Di-8-ANEPPS 膜电位荧光探针


描述

Di-8-ANEPPS 膜电位荧光探针

 

温馨提示:见我司金畔生物(MKBio)整理的膜电位荧光探针(Probes for Membrane Potential)产品专题

搜索关键词:

膜电位荧光探针,Di-4-ANEPPS,Di-8-ANEPPS,ANEP染料,Fast-response probe快速响应探针,CAS:90134-00-2;

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产品名称

产品编号            规格                 

价格(元)     

Di-8-ANEPPS 膜电位荧光探针    MX4039-5MG 5mg

2790

产品描述:

ANEP (AminoNaphthylEthenylPyridinium)染料由Leslie Loew和同事开发,是最灵敏且稳定的快速响应探针,能检测亚毫秒级的膜电位变化。Di-4-ANEPPS(MX4038)和Di-8-ANEPPS(MX4039)在各种组织、细胞和模型膜系统中表现出相当一致的荧光强度变化率(10%荧光变化/100mV)。ANEP染料的电子结构发生变化,从而,它们的荧光光谱对周围的电场变化做出响应。这些光学响应足够快来检测兴奋细胞(包括单个神经元、心肌细胞和完整组织制备物)的瞬时电位变化。另外,ANEP染料的激发光谱呈现出电位依赖的迁移,从而使其能通过测定激发波长下的荧光比来定量膜电位。ANEP染料结构上的差异使其适用于各种特定应用(见附录I和II)。

电位敏感ANEP染料的特征:

①两性离子分子,在不同细胞和组织样本中表现出最稳定的电位响应。

②结合到磷脂膜上的最大激发和发射波长约为465/635nm【但光谱特征与环境密切关联】

③非荧光直至结合到膜上

④溶于乙醇、DMSO和DMF【Di-2-ANEPEQ(MX4040)是水溶性的ANEP染料】

⑤快速响应探针,适用于检测亚毫秒的膜电位变化

Di-8-ANEPPS与Di-4-ANEPPS(MX4038)相比,具更好的亲脂性,染料能更好的保留在细胞质膜外层,因而更加适用于长期膜电位研究。Di-8-ANEPPS比Di-4-ANEPPS(MX4038)具更好的光稳定性和更低的光毒性。

 

基本特性:

    1. CAS NO:157134-53-7
    2. 化学名:Pyridinium, 4-[2-[6-(dioctylamino)-2-naphthalenyl]ethenyl]-1-(3-sulfopropyl)-, inner salt
    3. 分子式:C36H52N2O3S 
    4. 分子量:592.87g/mol
    5. 外观:橙色至暗红色固体
    6. 纯度:≥95%(HPLC)
    7. 荧光:λex 498 nm, λem 713 nm in methanol【需注意:相较于在有机溶剂内,苯乙烯染料与脂质结合后通常发生很大的蓝光迁移】
    8. 溶解性:溶于DMSO、乙醇、DMF
    9. 化学结构式:

保存与运输方法

保存:+4℃干燥避光保存,可置于-20℃长期干燥避光保存,2年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.储存液制备

将低温保存的冻干粉置于室温回温至少20min,低速离心后,将其溶于有机溶剂比如乙醇、DMSO或DMF配制成1mg/ml(~2mM)的储存液。将储存液避光保存在+4℃。

2.ANEP染料的细胞加载

2.1批量加载

爬片培养的贴壁细胞一般通过将少量的染料储存液(比如溶于DMSO)加入细胞培养基(终浓度为0.2-2μM)进行标记即可。更高的染料浓度(10-50μM)用于标记灌注的组织样本。通常要加0.05% Pluronic®F-127(MS4301)在标记溶液内,以提高染料的溶解(对于亲脂性更高的ANEP染料比如Di-8-ANEPPS尤其不能省略)。低标记温度(4-20℃)能抑制染料的内在化。含探针的溶液孵育10-20min,细胞用不含染料的培养基清洗3次。

2.2逆行标记

特定的神经元群细胞可通过定位压力注射高浓度的染料溶液(10-20mg/ml,溶于DMSO或乙醇)进入神经组织来实现标记。

3.荧光测定

一般通过记录激发在450nm和510nm,发射在>570nm处的荧光强度来进行荧光比率成像测定。当膜超极化,荧光强度比率(F450/F510)降低。电位响应的校准可通过使用离子载体缬氨霉素(MS0049)和添加不同钾离子浓度到细胞外培养基来调整多种膜电位来实现。

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货号 名称 规格            
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