D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐


描述

Luc 报告基因底物/ D-Luciferin D-萤火虫荧光素钾盐

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒


描述

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒

 

产品标签

Firefly Luciferase萤火虫荧光素酶;Photinus pyralis;报告基因检测;D-luciferin sodium D-荧光素钠盐;ATP生物发光检测;CAS:61970-00-1;

 

产品信息

产品名称

产品编号     规格

价格(元)

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒

MF4001-100T    100T       716
MF4001-1000T     1000T

3966

 

产品描述

萤火虫萤光素酶(Firefly Luciferase)普遍用作一种报告基因来研究基因调控和功能,以及用于药物筛选。由于哺乳动物细胞或组织缺乏任何内源性的荧光素酶活性和生物发光的天然属性,萤火虫荧光素酶是一种非常灵敏的遗传报告子。萤火虫萤光素酶是一种分子量~61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化萤光素(Luciferin)氧化成氧化荧光素(Oxyluciferin),在此氧化过程中释放出生物萤光(Bioluminescence)。这一荧光可通过化学发光仪(Luminometer)或液闪测定仪进行测定。

 

 

 

本萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit),正是利用萤光素为底物来检测细胞内萤火虫萤光素酶活性的试剂盒,操作简单、快速、灵敏且呈良好的线性关系。

 

产品组分

组分编号

组分名称 产品货号(规格)
MF4001-100T      

  MF4001-1000T    

MF4001-A Cell Culture Lysis Buffer细胞裂解液 60ml 10×60ml
MF4001-B Luciferase Assay Reagent萤火虫荧光素酶检测试剂 10ml 10×10ml

保存与运输方法

保存:细胞裂解液置于4℃保存三个月有效,-20℃保存一年有效;萤火虫荧光素酶检测试剂置于-20℃六个月有效,-80℃避光保存一年有效; 

运输:冰袋运输。

 

注意事项

1) 为了保证萤火虫荧光素酶检测试剂的稳定性,建议初次使用进行适当分装,避光冻存,尽量降低反复冻融次数。内部测试显示反复冻融三次对测定结果无明显影响。

2) 由于温度对酶活性有影响,测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。

 

3) 为取得最佳测定结果,用单管的化学发光仪测定时,样品和试剂混合后到测定前的时间需尽量控制在相同时间,比如30s内;使用具化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,最好先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫荧光素酶检测试剂。

4) 样品和试剂混合后,必须等待1~2s,再进行测定。测定时间通常为10s,根据情况可适当延长或缩短,但同一批样品宜使用相同的测定时间。

 

5) 为避免由于质粒转染细胞效率差异引起的误差,可同时转入海肾荧光素酶报告基因质粒作为内参,用我司的双荧光素酶报告基因检测试剂盒(货号:MF4010-100T)进行检测。

6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

一、 细胞裂解

1.1 将含转染有报告基因质粒的细胞内的培养基去除,对于贴壁细胞直接加PBS轻轻洗涤,对于悬浮细胞,低速离心收集细胞后用PBS轻轻洗涤。

1.2 将细胞裂解液充分混匀后,按下表用量来加入适量细胞裂解液,之后将培养板放在微型振荡器上室温震荡15min,以充分裂解细胞。

培养皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
细胞裂解液(μl/孔) 100 150 200 300 500
【注①】:如果荧光素酶的表达水平比较低,可尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可减少到100μl。【注②】:细胞裂解后可立即测定荧光素酶活,也可置于-70℃冻存,避免反复冻融,待以后再测定。冻存样品需充分融解,达到室温后再进行酶活测定。

1.3 将充分裂解后的产物于10,000~15,000rpm室温离心3~5min,取上清用于测定。

 

二、 荧光素酶检测

2.1 融解萤光素酶检测试剂,并达到室温。

2.2 按仪器说明书开启化学发光仪或具有检测化学发光功能的多功能酶标仪,设定参数,测定间隔设为2s,测定时间设为10s。

2.3 将细胞裂解产物按照20~100μl的体积加入测量管中(如果裂解产物足够,请加入100μl;如果裂解产物不足可以适当减少用量,但同批裂解产物的使用量宜保持一致)。

2.4 加入100μl萤光素酶检测试剂,用枪打匀或用其它适当方式混匀后测定RLU(Relative light unit)。以细胞裂解液为空白对照。

 

相关产品

货号 名称 规格
MF4001-100T Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫萤光素酶报告基因检测 100T
MF4006-100T Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit 海肾萤光素酶报告基因检测 100T
MF4010-100T Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 双荧光素酶报告基因检测试剂盒 100T
MX4602-100MG D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐 100mg
MX4603-100MG D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐 100mg
MX4606-500UG Coelenterazine Native天然腔肠素 500μg
MX4608-500UG Coelenterazine h腔肠素h 500μg

