MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

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MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

 

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货号 产品名称 规格 价格(元)     
MF2451-1000UL    MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞     10×100μl      430
MF2451-5000UL MSU440 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1830

【好消息】:见我司金畔生物整理的根癌(发根)农杆菌感受态细胞技术专题

 

产品组分:

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2451-1000UL     MF2451-5000UL    
MF2451-A      MSU440Chemically Competent Cell 10×100μl MF2451-A
MF2451-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl MF2451-B

 

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

 

发根农杆菌菌株MSU440含天然农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,茶树、青蒿、烟草等),同时具有链霉素抗性。 

我司(金畔生物)提供的MSU440化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR) MSU440 Ri (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   MSU440具有链霉素抗性,不可用于具链霉素抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
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MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞


描述

LBA4404Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

 

产品标签:

LBA4404菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif) 利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素; EHA101;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格 价格(元)   
MF2308-0500UL   LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞     10×50μl       600
MF2308-2500UL LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 50×50μl 2400

 

产品描述:

LBA4404菌株的染色体背景为Ach5,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pAL4404型Ti质粒携带筛选标签Strep,赋予LBA4404菌株链霉素抗性,适用于菸草、番茄、烟草等植物的转基因操作。

我司金畔生物提供的LBA4404电转感受态细胞经特殊工艺制作,特别适合大质粒的转化。基因型Ach5 (rifR) Ti pAL4404 (strepR) Octopine,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>105cfu/μg DNA。

 

产品组分:

组分编号      组分名称

货号(规格)

MF2308-0500UL    MF2308-2500UL   
MF2308-A LBA4404 Electrocompetent cell 10×50μl 50×50μl
MF2308-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)      10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7)   利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml 利福平,则转化效率降低到1/2。

8)   培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但这些筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些筛选抗生素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)    将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2)   取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

3)    往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

4)    启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。

5)    加入700 μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

6)   6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。【注意:当平板只含转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48h即可;当平板中加入双元载体抗生素的同时,再加入20μg/ml 利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml 利福平,需在28℃培养72-90h。】

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产品编号 产品名称 规格
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MF2308-0500UL LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2309-0500UL GV3101 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2310-0500UL AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2301-1000UL EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞            10×100μl          
MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2303-1000UL LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
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产品编号 产品名称 规格        
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MS0016-5G Spectinomycin Dihydrochloride Pentahydrate 壮观霉素二盐酸盐五水合物 5g
MS0016-25G Spectinomycin Dihydrochloride Pentahydrate 壮观霉素二盐酸盐五水合物      25g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0017-25G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 25g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 10g
MS0019-25G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 25g
MS0025-1G Gentamycin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素 1g
MS0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade 硫酸链霉素 25g

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                   LB(液体)/升           LB(固体)/升             
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                   YEB(液体)/升         YEB(固体)/升           
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)   链霉素(strep)  利福平(rif)    庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

 

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

 

EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞


描述

EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

 

产品标签:

EHA105菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif) 利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素; EHA101;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格              价格(元)  
MF2307-0500UL    EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞    10×50μl 600
MF2307-2500UL EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 50×50μl 2400

 

产品描述:

EHA105菌株由EHA101菌株改造而来,染色体背景为C58,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pEHA105(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。EHA105菌株适用于水稻、烟草等植物的转基因操作。

我司(金畔生物)提供的EHA105电转感受态细胞经特殊工艺制作,特别适合大质粒的转化。基因型为C58 (rifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT- DNA) Succinamopine,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>105cfu/μg DNA。

 

产品组分:

组分编号     组分名称

货号(规格)

MF2307-0500UL      MF2307-2500UL    
MF2307-A EHA105 Electrocompetent cell 10×50μl 50×50μl
MF2307-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)       10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,1年有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7)   利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml 利福平,则转化效率降低到1/2。

8)   培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但这些筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些筛选抗生素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)    将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2)   取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

3)    往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

4)    启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。

5)    加入700 μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

6)   6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。【注意:当平板只含转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48h即可;当平板中加入双元载体抗生素的同时,再加入20μg/ml 利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml 利福平,需在28℃培养72-90h。】

相关产品【感受态细胞系列】

产品编号 产品名称 规格
MF2306-0500UL       EHA101 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl      
MF2307-0500UL EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2308-0500UL LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2309-0500UL GV3101 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2310-0500UL AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2301-1000UL EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞            10×100μl          
MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2303-1000UL LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2305-1000UL AGL1 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2304-1000UL GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞      10×100μl

