标签归档：脱氧尿苷

5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷

发表于由

描述

5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷

产品标签

EdU 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷；BrdU 5-溴-2’-脱氧尿苷；Alexa Fluor 488 azide；Anti-BrdU antibody（DSHB，G3G4）；Cell Proliferation 细胞增殖检测；CAS NO: 59-14-3；

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）
5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷 MX4210-100MG 59-14-3 100mg 152
5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷 MX4210-1000MG 59-14-3 1g 542

产品描述

BrdU，英文全称5-bromo-2′-deoxyuridine，中文全称5-溴-2’-脱氧尿苷，是一种合成的胸苷溴化类似物，在S期可替代胸苷选择性插入细胞DNA。BrdU通常和广泛用于测定DNA合成和标记分裂细胞，最后用来研究诱导细胞增殖的信号通路和其他生理过程。BrdU通过体外细胞培养或体内注射的方式进行探针加载，然后用抗BrdU的抗体进行特异性检测。

BrdU标记后，对组织或细胞进行固定和透化后，需要额外的DNA水解步骤（有时也称DNA变性），从而允许抗BrdU的抗体能够与插入DNA的BrdU结合。BrdU抗体能够与其他细胞标记物如Ki67，双皮质素（DCX）和NeuN联合使用来鉴定增殖细胞和新分化神经元。

产品特性

1）CAS NO：59-14-3

2）化学名：5-Bromo-1-[(2R,4S,5R)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione

3）英文同义名：5-Bromodeoxyuridine, 5-bromo-2′-deoxy-uridine,5-Bromouracil deoxyriboside,Broxuridine, 5-Bromo-1-(2-deoxy-β-D-ribofuranosyl)uracil, Br-dU, BUdR, 5-BrdU

4）中文同义名：5-溴去氧尿苷，5-溴脱氧尿苷，溴尿嘧啶苷，5-溴尿嘧啶-2’-脱氧核苷

5）分子式：C9H11BrN2O

6）分子量：307.10 g/mol

7）纯度：≥99% (HPLC)

8）外观：白色至类白色粉末

9）溶解性：溶于DMSO（20mg/ml），无水乙醇（~25mg/ml），水（10mg/ml）

10）化学结构：

保存与运输方法

保存：-20°C干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. BrdU标记：体外标记细胞

制备BrdU储存液（10mM）：称取3mg BrdU（Mw：307.10）溶于1ml去离子水，充分溶解即可。

用细胞培养基按照1:1000的比例将储存液稀释到10μMBrdU染色液，并在无菌条件下用0.2μm滤膜对染色液进行过滤除菌。

吸掉细胞内培养基并更换无菌的10μMBrdU染色液，置于CO2培养箱37ºC孵育1-24h。【注意】：BrdU孵育时间取决于细胞分裂速度。原代细胞可能要高达24h，但快速增值细胞系可能仅需1h。达到最佳信噪比的时间需要通过优化条件来确定。

吸掉细胞内染色液，用PBS清洗2次，每次至少5s。

根据标准免疫细胞化学（ICC）操作流程进行细胞固定和透化。但是在开始免疫染色前需参照下述的DNA水解步骤。

2. BrdU标记：BrdU体内标记

【注意】：BrdU体内标记方法比较多，常见的有腹腔注射法（Intraperitoneal injection）和口服法。以下为腹腔注射法的步骤，其他方法可参考文献或根据实验室固有经验操作。

用1×PBS溶解适量的BrdU配制成10mg/ml储存液，过滤除菌，按照单次用量分装冻存后待用，避免反复冻融。

对于小鼠，通用情况注射浓度为100mg/kg。

BrdU标记完成后，根据实验室已成的步骤处理动物。【注意】：BrdU插入快速分化组织比如小肠，在注射后30min就能检测到。但大多数组织可能需要高达24h才能检测到。合适的处理时间和注射剂量需要根据组织类型来优化。

3. DNA水解（DNA变性步骤）

3.1 细胞样本

用1-2.5M HCl室温孵育细胞10min-1h，实际的HCl浓度和孵育时间根据实验来优化。如果使用更短的孵育时间，37°C孵育可能比室温孵育效果更好

可选步骤：去除HCl，用0.1M硼酸钠缓冲液，pH 8.5室温中和30min。【注意】：0.1M硼酸钠缓冲液（pH 8.5）配置方法：称取3.8g硼酸钠（Mw=381.4）加入100ml蒸馏水，充分溶解后，用NaOH调整到所需pH。
用PBS清洗3次，每次不少于5s。

