Oxoid SR0060C MYCOPLASMA SUPPLEMENT P 支原体添加剂P

Oxoid SR0060C MYCOPLASMA SUPPLEMENT P 支原体添加剂P

Oxoid中国代理

SR0060C MYCOPLASMA SUPPLEMENT P 1 X 10 VIALS

Oxoid 支原体琼脂CM0401B 支原体肉汤CM0403B 支原体添加剂SR0059C SR0060C
品牌:Oxoid
产品:用于选择性分离培养支原体
支原体琼脂基础 CM0401B
支原体肉汤基础 CM0403B,新货号CM1166B
支原体添加剂G SR0059C
支原体添加剂P SR0060G

肺炎支原体双向培养基(Mycoplasma pneumoniae Bi-phasic Medium)

用于选择性分离肺炎支原体

货号 产品描述 规格 可配制培养基 公开价
CM0401B 支原体琼脂基础
Mycoplasma Agar Base
500g 14.1L 1490元
SR0060C 支原体添加剂P
Mycoplasma Supplement P
每瓶溶解至20ml,可配成10份的双向培养基
10小瓶 每小瓶配10份 1762元

支原体添加剂P SR0060C

配方表:

 成分  含量
 马血清  6.0ml
 酵母粉(25% w/v)  3.0ml
 乙酸亚铊  0.008g
 葡萄糖  0.3
 酚红  0.0012g
 氯化亚甲基蓝  0.0003g
 青霉素  12000IU
 支原体肉汤基础CM0403  0.145g

配制方法:

往每瓶SR0060C中加入20ml无菌蒸馏水,混匀溶解。往10个小瓶中每个加入1ml的支原体琼脂基础,121℃灭菌15分钟。在上述10小瓶培养基中分别加入2ml溶解后的支原体添加剂P,即SR0060C。

产品描述:

Oxoid支原体琼脂基础是一种基础培养基,加入合适的添加剂后,可以用来培养支原体。

Edward强调过在基础培养基中加入有毒物质的重要性,Lynn & Morton对加入琼脂培养基中的抑制剂也给予了特殊的重视。Oxoid的支原体培养基基础不用含有有毒物质和抑制剂,可以选择性地添加它们,同时它含有的矿物质优化了菌落的生长性能,同时也不会干扰培养基的澄清度。

Hayflick建议在培养基中加入10% v/v的25% w/v的面包酵母提取物,Lemcke则用Oxoid酵母粉LP0021加入。大部分的支原体需要富含血清的培养基,常用的是马血清(20% v/v),猪或人血清可以替代马血清,但是人血清里面的抗体和抗生素会对培养基产生重要的影响。Edward建议将DNA加入培养基可以促进牛支原体和其他支原体的生长,在每升培养基中加入20mg脱氧核糖核酸钠(引述自Lemcke)。

为了阻止污染微生物阻碍生长较慢的支原体的生长,抗菌物质必须加入到培养基中。青霉素和乙酸亚铊是最常用的试剂,但是T-strain支原体对乙酸亚铊敏感。Hutchinson和 Fallon 报道说在培养基中加入1mg/ml的氨苄西林可以替代青霉素和乙酸亚铊。青霉素的添加量应该在50-500 units/ml,乙酸亚铊的添加量应该在1/2000到1/8000之间。如果要做T-Strain支原体的研究,就去除乙酸亚铊。

两种添加剂,支原体添加剂G SR0059和支原体添加剂P SR0060,可以优化支原体的生长情况。支原体添加剂G SR0059是一种一般的添加剂,由Hayflick的配方而来, 当加入到Oxoid支原体肉汤基础或者支原体琼脂基础后,就组成完全选择性培养基,促进需要甾醇的支原体的生长。

支原体添加剂P是一种液体添加剂,由Mycoplasma Reference Laboratory, CPHLS, Colindale报道的配方而来,与Oxoid支原体琼脂基础一起使用,组成双向培养基,用来分离和初步鉴定肺炎支原体。

许多种的支原体是需氧菌或兼性厌氧菌,但有些支原体喜欢微需氧条件(通过加入二氧化碳),或者喜欢严格厌氧。

致病性支原体菌株在35℃下生长最好,腐生菌株经常在22-30℃下生长,T-支原体的最佳生长温度是36℃.支原体属在pH 7.4-8.0生长最好,但是T-支原体最适在pH 6.0-6.5.

技术要点:

琼脂平板

使用Oxoid的支原体琼脂基础CM0041和添加剂SR0059制备好支原体琼脂平板(常用55mm平板)以培养样品。平板可在湿润的需氧环境,厌氧环境和 10% CO2-90% N2环境中培养。在培养7天后,用60倍的显微镜查看琼脂表面,并使用倾斜透射光。菌落特制是菌落表面中心会陷入,给人一种“煎鸡蛋”的外观形态。在进行鉴定之前有必要使用再培养对菌株进行纯化。

双向培养基

双向培养基由1ml的支原体琼脂基础和2ml 支原体添加剂P组成,双向培养基瓶可以与拭子或一小片痰一起35℃下培养最多3个月,任何由于真菌或者细菌的生长导致浑浊的培养基都必须被丢弃。

肺炎支原体的生长会发酵葡萄糖产酸,使亚甲基蓝还原,并且使酚红指示剂变黄色。出现这种颜色变化的培养基需要在琼脂培养基上进一步培养,可以用CM0401加SR0059C。

注意事项:

必须采取有效措施预防乙酸亚铊中毒
不要使用醋酸铊培养基分离解脲支原体;
以下情况下可确证是否为支原体结果:
(1) 具有典型的形态
(2) 无血清介质中无菌落生长
(3) 菌落嵌入琼脂表面

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