CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(深红色)


描述

CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection

氧化应激检测用探针(深红色)

 

温馨提示:

见我司(金畔生物)整理的活性氧ROS荧光探针专题。

见我司(金畔生物)整理的CellROX Reagent, for oxidative stress detection氧化应激检测探针产品专题

 

搜索关键词:

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧;DCFH-DA;HPF羟苯基荧光素;Mitosox 线粒体超氧化物探针;Dihydroethidium (DHE) 二氢乙锭;ROSGreenTM H2O2Probe;Life (Molecular Probe);

 

订购信息:

产品名称

产品编号 规格 价格(元) 

CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection   

氧化应激检测用探针(深红色)

MX4816-50UL

50µl

1998

MX4816-100UL 2×50µl

3778

 

产品描述:

CellROX Deep Red Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光,一旦被活性氧物质(ROS)氧化后发明亮稳定的荧光,最大吸收/发射波长约~ 644/ 665nm(见图I.CellROX Deep Red氧化后的荧光光谱图)。其荧光信号主要定位在细胞质。CellROX Deep Red Reagent的深红色荧光信号与其他活细胞染料和GFP兼容,使其适用于多重荧光试验来测定各种细胞现象,包括与细胞毒性和细胞死亡的参数。不同于其它的ROS探针,比如H2DCFDA(MX4802-50MG),CellROX Deep Red Reagent的荧光信号经醛类固定后也能保留,使其相对于传统的ROS探针来说在应用和操作流程更加灵活。CellROX Deep Red Reagent与各种检测平台兼容,比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器(HCS)、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选(HTS)。还与各种台式仪器兼容,比如Attune™仪器。

图1. CellROX Deep Red Reagent氧化后的荧光光谱图

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供,浓度为2.5mM,操作简单,与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料(50µl)足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光保存,保持干燥,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

  1. 本品对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
  2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 需要自行准备的材料
    1. 细胞和培养基
    2. 生理盐缓冲液(PBS,pH 7.2-7.6)
    3. 【可选】固定剂(比如,溶于PBS的3.7%甲醛)
  1. 实验步骤

以下步骤专门为BPAE,HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发,优化后的染色工作浓度为5µM,但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验,建议设置浓度梯度,以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Deep RedReagent对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

    1. 用待测化合物或药物处理细胞,孵育一定时间。【注】:待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。
    2. 加CellROX Deep RedReagent到细胞内使其终浓度为5µM,37℃孵育30min。
    3. 去除培养基,用PBS清洗3次。
    4. 【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h内进行荧光信号检测。
    5. 【可选】此时可用NucBlue活细胞染料(一种细胞核复染剂)或其他复染剂如Hoechst 33342(CAT#:MX4204-10ML)对细胞染色。

应用示例

图II. CellROX Deep RedReagent测定牛肺动脉内皮细胞(BPAE)的氧化应激水平。在96孔板内接种BPAE细胞。之后用含维生素K3(100µM)或不含维生素K3的培养基37℃处理1h【在孵育的后30min时向某些对照和维生素K3处理孔内加入超氧化物清除剂MnTBAP(100µM)】。之后细胞用CellROX Deep RedReagent(5µM)和Hoechst 33342染色,将探针加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后,之后成像检测。

相关产品

货号 名称 规格            
MX4801-1KIT      Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit活性氧(ROS)检测试剂盒 100~500T
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA)活性氧(ROS)荧光探针 50mg
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MM0707-500ML 30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液(30%双氧水) 500ml
MS5603-50ML tert-Butyl hydroperoxide (TBHP) Solution 叔丁基过氧化氢溶液 50ml
MZ2401-100UL PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸(5mg/ml) 100μl
MX4455-1MG Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
MM0706-1G Luminol 鲁米诺 1g
MX4606-500UG Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg
MX4815-50UL CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(绿色)           50µl
MX4816-50UL CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(深红色) 50µl

 

 

 

——Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

 

CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(深红色)


描述

CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection

氧化应激检测用探针(深红色)

 

温馨提示:

见我司(金畔生物)整理的活性氧ROS荧光探针专题。

见我司(金畔生物)整理的CellROX Reagent, for oxidative stress detection氧化应激检测探针产品专题

 

搜索关键词:

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧;DCFH-DA;HPF羟苯基荧光素;Mitosox 线粒体超氧化物探针;Dihydroethidium (DHE) 二氢乙锭;ROSGreenTM H2O2Probe;Life (Molecular Probe);

 

订购信息:

产品名称

产品编号 规格 价格(元) 

CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection   

氧化应激检测用探针(深红色)

MX4816-50UL

50µl

1998

MX4816-100UL 2×50µl

3778

 

产品描述:

CellROX Deep Red Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光,一旦被活性氧物质(ROS)氧化后发明亮稳定的荧光,最大吸收/发射波长约~ 644/ 665nm(见图I.CellROX Deep Red氧化后的荧光光谱图)。其荧光信号主要定位在细胞质。CellROX Deep Red Reagent的深红色荧光信号与其他活细胞染料和GFP兼容,使其适用于多重荧光试验来测定各种细胞现象,包括与细胞毒性和细胞死亡的参数。不同于其它的ROS探针,比如H2DCFDA(MX4802-50MG),CellROX Deep Red Reagent的荧光信号经醛类固定后也能保留,使其相对于传统的ROS探针来说在应用和操作流程更加灵活。CellROX Deep Red Reagent与各种检测平台兼容,比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器(HCS)、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选(HTS)。还与各种台式仪器兼容,比如Attune™仪器。

图1. CellROX Deep Red Reagent氧化后的荧光光谱图

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供,浓度为2.5mM,操作简单,与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料(50µl)足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光保存,保持干燥,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

  1. 本品对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
  2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 需要自行准备的材料
    1. 细胞和培养基
    2. 生理盐缓冲液(PBS,pH 7.2-7.6)
    3. 【可选】固定剂(比如,溶于PBS的3.7%甲醛)
  1. 实验步骤

以下步骤专门为BPAE,HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发,优化后的染色工作浓度为5µM,但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验,建议设置浓度梯度,以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Deep RedReagent对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

    1. 用待测化合物或药物处理细胞,孵育一定时间。【注】:待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。
    2. 加CellROX Deep RedReagent到细胞内使其终浓度为5µM,37℃孵育30min。
    3. 去除培养基,用PBS清洗3次。
    4. 【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h内进行荧光信号检测。
    5. 【可选】此时可用NucBlue活细胞染料(一种细胞核复染剂)或其他复染剂如Hoechst 33342(CAT#:MX4204-10ML)对细胞染色。

应用示例

图II. CellROX Deep RedReagent测定牛肺动脉内皮细胞(BPAE)的氧化应激水平。在96孔板内接种BPAE细胞。之后用含维生素K3(100µM)或不含维生素K3的培养基37℃处理1h【在孵育的后30min时向某些对照和维生素K3处理孔内加入超氧化物清除剂MnTBAP(100µM)】。之后细胞用CellROX Deep RedReagent(5µM)和Hoechst 33342染色,将探针加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后,之后成像检测。

相关产品

货号 名称 规格            
MX4801-1KIT      Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit活性氧(ROS)检测试剂盒 100~500T
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA)活性氧(ROS)荧光探针 50mg
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MM0707-500ML 30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液(30%双氧水) 500ml
MS5603-50ML tert-Butyl hydroperoxide (TBHP) Solution 叔丁基过氧化氢溶液 50ml
MZ2401-100UL PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸(5mg/ml) 100μl
MX4455-1MG Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
MM0706-1G Luminol 鲁米诺 1g
MX4606-500UG Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg
MX4815-50UL CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(绿色)           50µl
MX4816-50UL CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(深红色) 50µl

 

 

 

——Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

 

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology 组织学用环保脱蜡透明液


描述

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology

组织学用环保脱蜡透明液

 

同义名:

Dewaxing Reagent;Deparaffinized Reagent;脱蜡剂;二甲苯无毒替代品;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)   

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液    

MM1601-500ML   500ml 130
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-5L 10×500ml      

950

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-10L 20×500ml

1550

产品描述

长期以来免疫组化石蜡切片脱蜡所用为二甲苯,但其是一种有害试剂,长期接触会对人身体健康造成伤害。本组织学用

环保脱蜡透明液(Dewaxing/Clearing Reagent for Histology)正是一种无毒环保的二甲苯替代物,是一种新合成的,专门为组织病理学和细胞学样品处理所开发的一款无色无味、挥发速率低,具有生物降解性的有机溶剂,不含苯,适用于病理组织脱水及染色过程,对生物组织的蛋白、核酸无影响,效果可媲美于二甲苯,使用步骤和二甲苯一致,无需做更改。对仪器也无腐蚀性。本品主要用于浸蜡组织样本处理及脱蜡、透明以及细胞学制片的透明。

保存与运输方法

保存:5-35℃密封保存,未开封包装3年有效;开封后6个月有效。

运输:室温运输。

使用方法(仅做参考)