根据标准ICC操作流程继续后续染色。

3.2 组织切片

【注意】：对于石蜡切片必须先做脱蜡处理再进行DNA水解步骤。

用1-2 M HCl室温孵育切片30min-1h，实际的HCl浓度和孵育时间根据实验来优化。如果使用更短的孵育时间，37°C孵育可能比室温孵育效果更好。

可选步骤：去除HCl，用0.1M硼酸钠缓冲液（pH 8.5）室温中和切片10min。【注意】：0.1M硼酸钠缓冲液，pH 8.5配置方法：称取3.8g硼酸钠（Mw=381.4）加入100ml蒸馏水，充分溶解后，用NaOH调整到所需pH。

用PBS清洗3次，每次不少于5s。

根据标准IHC操作流程继续免疫染色步骤。

注意事项

1）BrdU是一种诱变剂，操作过程一定要注意防护，不要与皮肤直接接触。另戴口罩避免粉尘吸入。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关内容（与anti-BrdU的共染色）

目的：BrdU常与其他抗体联合使用以鉴定增殖和新分化神经元。常见以下3个指标：

Ki67：反映增殖的细胞标记物，细胞周期G1，S，G2和M期有Ki67表达，但静止期G0无Ki67表达。Ki67抗体能够替代或与Brdu联合使用来标记增殖神经元。

双皮质素（Doublecortin，DCX）：微管相关的磷酸蛋白，由未成熟神经元表达。可与BrdU联合使用鉴定未成熟的有丝分裂后神经元。

NeuN：成熟神经元标记物，能与BrdU联合染色去鉴定新分化的神经元。

相关产品：

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
BrdU 5-溴-2’-脱氧尿苷 MX4210-100MG 100mg 180
EdU 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷 MX4211-50MG 50mg 518
G3G4 (mouse anti-BrdU antibody)（DSHB） G3G4 100μl 1200
过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG (H+L) MM51001-100UL 100µl 220
FITC标记山羊抗小鼠IgG（H+L） MM51004-100UL 100µl 200

5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷

发表于由

描述

5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷

产品标签

EdU 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷；BrdU 5-溴-2’-脱氧尿苷；Alexa Fluor 488 azide；Anti-BrdU antibody（DSHB，G3G4）；Cell Proliferation 细胞增殖检测；CAS NO:61135-33-9；

产品信息

  产品名称   产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）
  5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷   MX4211-50MG 61135-33-9 50mg 452
  5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷   MX4211-250MG 61135-33-9 250mg 1192

产品描述

EdU，英文全称5-Ethynyl-2′-deoxyuridine，中文全称5-乙炔基-2’-脱氧尿苷，是BrdU（5-溴-2’-脱氧尿苷）的新型替代物，可直接检测活跃的DNA合成或细胞周期的S期合成。作为胸苷的核苷类似物，可插入细胞培养物或动物体内处于活跃合成期的细胞DNA，无明显毒性。EdU的检测基于高效的点击化学反应（click reaction），是由I价铜离子催化的叠氮化物和炔烃化合物之间的反应过程。EdU含有炔烃基，可与含叠氮基团的荧光探针反应形成稳定的三唑环。

借EdU的点击反应进行DNA检测的优势是非常显而易见的。含叠氮基团荧光探针的小分子量使得EdU能在温和条件插入DNA，这相反于BrdU为基础的反应，后者需要DNA变性（通常使用HCl，加热或DNase消化）促使BrdU暴露，从而被抗BrdU抗体检测到。因此，少了变性步骤的EdU反应流程快键方便，可得到高重复性的结果，并且能轻易的与相关抗体检测靶标包括磷酸化H3、Ki67、周期蛋白cyclin B1等进行多重分析，通过流式细胞仪、荧光显微镜或高通量成像仪（HCS）来检测。

产品特性

1）CAS NO：61135-33-9

2）同义名：2′-deoxy-5-ethynyl-uridine2’-脱氧-5-乙炔基-尿苷, 2′-deoxy-5-Ethynyluridine, 5-EdU,EdU