相关产品【抗生素系列】

产品编号 产品名称 规格        
MS0014-1G        Rifampicin, USP Grade 利福平 1g
MS0014-5G Rifampicin, USP Grade 利福平 5g
MS0016-5G Spectinomycin Dihydrochloride Pentahydrate 壮观霉素二盐酸盐五水合物 5g
MS0016-25G Spectinomycin Dihydrochloride Pentahydrate 壮观霉素二盐酸盐五水合物      25g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0017-25G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 25g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 10g
MS0019-25G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 25g
MS0025-1G Gentamycin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素 1g
MS0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade 硫酸链霉素 25g

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                   LB(液体)/升           LB(固体)/升             
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                   YEB(液体)/升         YEB(固体)/升           
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)   链霉素(strep)  利福平(rif)    庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

 

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞


描述

LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

 

产品标签:

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif)利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

  

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格 价格(元)   
MF2303-1000UL     LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞     10×100μl       280
MF2303-5000UL LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1220

 

产品描述:

LBA4404菌株的染色体背景为Ach5,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pAL4404型Ti质粒携带筛选标签Strep,赋予LBA4404菌株链霉素抗性,适用于菸草、番茄、烟草等植物的转基因操作。

我司提供的LBA4404化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型Ach5 (rifR) Ti pAL4404 (strepR) Octopine,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。

产品组分:

组分编号 组分名称

货号(规格)

MF2303-1000UL     MF2303-5000UL   
MF2303-A    LBA4404 Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2303-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)      10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1、感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2、整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3、加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4、为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5、转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6、平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7、利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml利福平,则转化效率降低到1/2。

8、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1、取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2、往100μl感受态细胞悬液中加入1μg(体积不大于10μl)目的DNA,用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3、加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2-3h。

4、6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

     【注意】:当平板只含50μg/ml卡那霉素时,28℃培养48h即可;当平板中同时加入50μg/ml卡那霉素和20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                   LB(液体)/升         LB(固体)/升        
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                   YEB(液体)/升       YEB(固体)/升      
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)  链霉素(strep) 利福平(rif)   庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

 

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

 

Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素


描述

Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素/多粘菌素E

(阳离子抗菌多肽/革兰氏阴性菌抗生素/USP Grade)

搜索关键词:Polymyxin E多 粘菌素E;Colistin Sulfate 硫酸粘杆菌素;Cationic Antimicrobial Peptides 阳离子抗菌肽;Gram-negative bacteria 革兰氏阴性菌;Lipopolysaccharide(LPS)脂多糖;Bacillus polymyxa 多粘芽孢杆菌;Apoptosis inducer 凋亡诱导剂;CAS:1264-72-8

 

基本描述:

粘杆菌素(Colistin),也称为多粘菌素E(Polymyxin E),来自多粘菌素家族的阳离子环多肽,一种极其强效的抗生素,有效抵抗大多数革兰氏阴性芽孢杆菌。机理研究发现,粘杆菌素通过与质膜的相互作用能诱导凋亡,且具有极强的毒性。毒性效应包括神经毒性、肾毒性、脑血管的血管充血、极端的肾脏和中枢神经系统CNS的负面效应。还有研究显示粘杆菌素进入细胞后可沉淀胞浆成分,主要是核糖体。

 

作用机制(bacteriostatic antibiotics):

作为一种表面活性试剂,能够穿透和破坏细菌细胞膜。粘杆菌素具聚阳离子特性,呈有亲水性和亲脂质,能够与细菌质膜上的脂质结合,增强质膜的渗透性,导致细胞裂解而死。

 

抗菌谱(Spectrum):

具有快速的体外抑菌活性,主要抵抗革兰氏阴性菌。【注意】:本品仅能用作科研研究,不能用作人用或者兽用。

 

生理应用(Application):

1. 透化细菌细胞膜,研究甘露糖抵抗血凝反应(mannose-resistant hemagglutination,MRHA)和某些物种比如鲍曼不动杆菌(A. baumannii)的抗生素耐性实验.