1)   脱蜡:将所需脱蜡的石蜡切片浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行脱蜡,每缸中脱蜡5-15min(视切片厚薄调整),若需要时间较长,请更换新的脱蜡液。

2)   透明:①将脱水充分的组织块浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行透明,每缸中透明15-60min(视组织块大小调整);②将脱水充分的染色切片浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行透明,每缸中透明2-10min(视切片厚薄调整);

注意事项

1)   本品不具腐蚀性,不会易燃易爆,能放心用于半封闭和全封闭脱蜡、染色等仪器内。

2)   本品无色透明、无毒,挥发性低,对人体无伤害。

3)   本品适用于细胞学制片巴氏染色程序的透明,也适用于冰冻快速制片程序的透明,需根据实际情况缩短透明时间。

4)   本品的脱蜡和透明步骤不会对组织样本染色效果产生影响,也不会影响组织切片(细胞涂片)的保存。

5)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作示例一(组织切片的常规HE染色)

操作步骤 操作时间
1 环保脱蜡透明液脱蜡第一次 5~10min
2 环保脱蜡透明液脱蜡第二次 5~10min
3 无水乙醇 2~3min
4 95%乙醇 1~2min
5 80%乙醇 1~2min
6          水洗 1~2min
7 HE染色 此处省略
8 脱水 此处省略
9 环保脱蜡透明液透明第一次 2~5min
10 环保脱蜡透明液透明第二次 2~5min
11 封片 封固

操作示例二(组织块浸蜡)

操作步骤 操作时间
1            10%中性福尔马林固定第一次 2h
2 10%中性福尔马林固定第二次 2h
3 80%乙醇 45min
4 95%乙醇第一次 45min
5 95%乙醇第二次 45min
6 无水乙醇第一次 45min
7 无水乙醇第二次 45min
8 环保脱蜡透明液透明第一次 5~10min
9 环保脱蜡透明液透明第二次 5~10min
10 65℃浸蜡第一次 60min
11 65℃浸蜡第二次 60min
12 65℃浸蜡第三次 120~180min

相关产品

货号 名称 规格
MM1041-150ML Alcian Blue (pH 2.5) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒(pH2.5) 3×50ml
MM1042-150ML Alcian Blue (pH 1.0) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒(pH1.0) 3×50ml
MM1044-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液(0.1%) 100ml
MM1045-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液(0.2%) 100ml
MM1601-500ML Dewaxing/Clearing Reagent for Histology组织学用环保脱蜡透明液 500ml

 

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology 组织学用环保脱蜡透明液


描述

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology

组织学用环保脱蜡透明液

 

同义名:

Dewaxing Reagent;Deparaffinized Reagent;脱蜡剂;二甲苯无毒替代品;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)   

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液    

MM1601-500ML   500ml 130
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-5L 10×500ml      

950

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-10L 20×500ml

1550

产品描述

长期以来免疫组化石蜡切片脱蜡所用为二甲苯,但其是一种有害试剂,长期接触会对人身体健康造成伤害。本组织学用

环保脱蜡透明液(Dewaxing/Clearing Reagent for Histology)正是一种无毒环保的二甲苯替代物,是一种新合成的,专门为组织病理学和细胞学样品处理所开发的一款无色无味、挥发速率低,具有生物降解性的有机溶剂,不含苯,适用于病理组织脱水及染色过程,对生物组织的蛋白、核酸无影响,效果可媲美于二甲苯,使用步骤和二甲苯一致,无需做更改。对仪器也无腐蚀性。本品主要用于浸蜡组织样本处理及脱蜡、透明以及细胞学制片的透明。

保存与运输方法

保存:5-35℃密封保存,未开封包装3年有效;开封后6个月有效。

运输:室温运输。

使用方法(仅做参考)

1)   脱蜡:将所需脱蜡的石蜡切片浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行脱蜡,每缸中脱蜡5-15min(视切片厚薄调整),若需要时间较长,请更换新的脱蜡液。

2)   透明:①将脱水充分的组织块浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行透明,每缸中透明15-60min(视组织块大小调整);②将脱水充分的染色切片浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行透明,每缸中透明2-10min(视切片厚薄调整);

注意事项

1)   本品不具腐蚀性,不会易燃易爆,能放心用于半封闭和全封闭脱蜡、染色等仪器内。

2)   本品无色透明、无毒,挥发性低,对人体无伤害。

3)   本品适用于细胞学制片巴氏染色程序的透明,也适用于冰冻快速制片程序的透明,需根据实际情况缩短透明时间。

4)   本品的脱蜡和透明步骤不会对组织样本染色效果产生影响,也不会影响组织切片(细胞涂片)的保存。

5)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作示例一(组织切片的常规HE染色)

