TMB One Solution (HRP-based ELISA) 单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)


描述

TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

产品标签

TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO:64285-73-0;

产品信息

产品名称    

产品编号       规格      价格(元) 

TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

MM2001-100ML

100ml

210.00

MM2001-500ML 500ml

735.00

产品描述

酶联免疫分析技术(ELISA)广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析,辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶,能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺(TMB)发生显色反应,从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用,TMB主要用于ELISA,免疫斑点杂交或免疫组化等实验,也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术,将所有相关试剂全部配在一个溶液,即仅由单一溶液组成,不仅简化了操作步骤,而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为ELISA实验而设计。检测原理在于HRP或其他适当过氧化物酶能催化生成可溶的蓝色产物,此时通常可在370nm测定吸光度。当显色反应被酸性溶液(如0.5-2M H2SO4,0.5M HCl,1M H3PO4)终止后,产物由蓝色转为黄色,此时可在450nm测定吸光度。由于本品显色敏感度高,线性浓度范围较宽,极其适合用于定量ELISA分析。

本品用于ELISA检测,每个样品通常使用0.1ml显色液,则100ml本品约检测1000个样品,500ml本品约检测5000个样品。

保存与运输方法

保存:2-8℃避光保存,2年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 本品含TMB和H2O2,对人体有刺激性,请注意防护。

2) 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色,请停止使用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(ELISA)

1) 使用之前,取出适量单组份TMB显色液,使其回到室温再开始使用;

2) 参考ELISA检测试剂盒的实验步骤,当与HRP标记抗体孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5min。

3) 洗涤完毕后,去除洗涤液,加入100μl单组份TMB显色液。

4) 室温避光孵育5-30min或更长时间(可长达24h),直至显色到预期深浅。【注意】:建议根据实验需求选择最佳试剂用量、显色时间和反应温度。

5) 直接在370nm测定吸光度。或者加入100μl 0.5-2M H2SO4终止反应,随后在450nm测定吸光度。

常用问题

1. 背景显色太深

1)如果背景(没有样品的对照)显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,使用经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。

2)可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1)适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否被正常显色。

2)可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如生物素检测体系。

3)可以适当延长显色时间。

4)如果上述改进不能获得预期效果,可以考虑更换效果更好的一抗或ELISA试剂盒。

相关产品

产品名称    

产品编号     

规格            

价格(元)  

TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG

250mg

145

MM2006-1000MG

1g

345

TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML

100ml

220

MM0719-500ML 500ml

790

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

TMB One Solution (HRP-based ELISA) 单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)


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TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO:64285-73-0;

产品信息

产品名称                                                  

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TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

MM2001-100ML

100ml

210.00

MM2001-500ML 500ml

735.00

产品描述

酶联免疫分析技术(ELISA)广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析,辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶,能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺(TMB)发生显色反应,从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用,TMB主要用于ELISA,免疫斑点杂交或免疫组化等实验,也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术,将所有相关试剂全部配在一个溶液,即仅由单一溶液组成,不仅简化了操作步骤,而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为ELISA实验而设计。检测原理在于HRP或其他适当过氧化物酶能催化生成可溶的蓝色产物,此时通常可在370nm测定吸光度。当显色反应被酸性溶液(如0.5-2M H2SO4,0.5M HCl,1M H3PO4)终止后,产物由蓝色转为黄色,此时可在450nm测定吸光度。由于本品显色敏感度高,线性浓度范围较宽,极其适合用于定量ELISA分析。

本品用于ELISA检测,每个样品通常使用0.1ml显色液,则100ml本品约检测1000个样品,500ml本品约检测5000个样品。

保存与运输方法

保存:2-8℃避光保存,2年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 本品含TMB和H2O2,对人体有刺激性,请注意防护。

2) 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色,请停止使用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(ELISA)

1) 使用之前,取出适量单组份TMB显色液,使其回到室温再开始使用;

2) 参考ELISA检测试剂盒的实验步骤,当与HRP标记抗体孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5min。

3) 洗涤完毕后,去除洗涤液,加入100μl单组份TMB显色液。

4) 室温避光孵育5-30min或更长时间(可长达24h),直至显色到预期深浅。【注意】:建议根据实验需求选择最佳试剂用量、显色时间和反应温度。

5) 直接在370nm测定吸光度。或者加入100μl 0.5-2M H2SO4终止反应,随后在450nm测定吸光度。

常用问题

1. 背景显色太深

1)如果背景(没有样品的对照)显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,使用经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。

2)可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1)适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否被正常显色。

2)可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如生物素检测体系。

3)可以适当延长显色时间。

4)如果上述改进不能获得预期效果,可以考虑更换效果更好的一抗或ELISA试剂盒。

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产品名称    

产品编号     

规格            

价格(元)  

TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG

250mg

145

MM2006-1000MG

1g

345

TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML

100ml

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TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)


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TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)

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TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO:64285-73-0;

