EPI400 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞


描述

EPI400 Chemically Competent Cell  

大肠杆菌化学感受态细胞

搜索关键词:

EPI400;EC100;CopyCutter Induction Solution;toxic or unstable DNA毒性或不稳定DNA;Epicentre;

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号

产品名称 规格 价格(元)
MF2350-1000UL    EPI400 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞    10×100μl    396
MF2350-5000UL EPI400 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl

1696

【好消息】:见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡,发表使用评论,赢红包,双重惊喜,行动起来啦。

产品组分:

组分编号 组分名 货号(规格)
MF2350-1000UL    MF2350-5000UL   
MF2350-A     EPI400Chemically Competent Cell         10×100μl 50×100μl
MF2350-B Control Vector puC19,10pg/μl 10μl 10μl

菌株描述

EPI400菌株,来源于T1抗噬菌体-EC100菌株,通过对含ColE1或pMB1复制起始点的载体(比如,pUC和pET型载体)上控制载体拷贝数的某一基因进行改造而来。EC100菌株上的组成性表达基因-pcnB(plasmidcopynumber)被删除,用连接到一诱导启动子的改良pcnB基因来替换,即得到EPI400菌株。

EPI400菌株能够明显降低各种常用载体的拷贝数,从而特别适用于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆。另外,只需用CopyCutter诱导液(CopyCutter Induction Solution)短时孵育,又可提高拷贝数,改善质粒产量,同时不会降低稳定性。

【更多特征】:

[mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型,使EPI400适合于甲基化DNA的有效克隆;

endA1的突变确保质粒克隆的高产量;recA1的突变确保大分子DNA插入的稳定性;

lacZΔM15标记的存在,使EPI400适用于蓝白斑筛选;

tonA赋予EPI400具抗噬菌体T1和T5的能力;rpsL赋予EPI400链霉素抗性。

EPI400菌株基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr

产品描述:

本品是大肠杆菌EPI400菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达5×107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1) 感受态细胞必须用干冰运输,感受态细胞应在-80℃保存。

2) 感受态细胞最好在冰上融化,不可在冰上放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

3) 进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。

4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。

5) 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。

6) 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

7) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1) 从-80℃冰箱取出取感受态细胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),用手轻弹管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰浴静置25min。

2) 42℃水浴热激45s,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3) 向每个离心管中加700 μl无菌的LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200 rpm振荡培养60min,目的使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。

4) 低速离心收菌(比如5000rpm,1min),留取100μl左右上清,用枪轻轻吹打重悬菌块,之后加到含所选质粒筛选抗生素的LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于室温(或37℃)直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养过夜。如果进行蓝白斑筛选,37℃培养至少15h。

【注意】:

a)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可不用离心,直接取少量转化产物涂布平板;反之,若转化的DNA总量较少,则通过离心(5000 rpm,1min)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

 

相关产品

货号 名称 规格
MF2331-1000UL          BL21 (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2332-1000UL BL21 (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2333-1000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2341-1000UL Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞       10×100μl  
MF2342-1000UL OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2339-1000UL Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2340-1000UL Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2334-1000UL BL21 Star (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2350-1000UL EPI400 Chemically Competent Cell  大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2481-1000UL BL21 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2482-1000UL OverExpress C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
MF2487-1000UL JM109(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2488-1000UL HT115(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2489-1000UL ArcticExpress(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2490-1000UL ArcticExpress(DE3)pRARE2 Chemically Competent Cell化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g