操作步骤 操作时间
1 环保脱蜡透明液脱蜡第一次 5~10min
2 环保脱蜡透明液脱蜡第二次 5~10min
3 无水乙醇 2~3min
4 95%乙醇 1~2min
5 80%乙醇 1~2min
6          水洗 1~2min
7 HE染色 此处省略
8 脱水 此处省略
9 环保脱蜡透明液透明第一次 2~5min
10 环保脱蜡透明液透明第二次 2~5min
11 封片 封固

操作示例二(组织块浸蜡)

操作步骤 操作时间
1            10%中性福尔马林固定第一次 2h
2 10%中性福尔马林固定第二次 2h
3 80%乙醇 45min
4 95%乙醇第一次 45min
5 95%乙醇第二次 45min
6 无水乙醇第一次 45min
7 无水乙醇第二次 45min
8 环保脱蜡透明液透明第一次 5~10min
9 环保脱蜡透明液透明第二次 5~10min
10 65℃浸蜡第一次 60min
11 65℃浸蜡第二次 60min
12 65℃浸蜡第三次 120~180min

相关产品

货号 名称 规格
MM1041-150ML Alcian Blue (pH 2.5) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒(pH2.5) 3×50ml
MM1042-150ML Alcian Blue (pH 1.0) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒(pH1.0) 3×50ml
MM1044-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液(0.1%) 100ml
MM1045-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液(0.2%) 100ml
MM1601-500ML Dewaxing/Clearing Reagent for Histology组织学用环保脱蜡透明液 500ml

 

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology 组织学用环保脱蜡透明液


描述

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology

组织学用环保脱蜡透明液

 

同义名:

Dewaxing Reagent;Deparaffinized Reagent;脱蜡剂;二甲苯无毒替代品;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)   

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液    

MM1601-500ML   500ml 130
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-5L 10×500ml      

950

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-10L 20×500ml

1550

产品描述

长期以来免疫组化石蜡切片脱蜡所用为二甲苯,但其是一种有害试剂,长期接触会对人身体健康造成伤害。本组织学用

环保脱蜡透明液(Dewaxing/Clearing Reagent for Histology)正是一种无毒环保的二甲苯替代物,是一种新合成的,专门为组织病理学和细胞学样品处理所开发的一款无色无味、挥发速率低,具有生物降解性的有机溶剂,不含苯,适用于病理组织脱水及染色过程,对生物组织的蛋白、核酸无影响,效果可媲美于二甲苯,使用步骤和二甲苯一致,无需做更改。对仪器也无腐蚀性。本品主要用于浸蜡组织样本处理及脱蜡、透明以及细胞学制片的透明。

保存与运输方法

保存:5-35℃密封保存,未开封包装3年有效;开封后6个月有效。

运输:室温运输。

使用方法(仅做参考)

1)   脱蜡:将所需脱蜡的石蜡切片浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行脱蜡,每缸中脱蜡5-15min(视切片厚薄调整),若需要时间较长,请更换新的脱蜡液。

2)   透明:①将脱水充分的组织块浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行透明,每缸中透明15-60min(视组织块大小调整);②将脱水充分的染色切片浸入本环保脱蜡透明液中,分两缸进行透明,每缸中透明2-10min(视切片厚薄调整);

注意事项

1)   本品不具腐蚀性,不会易燃易爆,能放心用于半封闭和全封闭脱蜡、染色等仪器内。

2)   本品无色透明、无毒,挥发性低,对人体无伤害。

3)   本品适用于细胞学制片巴氏染色程序的透明,也适用于冰冻快速制片程序的透明,需根据实际情况缩短透明时间。

4)   本品的脱蜡和透明步骤不会对组织样本染色效果产生影响,也不会影响组织切片(细胞涂片)的保存。

5)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作示例一(组织切片的常规HE染色)

操作步骤 操作时间
1 环保脱蜡透明液脱蜡第一次 5~10min
2 环保脱蜡透明液脱蜡第二次 5~10min
3 无水乙醇 2~3min
4 95%乙醇 1~2min
5 80%乙醇 1~2min
6          水洗 1~2min
7 HE染色 此处省略
8 脱水 此处省略
9 环保脱蜡透明液透明第一次 2~5min
10 环保脱蜡透明液透明第二次 2~5min
11 封片 封固