3）分子式：C11H12N2O5

4）分子量：252.23 g/mol

5）纯度：≥98% (HPLC)

6）外观：白色至类白色固体

7）溶解性：溶于DMSO（20mg/ml），无水乙醇（~25mg/ml），PBS, pH 7.2（~10 mg/ml）

8）化学结构：

保存与运输方法

保存：-20°C干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

常见问题（FAQs）

1. 是否任何细胞型都能插入EdU？

答：不是。细胞必须含嘧啶核苷酸补救合成途径（pyrimidine salvage pathway），没有该途径，EdU不能被磷酸化进而不能插入复制中的DNA。

2. EdU储存液如何制备？

答：体外细胞实验，取适量EdU（Mw：252.23）溶于DMSO或生理缓冲液配制10mM母液，按单次用量分装，置于≤-20°C冻存，1年稳定。

3. 如何进行EdU标记？

起始实验建议测试一系列EdU浓度来确定最佳浓度。如果目前有进行基于BrdU的标记实验，可选择相似的浓度和标记时间作为起始EdU标记条件。更低量的EdU可能达到同BrdU的标记效果，最优浓度根据标记时间有所变化，原则上浓度越低，标记时间越长。

对于细胞培养物——哺乳动物和植物细胞用0.1–10 µM EdU孵育0.5-3h能达到相对理想的标记；

对于活体动物——根据注射方式、给药次数和检测位置有所变化。参考相应文献进行优化调整。

4. 如何进行EdU检测？

使用含叠氮基团的荧光探针如TAMRA azide，Alexa Fluor azide（包括Alexa fluor 488, 555, 594, 647）等，在含有CuSO4的染色反应液中进行荧光染色。或者直接使用我司提供的EdU增殖检测试剂盒（成像或流式检测），含有所有检测组分，使用方便。

注意事项

1）EdU是一种能插入DNA的核苷类似物，操作过程一定要注意防护，不要与皮肤直接接触。另需戴口罩避免粉尘吸入。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

— — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

 

5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷

发表于由

描述

5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷

产品标签

EdU 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷；BrdU 5-溴-2’-脱氧尿苷；Alexa Fluor 488 azide；Anti-BrdU antibody（DSHB，G3G4）；Cell Proliferation 细胞增殖检测；CAS NO:61135-33-9；

产品信息

  产品名称   产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）
  5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷   MX4211-50MG 61135-33-9 50mg 452
  5-Ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷   MX4211-250MG 61135-33-9 250mg 1192

产品描述

EdU，英文全称5-Ethynyl-2′-deoxyuridine，中文全称5-乙炔基-2’-脱氧尿苷，是BrdU（5-溴-2’-脱氧尿苷）的新型替代物，可直接检测活跃的DNA合成或细胞周期的S期合成。作为胸苷的核苷类似物，可插入细胞培养物或动物体内处于活跃合成期的细胞DNA，无明显毒性。EdU的检测基于高效的点击化学反应（click reaction），是由I价铜离子催化的叠氮化物和炔烃化合物之间的反应过程。EdU含有炔烃基，可与含叠氮基团的荧光探针反应形成稳定的三唑环。

借EdU的点击反应进行DNA检测的优势是非常显而易见的。含叠氮基团荧光探针的小分子量使得EdU能在温和条件插入DNA，这相反于BrdU为基础的反应，后者需要DNA变性（通常使用HCl，加热或DNase消化）促使BrdU暴露，从而被抗BrdU抗体检测到。因此，少了变性步骤的EdU反应流程快键方便，可得到高重复性的结果，并且能轻易的与相关抗体检测靶标包括磷酸化H3、Ki67、周期蛋白cyclin B1等进行多重分析，通过流式细胞仪、荧光显微镜或高通量成像仪（HCS）来检测。

产品特性

1）CAS NO：61135-33-9

2）同义名：2′-deoxy-5-ethynyl-uridine2’-脱氧-5-乙炔基-尿苷, 2′-deoxy-5-Ethynyluridine, 5-EdU,EdU

3）分子式：C11H12N2O5

4）分子量：252.23 g/mol

5）纯度：≥98% (HPLC)