2. 研究大鼠肾脏的肝中毒(hephrotoxicity);

3. 微生物药敏性实验,抗生素MICs,时间点-杀死的动力学分析;

4. 抵制绿脓杆菌(P.aeruginosa)的抗菌后效应;

5. 属于Colistin-Oxolinic Acid Blood Agar粘菌素-萘四酮酸(colistin-oxolinic acid)血琼脂的微生物研究关键成分,用来培养嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)、芽孢杆菌种、生丝微菌属种(Hyphomicrobium species)、甲基杆菌属种(Methylobacterium species);

6. VCN抑制剂&VCNT抑制剂生长培养基的关键成分,用来分离奈瑟氏菌属种(Neisseria species);

 

基本特性:

1)CAS NO:1264-72-8

2)英文同义名:Polymixin E Sulfate;Mixture of Polymixin E Sulfate; Belcomycin;Colimycin;

3)中文同义名:硫酸多粘菌素E;多粘菌素E硫酸盐混合物;硫酸粘菌素;粘杆菌素硫酸盐;

4)分子式:2(C52H98N16O13).5(H2SO4)

5)分子量:2801.27

6)含量:≥19000IU/mg(on dry basis)

7)干燥失重:≤3.5%

8)外观:白色至类白色粉末

9)溶解性:易溶于水(50mg/ml),微溶于甲醇和乙醇,几乎不溶于丙酮、氯仿和乙醚

10)化学结构图: 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号                  产品名称                                                         规格             价格(元)   货期            
MS0033-1G Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素 1g 115 现货
MS0033-5G Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素 5g 225 现货

 

相关产品:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号                  产品名称                                                         规格             价格(元)    货期           
MS0032-1G Polymyxin B Sulphate 硫酸多粘菌素B 1g 425 现货
MS0032-5G Polymyxin B Sulphate 硫酸多粘菌素B 5g  1275 现货

 

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 

Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素


描述

Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素/多粘菌素E

(阳离子抗菌多肽/革兰氏阴性菌抗生素/USP Grade)

搜索关键词:Polymyxin E多 粘菌素E;Colistin Sulfate 硫酸粘杆菌素;Cationic Antimicrobial Peptides 阳离子抗菌肽;Gram-negative bacteria 革兰氏阴性菌;Lipopolysaccharide(LPS)脂多糖;Bacillus polymyxa 多粘芽孢杆菌;Apoptosis inducer 凋亡诱导剂;CAS:1264-72-8

 

基本描述:

粘杆菌素(Colistin),也称为多粘菌素E(Polymyxin E),来自多粘菌素家族的阳离子环多肽,一种极其强效的抗生素,有效抵抗大多数革兰氏阴性芽孢杆菌。机理研究发现,粘杆菌素通过与质膜的相互作用能诱导凋亡,且具有极强的毒性。毒性效应包括神经毒性、肾毒性、脑血管的血管充血、极端的肾脏和中枢神经系统CNS的负面效应。还有研究显示粘杆菌素进入细胞后可沉淀胞浆成分,主要是核糖体。

 

作用机制(bacteriostatic antibiotics):

作为一种表面活性试剂,能够穿透和破坏细菌细胞膜。粘杆菌素具聚阳离子特性,呈有亲水性和亲脂质,能够与细菌质膜上的脂质结合,增强质膜的渗透性,导致细胞裂解而死。

 

抗菌谱(Spectrum):

具有快速的体外抑菌活性,主要抵抗革兰氏阴性菌。【注意】:本品仅能用作科研研究,不能用作人用或者兽用。

 

生理应用(Application):

1. 透化细菌细胞膜,研究甘露糖抵抗血凝反应(mannose-resistant hemagglutination,MRHA)和某些物种比如鲍曼不动杆菌(A. baumannii)的抗生素耐性实验.

2. 研究大鼠肾脏的肝中毒(hephrotoxicity);

3. 微生物药敏性实验,抗生素MICs,时间点-杀死的动力学分析;

4. 抵制绿脓杆菌(P.aeruginosa)的抗菌后效应;

5. 属于Colistin-Oxolinic Acid Blood Agar粘菌素-萘四酮酸(colistin-oxolinic acid)血琼脂的微生物研究关键成分,用来培养嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)、芽孢杆菌种、生丝微菌属种(Hyphomicrobium species)、甲基杆菌属种(Methylobacterium species);

6. VCN抑制剂&VCNT抑制剂生长培养基的关键成分,用来分离奈瑟氏菌属种(Neisseria species);

 

基本特性:

1)CAS NO:1264-72-8

2)英文同义名:Polymixin E Sulfate;Mixture of Polymixin E Sulfate; Belcomycin;Colimycin;

3)中文同义名:硫酸多粘菌素E;多粘菌素E硫酸盐混合物;硫酸粘菌素;粘杆菌素硫酸盐;

4)分子式:2(C52H98N16O13).5(H2SO4)

5)分子量:2801.27

6)含量:≥19000IU/mg(on dry basis)

7)干燥失重:≤3.5%

8)外观:白色至类白色粉末

9)溶解性:易溶于水(50mg/ml),微溶于甲醇和乙醇,几乎不溶于丙酮、氯仿和乙醚

10)化学结构图: 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号                  产品名称                                                         规格             价格(元)   货期            
MS0033-1G Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素 1g 115 现货
MS0033-5G Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素 5g 225 现货