操作示例二(组织块浸蜡)

操作步骤 操作时间
1            10%中性福尔马林固定第一次 2h
2 10%中性福尔马林固定第二次 2h
3 80%乙醇 45min
4 95%乙醇第一次 45min
5 95%乙醇第二次 45min
6 无水乙醇第一次 45min
7 无水乙醇第二次 45min
8 环保脱蜡透明液透明第一次 5~10min
9 环保脱蜡透明液透明第二次 5~10min
10 65℃浸蜡第一次 60min
11 65℃浸蜡第二次 60min
12 65℃浸蜡第三次 120~180min

相关产品

货号 名称 规格
MM1041-150ML Alcian Blue (pH 2.5) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒(pH2.5) 3×50ml
MM1042-150ML Alcian Blue (pH 1.0) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒(pH1.0) 3×50ml
MM1044-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液(0.1%) 100ml
MM1045-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液(0.2%) 100ml
MM1601-500ML Dewaxing/Clearing Reagent for Histology组织学用环保脱蜡透明液 500ml

 

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(绿色)


描述

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection

氧化应激检测用探针(绿色)

 

温馨提示:

见我司整理的活性氧ROS荧光探针专题

见我司整理的CellROX Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测探针产品专题。

 

搜索关键词:

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧;DCFH-DA;HPF 羟苯基荧光素;Mitosox 线粒体超氧化物探针;Dihydroethidium (DHE)  二氢乙锭;ROSGreenTMH2O2Probe;Life (Molecular Probe) ;

 

订购信息:

产品名称 产品编号 规格               价格(元)   

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection     

氧化应激检测用探针(绿色)

MX4815-50UL         50µl 1988
MX4815-100UL 2×50µl 3778

 

产品描述:

CellROX Green Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光,一旦被活性氧物质(ROS)氧化并结合到DNA后发明亮稳定的绿色荧光,最大吸收/发射波长约~485/520 nm(见图I. CellROX Green氧化后的荧光光谱图)。其荧光信号主要定位在细胞核和线粒体。此染料能够被甲醛固定且能承受表面活性剂处理,因此,特别适合与其他兼容性染料和抗体进行多重标记检测。CellROX Green Reagent与各种检测平台兼容,比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器(HCS)、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选(HTS)。还与各种台式仪器兼容,比如FLoid™,Tali™,和Attune™仪器。

图1. CellROX Green氧化后的荧光光谱图

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供,浓度为2.5mM,操作简单,勿需清洗,与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料(50µl)足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光保存,保持干燥,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   本品对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.     需要自行准备的材料

1.1    细胞和培养基

1.2    生理盐缓冲液(PBS,pH 7.2-7.6)

1.3    【可选】固定剂(比如,溶于PBS的3.7%甲醛)

1.4    【可选】破膜剂(比如,0.5% Triton X-100)

2.     实验步骤

以下步骤专门为BPAE,HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发,优化后的染色工作浓度为5µM,但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验,建议设置浓度梯度,以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Green Reagent对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2.1    用待测化合物或药物处理细胞,孵育一定时间。【注】:待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。

2.2    加CellROX Green Reagent到细胞内使其终浓度为5µM,37℃孵育30min。

2.3    去除培养基,用PBS清洗3次。

2.4    【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Green Reagent染色24h内进行荧光信号检测。

2.5    【可选】此时可用NucBlue活细胞染料(一种细胞核复染剂)或其他复染剂如Hoechst 33342(CAT#:MX4204-10ML)对细胞染色。

2.6    【可选】如果与其他试剂的多重标记实验要求进行细胞透化,可用0.5% Triton X-100透化处理10min。

应用示例

图II. CellROX Green Reagent测定牛肺动脉内皮细胞(BPAE)的氧化应激水平。在MatTek激光共聚焦专用玻底培养皿内铺BPAE细胞。之后用含维生素K3(100µM)或不含维生素K3的培养基37℃处理1h。向某些对照和维生素K3处理孔内加入N-乙酰半胱氨酸(NAC,50µM)。之后细胞用CellROX Green Reagent(5µM)和Hoechst 33342染色,前者加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后,在Zeiss Axiovert倒置显微镜下检测(40X物镜)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4801-1KIT Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit 活性氧(ROS)检测试剂盒 100~500T     
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA) 活性氧(ROS)荧光探针 50mg
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MM0707-500ML    30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液(30%双氧水) 500ml
MS5603-50ML tert-Butyl hydroperoxide (TBHP) Solution  叔丁基过氧化氢溶液 50ml
MZ2401-100UL PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸(5mg/ml) 100μl
MX4455-1MG Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
MM0706-1G Luminol 鲁米诺 1g
MX4606-500UG Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg
MX4815-50UL CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(绿色) 50µl