产品信息

  产品名称                                                                 产品编号                  规格               价格(元)   
  TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)   MM2008-100ML   100ml   178
  TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)   MM2008-500ML   500ml   628

产品描述

ELISA测试中,由于酶和底物的反应在一定时间内能一直进行,若不及时终止反应,会影响实验结果数值。因此需要特定的终止液来结束反应。

TMB显色终止液根据检测光吸光值分两种,一种是450nm TMB终止液,一种是620nm TMB终止液。

本品是620nm TMB终止液。TMB在过氧化物酶的作用下被氧化生成可溶性的蓝色产物(最大光吸收值在620nm左右),加入本品能终止反应使得蓝色产物的颜色不改变,并且让最大光吸收值维持在620nm左右。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,2年有效。

运输:室温运输。

使用方法

ELISA检测,加入与TMB显色液,如单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)(货号:MM2001-100ML),等体积的TMB终止液即可。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

产品名称                                                                         产品编号                规格            价格(元)  
TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

 3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG 250mg 145
MM2006-1000MG 1g 345
TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML 100ml 220
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TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

MM2001-100ML 100ml 210.00
MM2001-500ML 500ml 735.00
TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-100ML 100ml 188
TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-500ML 500ml 648
TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-100ML 100ml 178
TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-500ML 500ml 628

 

 

 

TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)


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TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)

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  产品名称                                                                 产品编号                  规格               价格(元)   
  TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)   MM2008-100ML   100ml   178
  TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm)   MM2008-500ML   500ml   628

产品描述

ELISA测试中,由于酶和底物的反应在一定时间内能一直进行,若不及时终止反应,会影响实验结果数值。因此需要特定的终止液来结束反应。

TMB显色终止液根据检测光吸光值分两种,一种是450nm TMB终止液,一种是620nm TMB终止液。

本品是620nm TMB终止液。TMB在过氧化物酶的作用下被氧化生成可溶性的蓝色产物(最大光吸收值在620nm左右),加入本品能终止反应使得蓝色产物的颜色不改变,并且让最大光吸收值维持在620nm左右。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,2年有效。

运输:室温运输。

使用方法

ELISA检测,加入与TMB显色液,如单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)(货号:MM2001-100ML),等体积的TMB终止液即可。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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产品名称                                                                         产品编号                规格            价格(元)  
TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

 3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG 250mg 145
MM2006-1000MG 1g 345
TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML 100ml 220
MM0719-500ML 500ml 790
TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

MM2001-100ML 100ml 210.00
MM2001-500ML 500ml 735.00
TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-100ML 100ml 188
TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-500ML 500ml 648
TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-100ML 100ml 178
TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-500ML 500ml 628

 

 

 

TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm)


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TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO: 64285-73-0;

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  产品名称                                                                产品编号                 规格              价格(元)  
  TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm)   MM2007-100ML   100ml   188
  TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm)   MM2007-500ML   500ml   648

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ELISA测试中,由于酶和底物的反应在一定时间内能一直进行,若不及时终止反应,会影响实验结果数值。因此需要特定的终止液来结束反应。

TMB显色终止液根据检测光吸光值分两种,一种是450nm TMB终止液,一种是620nm TMB终止液。

本品是450nm TMB终止液,是一种酸性溶液。TMB在过氧化物酶的作用下被氧化生成可溶性的蓝色产物(最大光吸收值在620nm左右),该产物在本终止液的作用下变为可溶性的黄色产物(最大光吸收值在450nm)。该终止液能防止黄色产物形成黑色沉淀,并且维持光吸收值在2h内不变。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,2年有效。

运输:室温运输。

使用方法

ELISA检测,加入与TMB显色液,如单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)(货号:MM2001-100ML),等体积的TMB终止液即可。

相关产品

 产品名称                                                                         产品编号                规格            价格(元)  
 TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

 3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG 250mg 145
MM2006-1000MG 1g 345
 TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML 100ml 220
MM0719-500ML 500ml 790
 TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

MM2001-100ML 100ml 210.00
MM2001-500ML 500ml 735.00
 TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-100ML 100ml 188
 TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-500ML 500ml 648
 TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-100ML 100ml 178
 TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-500ML 500ml 628

 

 

 

TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm)


描述

TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm)

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TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO: 64285-73-0;

产品信息

  产品名称                                                                产品编号                 规格              价格(元)  
  TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm)   MM2007-100ML   100ml   188
  TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm)   MM2007-500ML   500ml   648

产品描述

ELISA测试中,由于酶和底物的反应在一定时间内能一直进行,若不及时终止反应,会影响实验结果数值。因此需要特定的终止液来结束反应。

TMB显色终止液根据检测光吸光值分两种,一种是450nm TMB终止液,一种是620nm TMB终止液。

本品是450nm TMB终止液,是一种酸性溶液。TMB在过氧化物酶的作用下被氧化生成可溶性的蓝色产物(最大光吸收值在620nm左右),该产物在本终止液的作用下变为可溶性的黄色产物(最大光吸收值在450nm)。该终止液能防止黄色产物形成黑色沉淀,并且维持光吸收值在2h内不变。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,2年有效。

