388-18721 GenomONE ® 仙台病毒包膜细胞融合试剂

GenomONE®-CF EX 含有仙台病毒包膜和专用缓冲液,可促使细胞融合。

适用于贴壁/悬浮状态的所有细胞,仅需 30 min,即可制备融合细胞和杂交瘤。

◆用途

 

● 制备杂交瘤

● 应用于癌细胞与树状细胞融合的癌症免疫研究

● 应用于内脏来源细胞与干细胞融合的再生医疗研究

● 应用于去核未受精卵的核移植等的发育、繁殖和育种研究

● 替代电融合法、PEG 法

◆HVJ Envelope(HVJ-E):

 

HVJ 包膜(HVJ-E)是完全灭活和纯化仙台病毒(HVJ*),即只留下细胞膜融合能力的衣壳蛋白包膜。仙台病毒的HN蛋白可与细胞膜外的唾液酸受体结合,通过F蛋白的作用,引起细胞膜融合。在 HVJ-E 中,仙台病毒的基因组 RNA 已经完全失活,在人类和实验动物体内不存在感染或增殖。因而不需要特殊的操作和设备,它可以安全地在普通的实验室使用。

*HVJ:日本仙台病毒

 

◆HVJ-E 细胞融合原理

 

在低温(0 – 8℃)条件下,每一个细胞与数百个以上的 HVJ – E 接触,HVJ – E 与细胞膜上的唾液酸受体结合,通过细胞表面吸附(步骤1),细胞通过 HVJ-E 相互连接(步骤2),形成细胞彼此聚集的状态。当该细胞/HVJ-E 的复合物加热到 37℃ 时,细胞膜干扰就会进一步扩大,细胞膜内膜结构也暂时改变。这种变化是短暂的,随后会立即返回到正常结构,但是在这个期间,细胞膜利用强疏水性结合力进行相互融合(步骤3)。

安全性说明

 

HVJ-E 失活的确认(确认无感染性病毒的存在)

 

1.
细胞增值实验(荧光灶单元(FFU)法)

处理 LLC-MK2 细胞,一到两天后,病毒生长性的 HVJ 融合蛋白F抗体通过荧光抗体法测定,已证实未检测到病毒蛋白。<制造阶段实验>

2.
受精卵生长试验(血凝单位测定)

处理受精卵,3天后的病毒增殖,包括在 HVJ 表面的 HN 蛋白的红血细胞聚合活性(HAU)测量作为指标,已经证实,没有看到病毒的生长。<制造阶段实验>

3.
小鼠感染性研究

鼻腔给药小鼠和未处理小鼠(SIX周)在相同笼中饲养,通过测定血清中的抗 HVJ 抗体滴度进行了个体之间感染性的检测。其结果是,在非给药的情况下未观察到抗体滴度增加,表明未感染 HVJ-E。

4.
动物个体的遗传基因导入实验

小鼠、大鼠等实验动物的各种药物实验(肺、气管、肝和静脉等)。已证实完全没有病毒感染或是可疑的事例。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
388-18721  GenomONE ® – CF EX SeV-E (HVJ-E) 1 vial Cell Fusion Reagents
GenomONE ® – CF EX 仙台病毒包膜(1只装)细胞融合试剂  1 set - -
384-18723  GenomONE ® – CF EX SeV-E (HVJ-E) 1 vial Cell Fusion Reagents
GenomONE ® – CF EX 仙台病毒包膜(1只装)细胞融合试剂  4 sets
382-18724  GenomONE ® – CF EX SeV-E (HVJ-E) 1 vial Cell Fusion Reagents
GenomONE ® – CF EX 仙台病毒包膜(1只装)细胞融合试剂  16 sets