 

 

 

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(绿色)


描述

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection

氧化应激检测用探针(绿色)

 

温馨提示:

见我司整理的活性氧ROS荧光探针专题

见我司整理的CellROX Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测探针产品专题。

 

搜索关键词:

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧;DCFH-DA;HPF 羟苯基荧光素;Mitosox 线粒体超氧化物探针;Dihydroethidium (DHE)  二氢乙锭;ROSGreenTMH2O2Probe;Life (Molecular Probe) ;

 

订购信息:

产品名称 产品编号 规格               价格(元)   

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection     

氧化应激检测用探针(绿色)

MX4815-50UL         50µl 1988
MX4815-100UL 2×50µl 3778

 

产品描述:

CellROX Green Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光,一旦被活性氧物质(ROS)氧化并结合到DNA后发明亮稳定的绿色荧光,最大吸收/发射波长约~485/520 nm(见图I. CellROX Green氧化后的荧光光谱图)。其荧光信号主要定位在细胞核和线粒体。此染料能够被甲醛固定且能承受表面活性剂处理,因此,特别适合与其他兼容性染料和抗体进行多重标记检测。CellROX Green Reagent与各种检测平台兼容,比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器(HCS)、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选(HTS)。还与各种台式仪器兼容,比如FLoid™,Tali™,和Attune™仪器。

图1. CellROX Green氧化后的荧光光谱图

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供,浓度为2.5mM,操作简单,勿需清洗,与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料(50µl)足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光保存,保持干燥,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   本品对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.     需要自行准备的材料

1.1    细胞和培养基

1.2    生理盐缓冲液(PBS,pH 7.2-7.6)

1.3    【可选】固定剂(比如,溶于PBS的3.7%甲醛)

1.4    【可选】破膜剂(比如,0.5% Triton X-100)

2.     实验步骤

以下步骤专门为BPAE,HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发,优化后的染色工作浓度为5µM,但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验,建议设置浓度梯度,以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Green Reagent对光和空气敏感,使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2.1    用待测化合物或药物处理细胞,孵育一定时间。【注】:待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。

2.2    加CellROX Green Reagent到细胞内使其终浓度为5µM,37℃孵育30min。

2.3    去除培养基,用PBS清洗3次。

2.4    【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Green Reagent染色24h内进行荧光信号检测。

2.5    【可选】此时可用NucBlue活细胞染料(一种细胞核复染剂)或其他复染剂如Hoechst 33342(CAT#:MX4204-10ML)对细胞染色。

2.6    【可选】如果与其他试剂的多重标记实验要求进行细胞透化,可用0.5% Triton X-100透化处理10min。

应用示例

图II. CellROX Green Reagent测定牛肺动脉内皮细胞(BPAE)的氧化应激水平。在MatTek激光共聚焦专用玻底培养皿内铺BPAE细胞。之后用含维生素K3(100µM)或不含维生素K3的培养基37℃处理1h。向某些对照和维生素K3处理孔内加入N-乙酰半胱氨酸(NAC,50µM)。之后细胞用CellROX Green Reagent(5µM)和Hoechst 33342染色,前者加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后,在Zeiss Axiovert倒置显微镜下检测(40X物镜)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4801-1KIT Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit 活性氧(ROS)检测试剂盒 100~500T     
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA) 活性氧(ROS)荧光探针 50mg
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MM0707-500ML    30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液(30%双氧水) 500ml
MS5603-50ML tert-Butyl hydroperoxide (TBHP) Solution  叔丁基过氧化氢溶液 50ml
MZ2401-100UL PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸(5mg/ml) 100μl
MX4455-1MG Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
MM0706-1G Luminol 鲁米诺 1g
MX4606-500UG Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg
MX4815-50UL CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针(绿色) 50µl

 

 

 

TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂


描述

TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂

 

关键词:TRIzol Reagent;酚氯仿抽提;RNase-free H2O; Total RNA 总RNA提取;RNAlater;Invitrogen 15596026;

产品信息

产品名称 产品编号 规格  

价格(元)  

TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂    MF0403-100ML     100ml