运输:室温运输。

使用方法

ELISA检测,加入与TMB显色液,如单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)(货号:MM2001-100ML),等体积的TMB终止液即可。

相关产品

 产品名称                                                                         产品编号                规格            价格(元)  
 TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

 3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG 250mg 145
MM2006-1000MG 1g 345
 TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML 100ml 220
MM0719-500ML 500ml 790
 TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

MM2001-100ML 100ml 210.00
MM2001-500ML 500ml 735.00
 TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-100ML 100ml 188
 TMB Stop Solution (450nm) TMB终止液(450nm) MM2007-500ML 500ml 648
 TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-100ML 100ml 178
 TMB Stop Solution (620nm) TMB终止液(620nm) MM2008-500ML 500ml 628

 

 

 

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TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

产品标签

TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO:64285-73-0;

产品信息

  产品名称                                                   产品编号               规格             价格(元)  
  TMB One Solution (HRP-based Blotting)

  单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML 100ml 220
MM0719-500ML 500ml 790

产品描述

酶联免疫分析技术(ELISA)广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析,辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶,能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺(TMB)发生显色反应,从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用,TMB主要用于ELISA,免疫斑点杂交或免疫组化等实验,也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术,将所有相关试剂全部配在一个溶液,即仅由单一溶液组成,不仅简化了操作步骤,而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为免疫印迹实验而设计,其在反应位点处产生紫色不可溶物,背景很少或几乎无背景,用水可终止显色反应。适合用于膜印迹免疫实验,包括WB,斑点杂交,Southern Blot和Northern Blot等HRP的膜显色检测。

保存与运输方法

保存:2-8℃避光保存,2年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)  本品含TMB和H2O2,对人体有刺激性,请注意防护。

2)  如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色,请停止使用。

3)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(膜的HRP显色检测)

1)  使用之前,取出适量单组份TMB显色液,使其回到室温再开始使用;

2)  参考相应实验步骤,在与HRP标记的抗体孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5min。

3)  洗涤完毕后,去除洗涤液,滴加适量单组份TMB显色液充分覆盖膜。

4)  室温避光孵育5-30min或更长时间(可长达数小时),直至显色到预期深浅。【注意】:建议根据实验需求选择显色时间。

5)  直接拍照记录。

 

常用问题

1. 背景显色太深

1)如果背景(没有样品的对照)显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,使用经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。

2)可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1)适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否被正常显色。

2)可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如生物素检测体系。

3)可以适当延长显色时间。

4)如果上述改进不能获得预期效果,对于WB,可以考虑更换效果更好的一抗;对于Southern、Northern Blot等可考虑更换探针。

 

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产品名称                                                                       产品编号                    规格             价格(元)  
TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

 3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG 250mg 145
MM2006-1000MG 1g 345
TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)

MM2001-100ML 100ml 210
MM2001-500ML 500ml 735

 

 

 

TMB One Solution (HRP-based Blotting) 单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)


描述

TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

产品标签

TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO:64285-73-0;

产品信息

  产品名称                                                   产品编号               规格             价格(元)  
  TMB One Solution (HRP-based Blotting)

  单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)

MM0719-100ML 100ml 220
MM0719-500ML 500ml 790

产品描述

酶联免疫分析技术(ELISA)广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析,辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶,能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺(TMB)发生显色反应,从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用,TMB主要用于ELISA,免疫斑点杂交或免疫组化等实验,也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术,将所有相关试剂全部配在一个溶液,即仅由单一溶液组成,不仅简化了操作步骤,而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为免疫印迹实验而设计,其在反应位点处产生紫色不可溶物,背景很少或几乎无背景,用水可终止显色反应。适合用于膜印迹免疫实验,包括WB,斑点杂交,Southern Blot和Northern Blot等HRP的膜显色检测。

保存与运输方法

保存:2-8℃避光保存,2年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)  本品含TMB和H2O2,对人体有刺激性,请注意防护。

2)  如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色,请停止使用。

3)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(膜的HRP显色检测)

1)  使用之前,取出适量单组份TMB显色液,使其回到室温再开始使用;

2)  参考相应实验步骤,在与HRP标记的抗体孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5min。

3)  洗涤完毕后,去除洗涤液,滴加适量单组份TMB显色液充分覆盖膜。

4)  室温避光孵育5-30min或更长时间(可长达数小时),直至显色到预期深浅。【注意】:建议根据实验需求选择显色时间。

5)  直接拍照记录。

 

常用问题

1. 背景显色太深

1)如果背景(没有样品的对照)显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,使用经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。

2)可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1)适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否被正常显色。

2)可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如生物素检测体系。

3)可以适当延长显色时间。

4)如果上述改进不能获得预期效果,对于WB,可以考虑更换效果更好的一抗;对于Southern、Northern Blot等可考虑更换探针。

 

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