Wako 304-93521 Phos-tag Acrylamide(ALL-107)使用说明书
货号：300-93523; 304-93521; 304-93526
包装：2mg;10mg;0.3ml
英文名：Phos-tag Acrylamide
品牌：Wako
使用Phos-tag(TM) SDS-PAGE和Phos-tag Acrylamide分离磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白。
# 磷酸化蛋白亚型可以在同一电泳道分离出多条带
# 操作简便，与常规SDS-PAGE蛋白电泳相似
# Phos-tag™ 的结合特异性与氨基酸种类、序列无关
# Phos-tag™ SDS-PAGE实验后，可进行常规的免疫组化、质谱等
# 性质稳定，溶于蒸馏水后可以稳定保存至少3个月
# 磷酸化和非磷酸化蛋白可以同时被分离检测
# 不同位点磷酸化修饰以及磷酸化程度不同的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来
【使用Phos-tag™ SDS-PAGE的磷酸化/非磷酸化蛋白比较】
我推荐使用Phos-tag ™ ——东京大学研究院医学研究科 小川觉之
Phos-tag ™ 是专为研究磷酸化蛋白而新开发出来的试剂。此产品使用方便，不但可用于体外实验，还能定量分析体内蛋白的磷酸化水平。Phos-tag ™ SDS-PAGE 可用于常规电泳实验，无需购买特殊设备，性价比高。传统蛋白磷酸化的研究需要特异的磷酸化抗体、RI 等其它试剂，操作复杂，花费大，且放射性元素会有安全隐患，而 Phos-tag ™ 的出现恰恰可以弥补这些缺点，为磷酸化蛋白研究提供新的方向。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白利用Phos-tag ™ SDS-PAGE 的分离效果图
Lane 1 为非磷酸化蛋白，Lane 2-5 为磷酸化蛋白，各蛋白因磷酸化状态不同而条带迁移率也有所不同。
磷酸化/ 非磷酸化蛋白的数量比、磷酸化程度、磷酸化蛋白的丰度等都可根据条带迁移和条带浓度求得。
【资料提供】
日本东京大学研究生院医学系研究科
【二维电泳中的应用：分析 hnRNP K 磷酸化异构体】
小鼠巨噬细胞 J774.1 经 LPS 刺激后，裂解细胞，经过免疫沉淀法分离得到 hnRNP K 。在二维电泳中，一维是IPG 胶，二维是 Phos-tag ™ SDS-PAGE，可分离 hnRNP K 的异构体。利用质谱仪，可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
二维电泳
同一个等电点的位置上，不同位点发生磷酸化都可以被区分开来（例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7）
【参考文献】
Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics , Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生（Dr. Y. Kimura）、平野久（Dr. H. Hirano）理化学研究所 RCAI 小原收
【EGF 刺激前后MAPK 磷酸化水平的变化】
常规 SDS-PAGE 和Phos-tagTM SDS-PAGE 后迚行克疫印迹实验分析 EGF 刺激的 A431 细胞中 MAPK 磷酸化水平。
摘自 Kinoshita-Kikuta, E. et al., Mol.Cell. Proteomics. (2007)6: 356.
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 304-93526 | Phos-tag Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution Phos-tag 丙烯酰胺5mM水溶液 |
0.3 mL | 蛋白研究 |
| 300-93523 | Phos-tag Acrylamide AAL-107 Phos-tag 丙烯酰胺 |
2 mg | 蛋白研究 |
| 304-93521 | Phos-tag Acrylamide AAL-107 Phos-tag 丙烯酰胺 |
10 mg | 蛋白研究 |
| 134-15302 | Manganese(II) Chloride Tetrahydrate氯化锰四水合物 | 25 g | for Molecular Biology |
加入Phos-tagTM的预制胶，打开包装即可使用。含有锌作为补充金属。中性胶缓冲液保证了储存的稳定性。
板尺寸：100*100*3（mm）
胶尺寸：90*85*1（mm）
孔数：13孔
上样量：30ul
# 相比使用Phos-tag™ 自己手动制胶，分离效果更好，稳定性更高
Wako 304-93521 Phos-tag Acrylamide(ALL-107)使用说明 产品订购信息：
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货号
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产品名称
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使用浓度
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20uM
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50uM
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100uM
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304-93526
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Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107 5mM水溶液 |
约10块
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约4块
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约2块
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300-93523
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Phos-tag™ Acrylamide AAL-107
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107 |
约20块
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约8块
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约4块
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304-93521
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约100块
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约40块
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约20块
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| 品名 | 货号 | 包装 | 用途 |
| Phos-tag（TM） Acrylamide AAL-107 | 300-93523 | 2mg | 按磷酸化程度不同特异性分离磷酸化蛋白 |
| 304-93521 | 10mg | ||
| Phos-tag™ Acrylamide 5mM Aqeuous Solution | 304-93526 | 0.3ml |