450

产品描述

TRIzol Reagent是一种即用型且操作迅捷的总RNA抽提试剂,适用样本广泛,包括人、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样本。TRIzol Reagent是一种含酚、异硫氰酸胍和其他专利成分的单相溶液,有利于抽提分子量大小不一的各种RNA类型。TRIzol Reagent能够良好的维持RNA完整性,因能高效抑制样本匀浆过程中细胞破损和细胞组分溶解时释放的RNase活性。TRIzol Reagent能够同时处理大量样本,且以优化的方式一步法提取RNA,整个过程可在一小时内完成。

TRIzol Reagent分离的总RNA无蛋白质和DNA污染,适用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、poly(A)+筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆等下游实验。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   所有离心管、枪头以及相关溶液都必须无RNase污染。对于塑料制品、玻璃和金属器皿、实验仪器等可使用金畔生物的固相RNase清除剂去除RNase(货号:MF0406-100ML),或者用含0.01% DEPC(货号:MS5513-10ML)的去离子水浸泡过夜,之后高压灭菌、烘干。对于实验溶液可使用金畔生物的液相RNase清除剂(货号:MF0407-1.5ML)来处理或用DEPC处理水(比如:MF0404-500ML)来配制。

2)   对新鲜组织或细胞样本的抽提效果通常优于冻存的组织或细胞,由于组织或细胞冻融过程中可能存在一些RNase释放出来并酶切样品。若是不能及时抽提RNA,推荐先加入适量TRIzol Reagent,之后裂解样品后再冻存。

3)   TRIzol Reagent含有毒物质,请在操作过程中注意好防护工作,戴好手套和护眼罩,避免皮肤接触。在通风橱内完成操作,避免呼吸道吸入。

4)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.  需要自行准备的材料

水浴锅或微量恒温仪(Heat block)

异丙醇

75%乙醇

含0.5% SDS的RNase-free水或RNase-free水或DEPC处理水

【可选】RNase-free的糖原(核酸助沉剂)

2.  样本要求

【重要】:样本收集后立即进行RNA分离,或样本收集后立即冻存样本并保存在-80℃或液氮中直至RNA抽提。

样本类型 每mlTRIzol Reagent处理的起始样本量
组织(新鲜组织或保存在RNAlater等稳定液内的组织) 50~100mg组织
单层生长的细胞 1×105~1×107单细胞层(35mm培养皿,10cm2)
悬浮生长的细胞 5-10×106个细胞(动植物或酵母来源)或1×107个  

细胞(细菌来源)

 

3. 样本准备与分相

3.1 根据起始材料用TRIzol Reagent裂解和匀浆样本。

◇组织样本

按比例每50~100mg 组织加1ml TRIzol Reagent,之后用合适的方法进行匀浆。通常用50~100mg组织即可获得足量的RNA,满足绝大多数下游实验。加入过量组织或过少TRIzol都容易导致RNA提取失败。

a)对于研钵研磨:将液氮冻存组织,放到研钵中研磨成粉末,之后加入1ml TRIzol,继续研磨至组织完全裂解【研磨要迅速,最好不要超过1min】。b)对于玻璃匀浆器匀浆:加入1ml TRIzol上下手动匀浆组织10~15次。c)对于机械匀浆器:将组织放入塑料管内,将塑料管置于冰浴烧杯内,加入1ml TRIzol,将分散器头垂直插入管内与组织直接接触,设置转速12,000~20,000 rpm,上下移动试管10~20次,直至组织完全打散,无明显可见大块即可。

◇单层生长的细胞

吸尽培养基,之后往35mm培养皿(10cm2)内加入1ml TRIzol Reagent,晃动3~5次,再用移液枪上下吹打3~5次,使其充分裂解。【按照10cm2培养面积加入1ml TRIzol加量。比如:六孔板每孔加入1ml TRIzol,12孔板每孔加0.5ml TRIzol】

◇  悬浮生长的细胞

离心收集细胞,吸尽上清,每5-10×106个细胞(动植物或酵母来源)或1×107个细胞(细菌来源)加入1ml TRIzol Reagent【加入TRIzol前不要清洗细胞,否则会增加mRNA降解的可能性】。用枪吹打几次或适当涡旋,使其充分裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀浆,使其完全裂解。

【注意】:样本体积不要超过加入TRIzol体积的10%。

 

3.2 特殊样本处理【可选】:对于某些富含蛋白,多糖或脂肪的样本,经TRIzol Reagent裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物出现。此时需12,000g 4℃离心10min,之后吸取澄清的上清液至一新的离心管中。