 

 

 

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒


描述

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒

 

产品标签

Firefly Luciferase萤火虫荧光素酶;Photinus pyralis;报告基因检测;D-luciferin sodium D-荧光素钠盐;ATP生物发光检测;CAS:61970-00-1;

 

产品信息

产品名称

产品编号     规格

价格(元)

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒

MF4001-100T    100T       716
MF4001-1000T     1000T

3966

 

产品描述

萤火虫萤光素酶(Firefly Luciferase)普遍用作一种报告基因来研究基因调控和功能,以及用于药物筛选。由于哺乳动物细胞或组织缺乏任何内源性的荧光素酶活性和生物发光的天然属性,萤火虫荧光素酶是一种非常灵敏的遗传报告子。萤火虫萤光素酶是一种分子量~61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化萤光素(Luciferin)氧化成氧化荧光素(Oxyluciferin),在此氧化过程中释放出生物萤光(Bioluminescence)。这一荧光可通过化学发光仪(Luminometer)或液闪测定仪进行测定。

 

 

 

本萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit),正是利用萤光素为底物来检测细胞内萤火虫萤光素酶活性的试剂盒,操作简单、快速、灵敏且呈良好的线性关系。

 

产品组分

组分编号

组分名称 产品货号(规格)
MF4001-100T      

  MF4001-1000T    

MF4001-A Cell Culture Lysis Buffer细胞裂解液 60ml 10×60ml
MF4001-B Luciferase Assay Reagent萤火虫荧光素酶检测试剂 10ml 10×10ml

保存与运输方法

保存:细胞裂解液置于4℃保存三个月有效,-20℃保存一年有效;萤火虫荧光素酶检测试剂置于-20℃六个月有效,-80℃避光保存一年有效; 

运输:冰袋运输。

 

注意事项

1) 为了保证萤火虫荧光素酶检测试剂的稳定性,建议初次使用进行适当分装,避光冻存,尽量降低反复冻融次数。内部测试显示反复冻融三次对测定结果无明显影响。

2) 由于温度对酶活性有影响,测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。

 

3) 为取得最佳测定结果,用单管的化学发光仪测定时,样品和试剂混合后到测定前的时间需尽量控制在相同时间,比如30s内;使用具化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,最好先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫荧光素酶检测试剂。

4) 样品和试剂混合后,必须等待1~2s,再进行测定。测定时间通常为10s,根据情况可适当延长或缩短,但同一批样品宜使用相同的测定时间。

 

5) 为避免由于质粒转染细胞效率差异引起的误差,可同时转入海肾荧光素酶报告基因质粒作为内参,用我司的双荧光素酶报告基因检测试剂盒(货号:MF4010-100T)进行检测。

6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

一、 细胞裂解

1.1 将含转染有报告基因质粒的细胞内的培养基去除,对于贴壁细胞直接加PBS轻轻洗涤,对于悬浮细胞,低速离心收集细胞后用PBS轻轻洗涤。

1.2 将细胞裂解液充分混匀后,按下表用量来加入适量细胞裂解液,之后将培养板放在微型振荡器上室温震荡15min,以充分裂解细胞。

培养皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
细胞裂解液(μl/孔) 100 150 200 300 500
【注①】:如果荧光素酶的表达水平比较低,可尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可减少到100μl。【注②】:细胞裂解后可立即测定荧光素酶活,也可置于-70℃冻存,避免反复冻融,待以后再测定。冻存样品需充分融解,达到室温后再进行酶活测定。

1.3 将充分裂解后的产物于10,000~15,000rpm室温离心3~5min,取上清用于测定。

 

二、 荧光素酶检测

2.1 融解萤光素酶检测试剂,并达到室温。

2.2 按仪器说明书开启化学发光仪或具有检测化学发光功能的多功能酶标仪,设定参数,测定间隔设为2s,测定时间设为10s。

2.3 将细胞裂解产物按照20~100μl的体积加入测量管中(如果裂解产物足够,请加入100μl;如果裂解产物不足可以适当减少用量,但同批裂解产物的使用量宜保持一致)。

2.4 加入100μl萤光素酶检测试剂,用枪打匀或用其它适当方式混匀后测定RLU(Relative light unit)。以细胞裂解液为空白对照。

 

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货号 名称 规格
MF4001-100T Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫萤光素酶报告基因检测 100T
MF4006-100T Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit 海肾萤光素酶报告基因检测 100T
MF4010-100T Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 双荧光素酶报告基因检测试剂盒 100T
MX4602-100MG D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐 100mg
MX4603-100MG D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐 100mg
MX4606-500UG Coelenterazine Native天然腔肠素 500μg
MX4608-500UG Coelenterazine h腔肠素h 500μg

