SYTO 9 (10,000× in DMSO)  LAMP用核酸染料 SYTO 9作为一款灵敏的DNA结合染料

SYTO 9绿色荧光核酸染料(SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain),是一款优秀的细胞核和染色体复染剂,具细胞膜渗透性。SYTO 9高亲和结合DNA(以及RNA),一旦结合后呈现明显增强的荧光信号,用蓝光激发(最大发射波长485nm),发绿色荧光(最大激发分别是498nm(DNA)和501nm(RNA))。SYTO 9由于能很好的渗透进入原核和真核细胞膜,普遍用作核复染剂(特别是细菌细胞),常常与死细胞核复染剂(比如:碘化丙啶PI)联合使用,用于活细菌/死细菌染色[1-2]。

更值得关注的是,SYTO 9作为一款灵敏的DNA结合染料,在RT-PCR中,表现出许多优异的特征,包括:在宽广的染料浓度下产生高度可重复的DNA熔解曲线,极低的PCR抑制率,高信噪比和高灵敏度,使其成为一款理想的SYBR Green I替代染料,用于RT-PCR、DNA熔解曲线分析、以及环介导等温扩增(LAMP)实验[3-5]。

本品为溶于DMSO的10000×SYTO 9核酸染料,适用于LAMP实验,亦可做PCR实验,使用时仅需根据实验体系加量使其终浓度在0.5×~2×之间优化即可。

保存与运输方法

保存:2-8℃避光保存,也可置于-20℃保存,2年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 本品保存和使用过程中请注意避光。

2) 本品使用前,请置于室温回温,之后用漩涡混匀器完全混匀。本品高度稳定,但染料在保存的过程中会吸附到管壁上,漩涡混匀数秒使其充分溶解。

3) 目前没数据表明SYTO 9具致畸性或毒性。由于该探针与核酸结合,可能被当作一种潜在的突变剂,需做适当的防护措施。由于DMSO能促进有机分子进入组织,此储存液在使用的过程中务必妥善操作。根据当地的政策来处理使用本品后的废液。

4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

参考文献

[1] Stiefel P, Schmidt-Emrich S, Maniura-Weber K, Ren Q. Critical aspects of using bacterial cell viability assays with the fluorophores SYTO9 and propidium iodide. BMC Microbiol. 2015 Feb 18;15:36. doi: 10.1186/s12866-015-0376-x. PMID: 25881030; PMCID: PMC4337318.

[2] McGoverin C, Robertson J, Jonmohamadi Y, Swift S, Vanholsbeeck F. Species Dependence of SYTO 9 Staining of Bacteria. Front Microbiol. 2020 Sep 3;11:545419. doi: 10.3389/fmicb.2020.545419. PMID: 33013779; PMCID: PMC7494787.

[3] Quyen TL, Ngo TA, Bang DD, Madsen M, Wolff A. Classification of Multiple DNA Dyes Based on Inhibition Effects on Real-Time Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP): Prospect for Point of Care Setting. Front Microbiol. 2019 Oct 15;10:2234. doi: 10.3389/fmicb.2019.02234. PMID: 31681184; PMCID: PMC6803449.

[4] Monis PT, Giglio S, Saint CP. Comparison of SYTO9 and SYBR Green I for real-time polymerase chain reaction and investigation of the effect of dye concentration on amplification and DNA melting curve analysis. Anal Biochem. 2005 May 1;340(1):24-34. doi: 10.1016/j.ab.2005.01.046. PMID: 15802126.

[5] Oscorbin IP, Belousova EA, Zakabunin AI, Boyarskikh UA, Filipenko ML. Comparison of fluorescent intercalating dyes for quantitative loop-mediated isothermal amplification (qLAMP). Biotechniques. 2016 Jul 1;61(1):20-5. doi: 10.2144/000114432. PMID: 27401670.

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