6）外观：白色至类白色固体

7）溶解性：溶于DMSO（20mg/ml），无水乙醇（~25mg/ml），PBS, pH 7.2（~10 mg/ml）

8）化学结构：

保存与运输方法

保存：-20°C干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

常见问题（FAQs）

1. 是否任何细胞型都能插入EdU？

答：不是。细胞必须含嘧啶核苷酸补救合成途径（pyrimidine salvage pathway），没有该途径，EdU不能被磷酸化进而不能插入复制中的DNA。

2. EdU储存液如何制备？

答：体外细胞实验，取适量EdU（Mw：252.23）溶于DMSO或生理缓冲液配制10mM母液，按单次用量分装，置于≤-20°C冻存，1年稳定。

3. 如何进行EdU标记？

起始实验建议测试一系列EdU浓度来确定最佳浓度。如果目前有进行基于BrdU的标记实验，可选择相似的浓度和标记时间作为起始EdU标记条件。更低量的EdU可能达到同BrdU的标记效果，最优浓度根据标记时间有所变化，原则上浓度越低，标记时间越长。

对于细胞培养物——哺乳动物和植物细胞用0.1–10 µM EdU孵育0.5-3h能达到相对理想的标记；

对于活体动物——根据注射方式、给药次数和检测位置有所变化。参考相应文献进行优化调整。

4. 如何进行EdU检测？

使用含叠氮基团的荧光探针如TAMRA azide，Alexa Fluor azide（包括Alexa fluor 488, 555, 594, 647）等，在含有CuSO4的染色反应液中进行荧光染色。或者直接使用我司提供的EdU增殖检测试剂盒（成像或流式检测），含有所有检测组分，使用方便。

注意事项

1）EdU是一种能插入DNA的核苷类似物，操作过程一定要注意防护，不要与皮肤直接接触。另需戴口罩避免粉尘吸入。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

— — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

 

5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷

发表于由

描述

5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷

产品标签

EdU 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷；BrdU 5-溴-2’-脱氧尿苷；Alexa Fluor 488 azide；Anti-BrdU antibody（DSHB，G3G4）；Cell Proliferation 细胞增殖检测；CAS NO: 59-14-3；

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）
5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷 MX4210-100MG 59-14-3 100mg 152
5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU ) 5-溴-2’-脱氧尿苷 MX4210-1000MG 59-14-3 1g 542

产品描述

BrdU，英文全称5-bromo-2′-deoxyuridine，中文全称5-溴-2’-脱氧尿苷，是一种合成的胸苷溴化类似物，在S期可替代胸苷选择性插入细胞DNA。BrdU通常和广泛用于测定DNA合成和标记分裂细胞，最后用来研究诱导细胞增殖的信号通路和其他生理过程。BrdU通过体外细胞培养或体内注射的方式进行探针加载，然后用抗BrdU的抗体进行特异性检测。

BrdU标记后，对组织或细胞进行固定和透化后，需要额外的DNA水解步骤（有时也称DNA变性），从而允许抗BrdU的抗体能够与插入DNA的BrdU结合。BrdU抗体能够与其他细胞标记物如Ki67，双皮质素（DCX）和NeuN联合使用来鉴定增殖细胞和新分化神经元。

产品特性

1）CAS NO：59-14-3

2）化学名：5-Bromo-1-[(2R,4S,5R)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione

3）英文同义名：5-Bromodeoxyuridine, 5-bromo-2′-deoxy-uridine,5-Bromouracil deoxyriboside,Broxuridine, 5-Bromo-1-(2-deoxy-β-D-ribofuranosyl)uracil, Br-dU, BUdR, 5-BrdU

4）中文同义名：5-溴去氧尿苷，5-溴脱氧尿苷，溴尿嘧啶苷，5-溴尿嘧啶-2’-脱氧核苷

5）分子式：C9H11BrN2O

6）分子量：307.10 g/mol

7）纯度：≥99% (HPLC)