 

 

 

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描述

Luc 报告基因底物/ D-Luciferin D-萤火虫荧光素钾盐

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号

产品名称 规格 价格(元)     货期            
MX4603-100MG       D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐)      100mg          

998

现货

MX4603-500MG

D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 500mg 2500

现货

MX4603-1G D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 1g 4500

现货

MX4603-5G D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 5×1g 20200

现货

MX4603-10G D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 10×1g 36400

现货

 

相关产品:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。

货号                      产品名称 规格        价格(元)    货期         
MX4602-100MG      D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐) 100mg 998 现货
MX4602-500MG D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐) 500mg 2500 现货
MX4601-250MG D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)  250mg 1800 现货
MX4604-10MG DMNPE-caged Luciferin D-荧光素(DMNPE笼闭) 10mg 1350 现货

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐


描述

Luc 报告基因底物/ D-Luciferin D-萤火虫荧光素钾盐

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐


描述

Luc 报告基因底物/ D-Luciferin D-萤火虫荧光素钾盐

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

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描述

Luc 报告基因底物/ D-Luciferin D-萤火虫荧光素钾盐

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

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D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 500mg 2500

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注意事项

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描述

Luc报告基因底物/ D-Luciferin荧光素钠盐/超纯级别

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:103404-75-7;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

基本特性:

1)CAS NO:103404-75-7

2)化学名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

3)分子式:NaC11H7N2O3S2· H2O

4)分子量:320.32 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(高达100 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)  储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钠盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)  荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)  收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)  萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c)如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钠盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式

剂量

静脉注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液                      

腹腔注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射(27 gauge针头)

50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射(pipette)

50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

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 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐


描述

Luc报告基因底物/ D-Luciferin荧光素钠盐/超纯级别

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:103404-75-7;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

基本特性:

1)CAS NO:103404-75-7

2)化学名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

3)分子式:NaC11H7N2O3S2· H2O

4)分子量:320.32 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(高达100 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)  储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钠盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)  荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)  收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)  萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c)如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钠盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式

剂量

静脉注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液                      

腹腔注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射(27 gauge针头)

50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射(pipette)

50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。网站:www.maokangbio.com。

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D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)      

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D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

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D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

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D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐)

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D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)  

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DMNPE-caged Luciferin D-荧光素(DMNPE笼闭)

10mg

1350

现货

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐


描述

Luc报告基因底物/ D-Luciferin荧光素钠盐/超纯级别

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:103404-75-7;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

基本特性:

1)CAS NO:103404-75-7

2)化学名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

3)分子式:NaC11H7N2O3S2· H2O

4)分子量:320.32 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(高达100 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)  储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钠盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)  荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)  收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)  萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c)如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钠盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式

剂量

静脉注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液                      

腹腔注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射(27 gauge针头)

50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射(pipette)

50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

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10mg

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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐


描述

Luc报告基因底物/ D-Luciferin荧光素钠盐/超纯级别

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:103404-75-7;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

基本特性:

1)CAS NO:103404-75-7

2)化学名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

3)分子式:NaC11H7N2O3S2· H2O

4)分子量:320.32 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(高达100 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)  储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钠盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)  荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)  收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)  萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c)如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钠盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式

剂量

静脉注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液                      

腹腔注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射(27 gauge针头)

50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射(pipette)

50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

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10mg

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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐


描述

Luc报告基因底物/ D-Luciferin荧光素钠盐/超纯级别

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词:

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:103404-75-7;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

基本特性:

1)CAS NO:103404-75-7

2)化学名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

3)分子式:NaC11H7N2O3S2· H2O

4)分子量:320.32 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(高达100 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)  储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钠盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)  荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)  收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)  萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c)如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钠盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式

剂量

静脉注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液                      

腹腔注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射(27 gauge针头)

50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射(pipette)

50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

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货号

产品名称

规格            

价格(元)    

货期          

MX4602-100MG 

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)      

100mg

998

现货

MX4602-500MG

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

500mg

2500

现货

MX4602-1G

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

1g

4500

现货

MX4602-5G

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

5×1g

20200

现货

MX4602-10G

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐)

10×1g

36400

现货

 

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货号

产品名称

规格         

价格(元)

货期

MX4603-100MG

D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐)

100mg

998

现货

MX4603-500MG

D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐)

500mg

2500

现货

MX4601-250MG

D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)  

250mg

1800

现货

MX4604-10MG

DMNPE-caged Luciferin D-荧光素(DMNPE笼闭)

10mg

1350

现货

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/MKBio金畔所有】