 

相关产品:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号                  产品名称                                                         规格             价格(元)    货期           
MS0032-1G Polymyxin B Sulphate 硫酸多粘菌素B 1g 425 现货
MS0032-5G Polymyxin B Sulphate 硫酸多粘菌素B 5g  1275 现货

 

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 

EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞


描述

EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

 

产品标签:

EHA105菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif) 利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素; EHA101;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格              价格(元)  
MF2307-0500UL    EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞    10×50μl 600
MF2307-2500UL EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 50×50μl 2400

 

产品描述:

EHA105菌株由EHA101菌株改造而来,染色体背景为C58,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pEHA105(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。EHA105菌株适用于水稻、烟草等植物的转基因操作。

我司(金畔生物)提供的EHA105电转感受态细胞经特殊工艺制作,特别适合大质粒的转化。基因型为C58 (rifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT- DNA) Succinamopine,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>105cfu/μg DNA。

 

产品组分:

组分编号     组分名称

货号(规格)

MF2307-0500UL      MF2307-2500UL    
MF2307-A EHA105 Electrocompetent cell 10×50μl 50×50μl
MF2307-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)       10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,1年有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7)   利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml 利福平,则转化效率降低到1/2。

8)   培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但这些筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些筛选抗生素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)    将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2)   取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

3)    往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

4)    启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。

5)    加入700 μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

6)   6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。【注意:当平板只含转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48h即可;当平板中加入双元载体抗生素的同时,再加入20μg/ml 利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml 利福平,需在28℃培养72-90h。】

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产品编号 产品名称 规格
MF2306-0500UL       EHA101 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl      
MF2307-0500UL EHA105 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2308-0500UL LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2309-0500UL GV3101 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2310-0500UL AGL1 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2301-1000UL EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞            10×100μl          
MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2303-1000UL LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
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MF2304-1000UL GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞      10×100μl

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产品编号 产品名称 规格        
MS0014-1G        Rifampicin, USP Grade 利福平 1g
MS0014-5G Rifampicin, USP Grade 利福平 5g
MS0016-5G Spectinomycin Dihydrochloride Pentahydrate 壮观霉素二盐酸盐五水合物 5g
MS0016-25G Spectinomycin Dihydrochloride Pentahydrate 壮观霉素二盐酸盐五水合物      25g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0017-25G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 25g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 10g
MS0019-25G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 25g
MS0025-1G Gentamycin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素 1g
MS0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade 硫酸链霉素 25g

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                   LB(液体)/升           LB(固体)/升             
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                   YEB(液体)/升         YEB(固体)/升           
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)   链霉素(strep)  利福平(rif)    庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

 

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞


描述

LBA4404Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞

 

产品标签:

LBA4404菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif) 利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素; EHA101;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格 价格(元)   
MF2308-0500UL   LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞     10×50μl       600
MF2308-2500UL LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 50×50μl 2400

 

产品描述:

LBA4404菌株的染色体背景为Ach5,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pAL4404型Ti质粒携带筛选标签Strep,赋予LBA4404菌株链霉素抗性,适用于菸草、番茄、烟草等植物的转基因操作。

我司金畔生物提供的LBA4404电转感受态细胞经特殊工艺制作,特别适合大质粒的转化。基因型Ach5 (rifR) Ti pAL4404 (strepR) Octopine,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>105cfu/μg DNA。

 

产品组分:

组分编号      组分名称

货号(规格)

MF2308-0500UL    MF2308-2500UL   
MF2308-A LBA4404 Electrocompetent cell 10×50μl 50×50μl
MF2308-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)      10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7)   利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml 利福平,则转化效率降低到1/2。

8)   培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但这些筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些筛选抗生素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)    将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2)   取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

3)    往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

4)    启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。

5)    加入700 μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

6)   6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。【注意:当平板只含转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48h即可;当平板中加入双元载体抗生素的同时,再加入20μg/ml 利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml 利福平,需在28℃培养72-90h。】

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产品编号 产品名称 规格
MF2306-0500UL       EHA101 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl      
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MF2308-0500UL LBA4404 Electrocompetent cell 农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
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MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
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产品编号 产品名称 规格        
MS0014-1G        Rifampicin, USP Grade 利福平 1g
MS0014-5G Rifampicin, USP Grade 利福平 5g
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MS0019-10G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 10g
MS0019-25G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 25g
MS0025-1G Gentamycin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素 1g
MS0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade 硫酸链霉素 25g

