wako 197-17831 StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

用于人iPS细胞冻存

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

StemSure® hPSC 冻存液,AF

 

 

StemSure® hPSC 冻存液,AF 是无动物源成分的人 iPS 细胞用冻存液。本品含 DMSO。

 

◆特点

 

● 能以高细胞存活率冻存人 iPS 细胞

● 不含动物源成分

● 可以以缓慢冻结的方式进行冻存

● 可用于无饲养层培养的细胞

● 无需进行繁杂的试剂配制

● 无需程序降温

 

 StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

 

 

◆人 iPS 细胞冻存步骤

 

 1. 在除去人 iPS 细胞培养皿中的培养液,用 D-PBS(-)清洗后,用 Accutase 等分散细胞。

 2. 添加含有 10 µmol/L Y-27632 的人 iPS 细胞用培养基(hPSC 培养基(+ROCKi)),用移液器吹散成单细胞。

 3. 将吹打分散后的细胞悬浮液移至样本管中,离心(1,000 rpm,3分钟,室温)后,除去上清液。

 4. 添加 hPSC 培养基(+ROCKi),用移液器悬浮。

 5. 计算细胞数,将样本管离心(1,000 rpm,3分钟,室温)后,除去上清液。

 6. 利用本产品使细胞悬浮成 2×10cells/mL,并以 500 µL/管进行分装。

 7. 在 -80°C 下冷冻后,在 -150°C 或者 -80°C 的条件下保存(长期保存建议保存在 -150°C)。

 1. 添加 hPSC 培养基(+ROCKi)到冻存瓶中,复苏冷冻细胞。
(使用温水浴复苏冷冻细胞的情况下,只需要半溶解)

 2. 离心(室温下,1,000 rpm,3分钟)后,除去上清液,添加 hPSC 培养基(+ROCKi),使细胞悬浮。

 3. 计算细胞数,以 2×10cells/6 cm dish的条件接种

◆人iPS细胞201B7株的冻存

 

确认细胞存活率和细胞增殖率

 

将培养中的人 iPS 细胞 201B7 株分散成单细胞后,重悬于 StemSure® hPSC 冻存液,AF 中,在 -80°C下冻存2~4天。

确认冷冻复苏后的细胞存活率和细胞增殖率。反复冷冻复苏5次后,确认细胞、细胞集落的形态和各种未分化标记(Oct3/4、Nanog、BC2LCN)的表达。

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

确认细胞集落的形态

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

 

 

确认细胞存活率和细胞增殖率

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

结果表明,用 StemSure® hPSC 冻存液,AF 冻存的人 iPS 细胞显示出高细胞存活率和细胞增殖率。

另外还确认了各种未分化标记的表达。

 

 

◆人iPS细胞冻存步骤

 

使用用 StemSure® hPSC 冻存液,AF 冷冻复苏5次后的 iPS 细胞 201B7 株,形成胚叶体,βⅢ-Tubulin,α-SMA,AFP 的表达确认其分化成了三胚叶。

(胚叶体形成,三胚叶分化诱导时的培养基组成)

Stemsure D-MEM+SSR+2mol/L L-Glutamine+10mmol/L2-Mercaptoethanol +1×Non-essential Amino Acids Solution

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

测试项目:外观,应用试验(iPS 细胞 201B7株),无菌试验,内毒素,支原体测试

 

 

 

可用于ES干细胞的冻存液,请点击:StemSure细胞冻存液

通用动物细胞冻存液,请点击:CultureSure无血清细胞冻存液


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
197-17831 StemSure® hPSC Freezing Medium, AF
StemSure® hPSC冻存液,AF
100 mL 细胞培养用

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