KAPA 血液直接扩增试剂盒 – 直扩、快提

KAPA 血液直接扩增试剂盒

产品描述

• 直接用人的血液、动/植物组织进行目的基因扩增,无需经过DNA提取,简化繁琐的实验步骤、节省试剂和人力!

  • 样本经过简单的加温处理,可在20-30分钟内获得用于扩增的DNA,加快实验速度!

  KAPA血液直接扩增试剂盒

KAPA血液PCR试剂盒包含一种通过分子进化过程得到的新一代酶,是第一种专门为全血DNA直接扩增设计的DNA聚合酶。该试剂盒包括两种2xMasterMix,包含除引物和模板外所有PCR反应所需成份。KAPA血液PCR试剂盒可直接从含有1-20%WM)全中的反应体系中直接扩增目的DNA片段,大大降低了样本污染风险,縮短时间,节约支出。

该款试剂盒包含:(1 ) Kapa Blood PCR Mix A、(2 ) Kapa BloodPCR Mix B两种。其中Mix A主要用于高灵敏度荧光检测系统(如PowerPlex 16 System, Promega亲子鉴定、 STR分型)↓Mix B主要用于GC含量高的扩增体系,扩增结果通过琼脂糖凝胶电泳和EB染色进行
分析。二者的产物可用于限制性酶切、DNA测序、dHPLC分析。

  1、优点

  (1)从新鲜血液、4℃保存2年以上EDTA抗凝的全血、FTA®Elute卡、Whatman903样本收集纸(“Guthrie卡”)或常规滤纸血片中直接扩增目的DNA。

  (2)无需DNA提取,降低污染风险,缩短时间与节约成本。

  (3)与现有的操作流程、实验步骤、常规检测手段兼容。

  2、用途

  (1)人类、其他哺乳动物和鸟类基因分析;

  (2)GC含量<65%,扩增长度3.5kb;GC含量>65%,扩增长度1kb;

  (3)可用于常规检测;限制性酶切、琼脂糖凝胶电泳/EB染色、荧光毛细管电泳、DNA测序或dHPLC分析;

  (4)特别适合PowerPlex16 System(Promega)进行亲子鉴定;

  (5)SNP分析(限制性酶切法)。

  3、全血直接扩增

  目前的Taq酶无法做到直接从全血中扩增目的DNA片段,主要无法克服血中抑制因子对Taq酶的干扰抑制。KAPA血液DNA聚合酶经过血液抑制剂处理进化,可以从血液中直接扩增目的DNA片段,无需经过预处理或DNA提取。

KAPA 血液直接扩增试剂盒 - 直扩、快提 -

  4、亲自鉴定、微卫星(STR)分析

KAPA 血液直接扩增试剂盒 - 直扩、快提 -

  5、全血限制性酶切分析

KAPA 血液直接扩增试剂盒 - 直扩、快提 -

  6、其他物种的实验

  该试剂盒亦可用于其他非人类的物种,如哺乳动物、鸟类、还可以用于兽医PCR检测。其他物种的血液收集方式与人类的相同。不同的物种的用血量要根据经验来调整。例如,小鼠的用血量远远低于,0.1-5%v/v即可。鸟类血液中含“有核细胞”,所以应通过预实验,将鸟血应稀释成含有接近人类DNA量的浓度。

KAPA 血液直接扩增试剂盒 - 直扩、快提 -

  7、反应参数

  1)推荐反应条件:

KAPA 血液直接扩增试剂盒 - 直扩、快提 -

  2)充分混合反应体系,稍离心使试剂成份落到管子底部,开始反应;

KAPA 血液直接扩增试剂盒 - 直扩、快提 -

注意事项:

  1)GC含量<65%,扩增长度3.5kb;GC含量>65%,扩增长度≤1k,同时要加入5%DMSO;扩增长片段,加入0.1%(v/v)吐温20效果更佳;

2)本试剂盒仅适用于EDTA抗凝血,其他如肝素钠、柠檬酸、ACD等抗凝素效果不佳;其他样品如口腔拭子、羊水也有不错实验结果报道;

3)人类:反应体系中含有1-20%v/v血,非人类其他物种用血量要通过试验确定,含“有核细胞”的血(如鸟血)要经过稀释,直到达到人类血液DNA浓度为止;

4)PCR产物分析之前,14000-17000g,5min,离心PCR产物,弃掉沉淀颗粒;

5)限制性酶切、DNA测序、dHPLC分析之前,用试剂盒纯化PCR产物;

6)用本试剂盒可直接扩增出血液中病原体的基因片段,但不推荐用于疾病诊断;

7)该体系中的酶为非热启动酶,常温下有活性,尽量在冰上操作;

8)本试剂盒不适用于SYBR®Green法与Taq探针法荧光定量PCR检测。

  8、产品信息

货号 产品 规格
KK7002 KAPA Blood PCR Kit A
KAPA血液直接扩增试剂盒A
500 x 25μ1 rxns
KK7003 KAPA Blood PCR Kit B
KAPA血液直接扩增试剂盒B
500 x 25μl rxns
KK7004 KAPA Blood PCR Kit A
KAPA血液直接扩增试剂盒A
1000 x 25μl rxns
KK7005 KAPA Blood PCR Kit B
KAPA血液直接扩增试剂盒B
1000 x 25μl rxns