Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌


描述

Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus

酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

温馨提示

见我司(金畔生物)整理的Zymolyase®酵母细胞壁溶解酶(酵母裂解酶)产品专题。

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Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Lyticase;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  价格(元)        
Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌        MF0211-500MG          500mg             13880        
MF0211-5G 5g 89280

产品描述

Zymolyase®-100T是藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)深层发酵产生并通过亲和色谱法部分纯化获得的一种新型酶制品,具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性,产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase),该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物,释放出特异性的昆布五糖(也是最主要和最小的水解产物单元)。Zymolyase®-100T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。

本品以冻干粉形式提供,酶比活力为100,000 units/g,适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。

产品规格

来源 藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)
外观 冻干粉
纯化方式 亲和色谱纯化
比活力 100,000 units/g
必需酶 β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶
含有的其他活性酶* β-1,3-葡聚糖酶 约1.0 x 107units/g
蛋白酶 约1.7 x 104units/g
甘露聚糖酶 约6.0 x 104units/g
污染酶 淀粉酶,木聚糖酶,磷酸酶 未检测到
最佳pH和温度 pH7.5, 35°C(裂解活酵母细胞);pH6.5, 45°C(水解酵母葡聚糖)
稳定pH范围 pH 5-10
热稳定性 60°C,5min酶活性完全损失
激活剂 巯基化合物比如半胱氨酸,β-巯基乙醇或DTT
特异性(溶解范围) Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula,

Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia,

Pullularia, Torulopsis,Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc.

[*]:参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。

活力测定

1. 单位定义:在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位(unit)。

2. 反应体系

底物                  3ml 啤酒酵母细胞悬液(2mg干重/ml)
缓冲溶液 5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5
酶溶液 1ml Zymolyase®-100T Solution: 0.012-0.024mg/ml
去离子水 1ml
总体积 10ml

3. 反应程序

25°C孵育2h后轻轻混匀体系,于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。

4. 计算酶活力

A800降低百分比=(对照组A800-反应组A800)×100/对照组起始A800

当A800吸光度减少60%,相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解,意味着1 unit Zymolyase®-100T能裂解3mg干重啤酒酵母。

保存与运输方法

保存:2-8℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. Zymolyase®-100T冻干粉置于30℃,3个月酶活力损失约90%。

2. 当需要制备无菌酶溶液,可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。

3. Zymolyase®-100T的溶解性很差,因此以悬浮液的形式使用。如果使用浓度高于0.5mg/ml的无菌酶溶液,用含50mg/ml葡萄糖的缓冲液(pH7.5)配置20mg/ml Zymolyase®-100T溶液,去除不容物质,用滤膜过滤除菌,之后用合适的缓冲液稀释到需要的浓度。具体的工作浓度可参考文献资料,自身实验目的,反应体系等来调整。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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