FITC-Dextran 500 (FD500) FITC标记葡聚糖(500 kDa)


描述

FITC-Dextran 500 (FD500)

FITC标记葡聚糖(500 kDa)

产品标签

FITC-Dextran FITC标记葡聚糖;FD4;FD10;FD500;TRITC-dextran 罗丹明标记葡聚糖;TD40;TD70;microcirculation 微循环研究;Cell permeability 细胞渗透性研究; CAS NO:60842-46-8;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)

FITC-Dextran 500 (FD500) FITC标记葡聚糖(500 kDa)

MS0908-0100MG 100mg

1548

FITC-Dextran 500 (FD500) FITC标记葡聚糖(500 kDa) MS0908-1000MG 1g

6948

产品描述

FITC标记葡聚糖(FITC-Dextran)是以天然葡聚糖B512F限制水解和分级纯化制备的不同分子量葡聚糖为底物,经荧光素标记所得的合成探针。荧光素基团通过一个稳定的硫代氨甲酰键连接到葡聚糖上(见附录图1. FITC-Dextran分子片段的结构特征),此标记步骤不会引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran内每个葡萄糖单位含0.002~0.010 mol FITC,这一低水平的替换确保葡聚糖最小的结构变化,这一特性对渗透性研究来说是最基本需求。

FITC标记葡聚糖(FITC-Dextran)广泛用于微循环和细胞通透性研究,通过荧光显微测定法来检测。还可用于植物细胞壁多孔性和毛细血管通透性研究。小分子量的FITC-Dextran也能用来测定比如内吞和细胞连接通透性的生理过程。FITC-Dextran 500 (FD500)可以用作脑脊液 (Cerebrospinal Fluid, CSF)示踪剂。FD500可用于内皮细胞或上皮细胞单层孔隙度、细胞层内顶端基底侧运动和细胞连接渗透性研究。血浆蛋白不会结合FITC-Dextran。

本品是对平均分子量约500kDa葡聚糖进行标记的荧光素衍生物,即异硫氰酸荧光素葡聚糖500(fluorescein isothiocyanate dextran 500, FITC-dextran, FD500),以冻干粉形式提供,易溶于水,最大激发和发射波长分别为493和518nm。

产品特性

1) CAS NO:60842-46-8

2) 化学名:Dextran(3´,6´dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9´-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate

, average Mw of approximately 500,000

3) 同义名:Fluorescein isothiocyanate-dextran 500; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 500;

4) 分子量:average Mw 59,000-77,000

5) 置换率:0.002~0.010 mol FITC/glucose unit

6) 外观:黄色至深橘色粉末

7) 溶解性:易溶于水(≥25mg/ml)或盐溶液,也溶于DMSO,甲酰胺和某些其他极性有机溶剂,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺(DMF)

8) 光谱特性:Ex/Em=493/518nm【由于荧光素基团的电荷状态依赖于缓冲液的pH和离子强度,因此荧光强度也会因这些参数的变化而变化。pH>8观察到最大荧光强度。生理缓冲液能显著影响荧光强度,或得到增加或受到抑制。见附录图2. pH 4-9范围内FITC-Dextran 70的荧光变化(Em=520nm)】

保存与运输方法

保存:室温避光短期保存,2-8℃避光长期保存,保持密封干燥,至少3年稳定。 

运输:室温运输。

产品稳定性

综合各种溶液体系和温度下FITC-Dextrans的稳定性测定,总的来说,体内外FITC-Dextrans的稳定性非常优秀。仅当pH>9和上升温度内荧光素可能存在水解的风险。兔血浆、肌肉匀浆液、肝脏匀浆液和尿液内的FITC-Dextrans在37℃,至少3天内保持稳定,分子量不会发生变化,且未发现荧光素基团的释放。6%三氯乙酸内FITC-Dextrans室温稳定保存3天。【文献来源:P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰键的水解产生4-或5-氨基荧光素,能立即被HPLC定量检测到。未发表的研究数据显示,将高压处理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃长达5个月,发现仅在50℃情况下可能观察到微量(1%)的自由氨基荧光素含量增加。单独进行高压处理会引起2.7%的自由氨基荧光素产生。

其他的未发表研究显示,FITC-Dextran在pH4溶液35℃内能稳定保存高达1年。而在pH4,80℃内硫代氨甲酰键稳定30min,可能观察到葡聚糖的降解。pH9,35℃内存放一个月以上会发生一定量(24%)的荧光衰减。

一些研究证明,FITC-Dextrans在持续性实验(1-6天)的体内稳定性。【文献来源:N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】

注意事项

1) FITC-Dextrans易溶于水或盐溶液,可根据实际使用浓度配制适当浓度的母液。

2) FITC-Dextrans溶液高压灭菌可能导致少量氨基荧光素的释放,若需要无菌,建议用过滤的方法来除菌。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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附录

图1. FITC-Dextran分子片段的结构特征