8）外观：白色至类白色粉末

9）溶解性：溶于DMSO（20mg/ml），无水乙醇（~25mg/ml），水（10mg/ml）

10）化学结构：

保存与运输方法

保存：-20°C干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. BrdU标记：体外标记细胞

制备BrdU储存液（10mM）：称取3mg BrdU（Mw：307.10）溶于1ml去离子水，充分溶解即可。

用细胞培养基按照1:1000的比例将储存液稀释到10μMBrdU染色液，并在无菌条件下用0.2μm滤膜对染色液进行过滤除菌。

吸掉细胞内培养基并更换无菌的10μMBrdU染色液，置于CO2培养箱37ºC孵育1-24h。【注意】：BrdU孵育时间取决于细胞分裂速度。原代细胞可能要高达24h，但快速增值细胞系可能仅需1h。达到最佳信噪比的时间需要通过优化条件来确定。

吸掉细胞内染色液，用PBS清洗2次，每次至少5s。

根据标准免疫细胞化学（ICC）操作流程进行细胞固定和透化。但是在开始免疫染色前需参照下述的DNA水解步骤。

2. BrdU标记：BrdU体内标记

【注意】：BrdU体内标记方法比较多，常见的有腹腔注射法（Intraperitoneal injection）和口服法。以下为腹腔注射法的步骤，其他方法可参考文献或根据实验室固有经验操作。

用1×PBS溶解适量的BrdU配制成10mg/ml储存液，过滤除菌，按照单次用量分装冻存后待用，避免反复冻融。

对于小鼠，通用情况注射浓度为100mg/kg。

BrdU标记完成后，根据实验室已成的步骤处理动物。【注意】：BrdU插入快速分化组织比如小肠，在注射后30min就能检测到。但大多数组织可能需要高达24h才能检测到。合适的处理时间和注射剂量需要根据组织类型来优化。

3. DNA水解（DNA变性步骤）

3.1 细胞样本

用1-2.5M HCl室温孵育细胞10min-1h，实际的HCl浓度和孵育时间根据实验来优化。如果使用更短的孵育时间，37°C孵育可能比室温孵育效果更好

可选步骤：去除HCl，用0.1M硼酸钠缓冲液，pH 8.5室温中和30min。【注意】：0.1M硼酸钠缓冲液（pH 8.5）配置方法：称取3.8g硼酸钠（Mw=381.4）加入100ml蒸馏水，充分溶解后，用NaOH调整到所需pH。
用PBS清洗3次，每次不少于5s。

根据标准ICC操作流程继续后续染色。

3.2 组织切片

【注意】：对于石蜡切片必须先做脱蜡处理再进行DNA水解步骤。

用1-2 M HCl室温孵育切片30min-1h，实际的HCl浓度和孵育时间根据实验来优化。如果使用更短的孵育时间，37°C孵育可能比室温孵育效果更好。

可选步骤：去除HCl，用0.1M硼酸钠缓冲液（pH 8.5）室温中和切片10min。【注意】：0.1M硼酸钠缓冲液，pH 8.5配置方法：称取3.8g硼酸钠（Mw=381.4）加入100ml蒸馏水，充分溶解后，用NaOH调整到所需pH。

用PBS清洗3次，每次不少于5s。

根据标准IHC操作流程继续免疫染色步骤。

注意事项

1）BrdU是一种诱变剂，操作过程一定要注意防护，不要与皮肤直接接触。另戴口罩避免粉尘吸入。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关内容（与anti-BrdU的共染色）

目的：BrdU常与其他抗体联合使用以鉴定增殖和新分化神经元。常见以下3个指标：

Ki67：反映增殖的细胞标记物，细胞周期G1，S，G2和M期有Ki67表达，但静止期G0无Ki67表达。Ki67抗体能够替代或与Brdu联合使用来标记增殖神经元。

双皮质素（Doublecortin，DCX）：微管相关的磷酸蛋白，由未成熟神经元表达。可与BrdU联合使用鉴定未成熟的有丝分裂后神经元。

NeuN：成熟神经元标记物，能与BrdU联合染色去鉴定新分化的神经元。

相关产品：

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
BrdU 5-溴-2’-脱氧尿苷 MX4210-100MG 100mg 180
EdU 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷 MX4211-50MG 50mg 518
G3G4 (mouse anti-BrdU antibody)（DSHB） G3G4 100μl 1200
过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG (H+L) MM51001-100UL 100µl 220
FITC标记山羊抗小鼠IgG（H+L） MM51004-100UL 100µl 200