3.3 室温孵育5min,使得核蛋白体完全分解。

3.4 按照每1ml TRIzol Reagent加入0.2ml 氯仿,盖紧盖子。涡旋混匀或用手剧烈晃动15s,室温孵育2~3min。

3.5 于12,000g 4℃离心15min。离心后混合物分为三层:下层酚-氯仿层,中间层,和上层无色的水相层。RNA无一例外的停留在水相层中。水相层的容量约为所加TRIzol Reagent体积的60%。用枪吸取上层无色水相到一新的离心管中,避免吸到任何中间层或下层成分。

【注意】:如果希望分离DNA和蛋白,请保留中间层和有机层。

 

4.      RNA分离

4.1    RNA的沉淀:a)【可选】如果起始样本量比较少(<106个细胞或<10mg组织),加入5-10μg RNase-free的糖原作为核酸助沉剂到水相中。b)按每ml起初TRIzol Reagent加入0.5ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10min。如果希望提取microRNA等小RNA,推荐-70℃沉淀过夜。c)于12,000g 4℃离心10min,在管底可见RNA沉淀,弃上清。

 

4.2    RNA的清洗:a)按每ml起初TRIzol Reagent加入1ml 75%乙醇重悬沉淀。【注:RNA在75%乙醇中-20℃至少保存1年,4℃至少1周】;b)低速漩涡或颠倒混匀,于7,500g 4℃离心5min,弃上清。再用离心机甩一下(>5,000rpm, 离心1秒),小心吸尽液体。c)操作的最后,简单干燥RNA沉淀(空气干燥或真空干燥5~10min)。不要在真空管里离心干燥RNA。尤为重要的是,不能让RNA沉淀完全干燥,否则会极大的降低其可溶性。部分溶解的RNA样本的A260/A280比值<1.6。

4.3    RNA的溶解:用20~50μl 无RNases水或含0.5% SDS的无RNases水溶解RNA,用枪上下吹打2~3次,使其充分溶解,置于-70℃保存或直接用于后续实验,如果后续要做酶切反应请勿用SDS。

【注意】:对于肝脏、胰腺、肾脏等RNase含量较高的组织,沉淀可用100%去离子甲酰胺(货号:MS5515-50ML)溶解。

 

5.      RNA产量的测定

5.1    用无RNase水稀释RNA,之后测定在260nm和280nm的吸收值。

5.2    使用公式A260×稀释倍数×40= μg RNA/ml。

5.3    计算A260/A280比值,比值在1.8~2.0之间视为纯度较高,浓度>4 μg/ml的样品适用于分光光度计测定。

5.4    进行甲醛变性琼脂糖电泳,确定RNA的完整性和污染情况。

相关产品

货号 名称 规格            
MF0403-100ML      TRIzol Reagent总RNA抽提试剂 100ml
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )    500ml
MF0406-100ML Surface RNase Remover固相RNase清除剂 100ml
MF0407-1.5ML Solution RNase Remover液相RNase清除剂 1.5ml
MF0409-50ML RNATector Stabilization Solution RNA稳定保存液 50ml
MF0410-100ML RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution冰冻组织RNA稳定液 100ml
MF0412-1G Glycogen (5mg/ml)核酸助沉剂糖原(5mg/ml) 1ml
MF0413-500UL Glycogen (20mg/ml)核酸助沉剂糖原(20mg/ml) 500µl
MF0416-100ML DNase/RNase-Free Water 100ml
MS5515-50ML Formamide Deionized去离子甲酰胺 50ml

附录1 常见问题与解决方案

出现问题 可能起因 解决方案
比预期产量低 样本未充分匀浆或裂解 降低起始样本量;剪切组织到更小块,确保组织完全浸泡到TRIzol Reagent以达到完全裂解。
沉淀未完全溶解 通过反复用枪吸取样品和在50~60℃加热样品的方式来增加溶解率
样本被降解 样本未及时处理或收集后未马上冻存 样本必须在收集后马上处理或立即冻存
溶液或使用管子未经RNase去除处理 确保实验中所用到的耗材和溶液不受RNase污染
样本制备物没有保存在适当温度下 将RNA样本保存在-70℃。
DNA污染 吸取水相层时带入中间/有机相层 不要尝试吸取离心分层后的所有水相层
RNA A260/A280低 在不足量的TRIzol Reagent内匀浆样品,RNA与蛋白质、DNA未完全分离 加入足量的TRIzol Reagent到样本
匀浆后样品未在室温放置5min,RNA与核蛋白未完全解离 匀浆后样品需室温放置5min
水相中混有有机相,带有蛋白质和DNA的污染 不要尝试吸取离心分层后的所有水相层
抽提得到的RNA沉淀未完全溶解 RNA需要完全溶解