TRITC-Dextran 70 (TD70) TRITC标记葡聚糖(70 kDa)

TD10;TD40;TD70; FD40; FD70;TRITC-dextran 罗丹明标记葡聚糖; microcirculation 微循环研究;Cell permeability 细胞渗透性研究; CAS NO:60842-46-8

产品描述

TRITC标记葡聚糖(TRITC-Dextran)是以天然葡聚糖B512F限制水解和分级纯化制备的不同分子量葡聚糖为底物,经四甲基罗丹明B(TRITC)标记所得的合成探针。罗丹明基团通过一个稳定的硫代氨甲酰键连接到葡聚糖上(见附录图1. TRITC-Dextran分子片段的结构特征),此标记步骤不会引起任何的葡聚糖降解。TRITC-Dextran内每个葡萄糖单位含0.001~0.008 mol TRITC,这一低水平的替换确保葡聚糖最小的结构变化,这一特性对渗透性研究来说是最基本需求。

TRITC标记葡聚糖(TRITC-Dextran)主要用于细胞、血管和组织内的渗透性和转运研究。另一好处在于为健康和病理组织的转运和渗透性提供定量数据。这些研究能通过活体荧光显微镜技术进行实时观察,这一技术具有高灵敏度,组织液内低至1µg/ml的浓度都能检测到。不同于FITC-Dextran,TRITC-Dextran的荧光不依赖于pH范围(4-9)。另外一个重要特征是TRITC-Dextran不会与动脉壁结合。

本品是对平均分子量约70 kDa葡聚糖进行标记的罗丹明衍生物,即罗丹明标记葡聚糖70(TRITC-dextran, TD70),以冻干粉形式提供,易溶于水,最大激发和发射波长分别为550和572nm。

产品特性

1) 化学名:Dextran 3´,6´ bis(tetramethylamino)-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9´-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate, average Mw of approximately 70,000

2) 同义名:Tetramethyl-rhodamine B-dextran 70; Tetramethyl-rhodamine B thiocarbamoyl-dextran 70; 四甲基罗丹明B标记的葡聚糖70;罗丹明标记葡聚糖,分子量70,000;TRITC标记葡聚糖(分子量7万);TRITC-葡聚糖(分子量70kDa);

3) 分子量:average Mw 65,000-85,000

4) 置换率:0.001~0.008 mol TRITC/glucose unit

5) 外观:橘红至红色粉末

6) 溶解性:易溶于水或盐溶液,也溶于DMSO,甲酰胺和某些其他极性有机溶剂,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和DMF

7) 光谱特性:Ex/Em=550/572nm【我司实验室测试发现TRITC-Dextran溶液在pH 3-9的范围内荧光仅发生微小变化,见附录图2。进行定量检测时这一特征值得关注。对生物培养基的测定可能pH会明显改变荧光强度,或加强,或抑制。】

8) 生化特性:分子量≥5 kDa的葡聚糖分子在溶液中呈现出可变和伸直线团的特征,见附录表3,各种分子量葡聚糖的分子尺寸。

保存与运输方法

保存:室温避光短期保存,2-8℃避光长期保存,保持密封干燥,至少3年稳定。 

运输:室温运输。

产品稳定性

TRITC-Dextrans的稳定性目前未做详细的测定,但从结构推测其稳定性类似于FITC-Dextrans。仅当pH>9和上升温度内荧光素可能存在水解的风险。硫代氨甲酰键的水解产生4-或5-氨基罗丹明,能即可被HPLC检测到。

兔血浆、肌肉匀浆液、肝脏匀浆液和尿液内的FITC-Dextrans在37℃,至少3天内保持稳定,分子量不会发生变化,且未发现荧光素基团的释放。6%三氯乙酸内FITC-Dextrans室温稳定保存3天。【文献来源:①P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

未发表的研究数据显示,将高压处理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃长达5个月,发现仅在50℃情况下可能观察到微量(1%)的自由氨基荧光素含量增加。其他的未发表研究显示,FITC-Dextrans在pH4溶液35℃内能稳定保存高达1年。而在pH4,80℃内硫代氨甲酰键稳定30min,不过,可能观察到葡聚糖开始降解的迹象。pH9,36℃内存放一个月以上会发生一定量(24%)的荧光衰减。

注意事项

1) TRITC-Dextrans易溶于水或盐溶液,可根据实际使用浓度配制适当浓度的母液。

2) TRITC-Dextrans高压灭菌可能导致少量氨基罗丹明的释放,若需要无菌,建议用过滤的方法来除菌。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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