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                   LB(液体)/升           LB(固体)/升             
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                   YEB(液体)/升         YEB(固体)/升           
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)   链霉素(strep)  利福平(rif)    庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

 

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

 

ATCC15834 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞


描述

ATCC15834 Electrocompetent Cell

农杆菌电转感受态细胞

 

产品标签:

ATCC15834;MSU440;Ar 1193;Ar A4;K599;C58C1;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin链霉素;Rifampicin利福平;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格 价格(元)
MF2466-0500UL ATCC15834 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl 720
MF2466-2500UL ATCC15834 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 50×50μl 3000

【好消息】:见我司金畔生物整理的根癌(发根)农杆菌感受态细胞技术专题。

 

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

 

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株ATCC15834来源于American type culture collection (ATCC),为发根农杆菌原始菌株。ATCC15834含pRi15834农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(禾本科,豆科,烟草等),特别适合对紫杉醇,青蒿等药用植物毛状根的诱导。

 

我司金畔生物提供的ATCC15834电转感受态细胞经特殊工艺制作,特别适合大质粒的转化。基因型为Agrobacterium rhizogenes pRi15834 (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>105 cfu/μg DNA。

 

产品包装

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2466-0500UL MF2466-2500UL
MF2466-A ATCC15834 Electrocompetent Cell 10×50μl 50×50μl
MF2466-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl) 10μl 10μl

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,1年有效。 

运输:干冰运输。

 

注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3) 加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5) 电转感受态细胞中不可混入气泡,转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6) 平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7) ATCC15834生长缓慢,转化质粒后的ATCC15834涂布在含抗生素的平板上应生长72h。

8) 为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养建议使用TY培养基(配方见附表1)。

9) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

1) 将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2) 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞插入冰中5min,待其完全融化。

 

3) 往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:质粒DNA最好用试剂盒抽提,且用双蒸水溶解。由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

 

4) 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯从冰中取出,吸水纸吸干外表面水分,快速放入电转槽中,启动电击,电击完成快速插入冰中。

5) 加入1ml无抗生素的TY并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

 

6) 6,000rpm离心1min,留取100ul左右上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养72h。

 

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产品编号 产品名称 规格
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MF2309-0500UL GV3101 Electrocompetent cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
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MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2303-1000UL LBA4404 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2305-1000UL AGL1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
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MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2460-0500UL Ar Qual Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2462-0500UL Ar 1193 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2466-0500UL ATCC15834 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl

 

附表1固体和液体TY培养基配方

组分Component TY(液体)/升 TY(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 3g 3g
琼脂Agar / 15g
补水到1L,121℃,20min高压灭菌 补水到1L,121℃,20min高压灭菌
氯化钙CaCl2 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。

 

附表2固体和液体YMB培养基配方

组分Component YMB(液体)/升 YMB(固体)/升
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
MgSO4·7H2O 0.2g 0.2g
K2HPO4 0.5g 0.5g
NaCl 0.1g 0.1g
甘露醇 10g 10g
琼脂Agar / 15g
补水到1L,完全溶解后,调pH至7.0,121℃,20min高压灭菌 补水到1L,完全溶解后,调pH至7.0,121℃,20min高压灭菌

 

附表3常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株 羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
ATCC15834 S S S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

附表4 ATCC15834菌株质粒转化筛选抗生素使用浓度

抗生素 配方 筛选培养基 母液 工作液
硫酸卡那霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 YMB或TY 100mg/ml 100μg/ml
壮观霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 TY 50mg/ml 70μg/ml

 

Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞


描述

Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

产品标签:

C58C1;MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号 产品名称 规格            价格(元)  
MF2461-1000UL    Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞     10×100μl 430
MF2461-5000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1830

【好消息】:见我司金畔生物整理的根癌(发根)农杆菌感受态细胞技术专题。

 

产品组分:

组分编号     

组分名称

货号(规格)

MF2461-1000UL   

MF2461-5000UL   

MF2461-A Ar 1193Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2461-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

 

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株Ar 1193含pRi1193农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(豆科,茄科等),同时具有羧苄青霉素、链霉素、利福平抗性。

我司(金畔生物)提供的Ar 1193化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (carbR,strR,rifR) pRi1193 (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   Ar 1193具有羧苄青霉素、链霉素、利福平抗性,不可用于具羧苄青霉素、链霉素或者利福平抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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货号 名称 规格             
MF2451-1000UL     MSU440 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞     10×100μl
MF2453-1000UL C58C1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2455-1000UL K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g